摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 杆状病毒简介 | 第13-20页 |
1.1.1 杆状病毒的分类 | 第13页 |
1.1.2 杆状病毒的感染周期 | 第13-14页 |
1.1.3 杆状病毒的表达系统 | 第14-16页 |
1.1.4 杆状病毒的囊膜蛋白 | 第16-18页 |
1.1.5 杆状病毒的其他应用 | 第18-20页 |
1.2 量子点标记杆状病毒粒子的研究进展 | 第20-21页 |
1.3 国内外研究现状及本研究意义 | 第21-23页 |
1.3.1 国内外研究现状 | 第21-22页 |
1.3.2 本课题研究意义 | 第22-23页 |
第2章 量子点标记BmNPV芽生病毒粒子 | 第23-39页 |
2.1 材料与方法 | 第23-31页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第23页 |
2.1.2 常用试剂和缓冲液的配制 | 第23-25页 |
2.1.3 引物设计 | 第25页 |
2.1.4 pFastBacDual重组供体载体的构建 | 第25-26页 |
2.1.5 重组杆状病毒Bacmid的构建 | 第26-28页 |
2.1.6 重组杆状病毒Bacmid转染BmN细胞 | 第28页 |
2.1.7 重组杆状病毒RBV的扩增及纯化 | 第28-29页 |
2.1.8 Western-blot分析 | 第29-30页 |
2.1.9 终点稀释法(EPDA)病毒滴度的测定 | 第30页 |
2.1.10 一步法生长曲线的绘制 | 第30页 |
2.1.11 量子点标记重组杆状病毒 | 第30-31页 |
2.2 实验结果与分析 | 第31-37页 |
2.2.1 eGFP,vp39,bira,Pph-eGFP-vp39-SV40等目的基因的获得 | 第31-32页 |
2.2.2 重组供体载体的获得 | 第32-33页 |
2.2.3 重组杆状病毒Bacmid的获得 | 第33-34页 |
2.2.4 重组杆状病毒Bacmid转染BmN细胞的情况 | 第34页 |
2.2.5 Westernblot验证分析 | 第34-35页 |
2.2.6 一步法生长曲线分析 | 第35-36页 |
2.2.7 量子点标记重组杆状病毒 | 第36页 |
2.2.8 激光共聚焦显微镜示踪 | 第36-37页 |
2.3 讨论 | 第37-39页 |
第3章 不同长度GP64信号肽重组杆状病毒分析 | 第39-49页 |
3.1 材料与方法 | 第39-43页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第39页 |
3.1.2 实验仪器和设备 | 第39页 |
3.1.3 实验室常用试剂和缓冲液的配制 | 第39-41页 |
3.1.4 引物设计 | 第41页 |
3.1.5 pFastBacDual重组供体载体的构建 | 第41-42页 |
3.1.6 重组杆状病毒Bacmid的构建 | 第42页 |
3.1.7 重组杆状病毒Bacmid转染BmN细胞 | 第42页 |
3.1.8 一步法生长曲线的绘制 | 第42-43页 |
3.1.9 瞬时表达载体的构建 | 第43页 |
3.1.10 免疫荧光 | 第43页 |
3.2 实验结果与分析 | 第43-47页 |
3.2.1 SPⅡgp64,SPIgp64目的基因的获得 | 第43-44页 |
3.2.2 pFastBacDual重组供体载体的获得 | 第44-45页 |
3.2.3 重组杆状病毒Bacmid的获得 | 第45页 |
3.2.4 重组杆状病毒感染性分析 | 第45-46页 |
3.2.5 一步法生长曲线分析 | 第46页 |
3.2.6 瞬时表达载体的获得 | 第46-47页 |
3.2.7 免疫荧光结果分析 | 第47页 |
3.3 讨论 | 第47-49页 |
第4章 不同GP64信号肽引导eGFP定位差异分析 | 第49-59页 |
4.1 材料与方法 | 第49-54页 |
4.1.1 材料与试剂 | 第49页 |
4.1.2 构建重组质粒的方法 | 第49-53页 |
4.1.3 引物设计 | 第53页 |
4.1.4 不同信号肽引导eGFP定位的瞬时载体的构建 | 第53-54页 |
4.1.5 瞬时转染BmNSf9Bm5细胞 | 第54页 |
4.1.6 Westernblot表征 | 第54页 |
4.2 实验结果与分析 | 第54-58页 |
4.2.1 eGFP,SP,SPI,SPⅡ,AcSP目的基因的获得 | 第54-55页 |
4.2.2 不同信号肽引导eGFP定位的瞬时表达载体的获得 | 第55-56页 |
4.2.3 不同信号肽引导eGFP在BmNSf9细胞的定位分析 | 第56-57页 |
4.2.4 Western blot分析 | 第57-58页 |
4.3 讨论 | 第58-59页 |
第5章 总结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65-67页 |
致谢 | 第67页 |