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量子点标记BmNPV芽生病毒粒子研究及GP64信号肽分析

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第1章 绪论第13-23页
    1.1 杆状病毒简介第13-20页
        1.1.1 杆状病毒的分类第13页
        1.1.2 杆状病毒的感染周期第13-14页
        1.1.3 杆状病毒的表达系统第14-16页
        1.1.4 杆状病毒的囊膜蛋白第16-18页
        1.1.5 杆状病毒的其他应用第18-20页
    1.2 量子点标记杆状病毒粒子的研究进展第20-21页
    1.3 国内外研究现状及本研究意义第21-23页
        1.3.1 国内外研究现状第21-22页
        1.3.2 本课题研究意义第22-23页
第2章 量子点标记BmNPV芽生病毒粒子第23-39页
    2.1 材料与方法第23-31页
        2.1.1 材料与试剂第23页
        2.1.2 常用试剂和缓冲液的配制第23-25页
        2.1.3 引物设计第25页
        2.1.4 pFastBacDual重组供体载体的构建第25-26页
        2.1.5 重组杆状病毒Bacmid的构建第26-28页
        2.1.6 重组杆状病毒Bacmid转染BmN细胞第28页
        2.1.7 重组杆状病毒RBV的扩增及纯化第28-29页
        2.1.8 Western-blot分析第29-30页
        2.1.9 终点稀释法(EPDA)病毒滴度的测定第30页
        2.1.10 一步法生长曲线的绘制第30页
        2.1.11 量子点标记重组杆状病毒第30-31页
    2.2 实验结果与分析第31-37页
        2.2.1 eGFP,vp39,bira,Pph-eGFP-vp39-SV40等目的基因的获得第31-32页
        2.2.2 重组供体载体的获得第32-33页
        2.2.3 重组杆状病毒Bacmid的获得第33-34页
        2.2.4 重组杆状病毒Bacmid转染BmN细胞的情况第34页
        2.2.5 Westernblot验证分析第34-35页
        2.2.6 一步法生长曲线分析第35-36页
        2.2.7 量子点标记重组杆状病毒第36页
        2.2.8 激光共聚焦显微镜示踪第36-37页
    2.3 讨论第37-39页
第3章 不同长度GP64信号肽重组杆状病毒分析第39-49页
    3.1 材料与方法第39-43页
        3.1.1 材料与试剂第39页
        3.1.2 实验仪器和设备第39页
        3.1.3 实验室常用试剂和缓冲液的配制第39-41页
        3.1.4 引物设计第41页
        3.1.5 pFastBacDual重组供体载体的构建第41-42页
        3.1.6 重组杆状病毒Bacmid的构建第42页
        3.1.7 重组杆状病毒Bacmid转染BmN细胞第42页
        3.1.8 一步法生长曲线的绘制第42-43页
        3.1.9 瞬时表达载体的构建第43页
        3.1.10 免疫荧光第43页
    3.2 实验结果与分析第43-47页
        3.2.1 SPⅡgp64,SPIgp64目的基因的获得第43-44页
        3.2.2 pFastBacDual重组供体载体的获得第44-45页
        3.2.3 重组杆状病毒Bacmid的获得第45页
        3.2.4 重组杆状病毒感染性分析第45-46页
        3.2.5 一步法生长曲线分析第46页
        3.2.6 瞬时表达载体的获得第46-47页
        3.2.7 免疫荧光结果分析第47页
    3.3 讨论第47-49页
第4章 不同GP64信号肽引导eGFP定位差异分析第49-59页
    4.1 材料与方法第49-54页
        4.1.1 材料与试剂第49页
        4.1.2 构建重组质粒的方法第49-53页
        4.1.3 引物设计第53页
        4.1.4 不同信号肽引导eGFP定位的瞬时载体的构建第53-54页
        4.1.5 瞬时转染BmNSf9Bm5细胞第54页
        4.1.6 Westernblot表征第54页
    4.2 实验结果与分析第54-58页
        4.2.1 eGFP,SP,SPI,SPⅡ,AcSP目的基因的获得第54-55页
        4.2.2 不同信号肽引导eGFP定位的瞬时表达载体的获得第55-56页
        4.2.3 不同信号肽引导eGFP在BmNSf9细胞的定位分析第56-57页
        4.2.4 Western blot分析第57-58页
    4.3 讨论第58-59页
第5章 总结第59-61页
参考文献第61-65页
攻读学位期间发表的学术论文目录第65-67页
致谢第67页

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