| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-32页 |
| ·细胞培养技术生产植物次级代谢产物的历史与现状 | 第14-15页 |
| ·提高培养细胞中植物次级代谢产物含量的方法 | 第15-21页 |
| ·外植体的选择 | 第15页 |
| ·培养基和培养条件的优化 | 第15-16页 |
| ·前体物的添加 | 第16页 |
| ·抑制剂的使用 | 第16-17页 |
| ·诱导子 | 第17-20页 |
| ·前景及展望 | 第20-21页 |
| ·植物细胞PCD的研究进展 | 第21-24页 |
| ·NO信号分子研究进展 | 第24-26页 |
| ·BI-1的研究进展 | 第26-30页 |
| ·本论文的研究思路和主要研究内容 | 第30-32页 |
| 第2章 飞廉悬浮细胞培养条件的优化 | 第32-45页 |
| ·前言 | 第32-33页 |
| ·材料、试剂和实验仪器 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·飞廉悬浮细胞生长量的测定 | 第34页 |
| ·黄酮含量和黄酮产量的测定 | 第34-35页 |
| ·飞廉细胞中总黄酮提取条件的正交实验设计 | 第35-36页 |
| ·飞廉细胞悬浮培养的条件优化 | 第36页 |
| ·飞廉悬浮细胞系的建立与细胞生长周期的确定 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-43页 |
| ·飞廉悬浮细胞中总黄酮提取条件的正交优化 | 第36-37页 |
| ·飞廉细胞悬浮培养的条件优化 | 第37-41页 |
| ·飞廉悬浮体系的建立与细胞生长周期的确定 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第3章 盐胁迫对飞廉悬浮细胞生长和胞内黄酮类物质合成的影响 | 第45-61页 |
| ·前言 | 第45-46页 |
| ·材料、试剂和实验仪器 | 第46页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·飞廉悬浮细胞生长量和黄酮含量的测定 | 第46-47页 |
| ·飞廉悬浮细胞的盐胁迫处理 | 第47页 |
| ·试剂的添加 | 第47页 |
| ·NO含量的测定 | 第47-48页 |
| ·飞廉细胞及细胞核的形态观察 | 第48-49页 |
| ·DNA的提取与DNA梯状条带分析 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-59页 |
| ·不同盐浓度处理对飞廉悬浮细胞生长及黄酮类物质合成的影响 | 第50-51页 |
| ·不同细胞生长阶段进行盐处理对飞廉悬浮细胞生长及黄酮类物质代谢合成的影响 | 第51-52页 |
| ·盐胁迫处理后飞廉细胞内黄酮类物质合成的动态变化 | 第52-53页 |
| ·盐胁迫诱发飞廉细胞、细胞核的形态变化 | 第53-55页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳分析 | 第55-56页 |
| ·盐胁迫诱发飞廉细胞产生NO迸发 | 第56-57页 |
| ·NO介导盐胁迫诱发飞廉细胞死亡 | 第57-58页 |
| ·NO参与盐胁迫促进飞廉细胞中黄酮类物质的合成积累 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第4章 BI-1基因的诱导表达对盐胁迫诱发的飞廉细胞死亡和黄酮类次级产物合成的影响 | 第61-76页 |
| ·前言 | 第61页 |
| ·材料、试剂和实验仪器 | 第61-63页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·主要试剂 | 第62页 |
| ·主要仪器 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-66页 |
| ·飞廉悬浮细胞生长量和黄酮含量的测定 | 第63页 |
| ·飞廉悬浮细胞的盐胁迫处理 | 第63页 |
| ·试剂的添加 | 第63页 |
| ·PCR鉴定筛选 | 第63-64页 |
| ·Western blotting检测 | 第64-66页 |
| ·核染率的测定 | 第66页 |
| ·NO含量的测定 | 第66页 |
| ·实验结果 | 第66-73页 |
| ·PCR鉴定筛选 | 第66页 |
| ·Est添加浓度的确定 | 第66-67页 |
| ·BI-1基因的诱导表达分析 | 第67-68页 |
| ·BI-1基因表达对未经盐处理(正常生长)的飞廉细胞生长与黄酮类物质合成的影响 | 第68-69页 |
| ·Est添加时间的确定 | 第69-70页 |
| ·BI-1基因表达对盐处理组细胞的干重和黄酮产量的影响 | 第70-71页 |
| ·BI-1基因表达对盐胁迫引发的细胞死亡的影响 | 第71-72页 |
| ·BI-1基因表达对盐处理组细胞中黄酮含量的影响 | 第72-73页 |
| ·BI-1基因表达对盐处理组细胞中NO含量的影响 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-76页 |
| 第5章 结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-89页 |
| 附录A 部分试剂及培养基配制 | 第89-91页 |
| 附录B MS母液的配制 | 第91-92页 |
| 附录C 缩略词汇表 | 第92-93页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
