| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第13-29页 |
| 1.1 水稻籽粒发育的研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 水稻籽粒的发育过程 | 第13-14页 |
| 1.1.2 水稻籽粒发育的生理生态学研究 | 第14-16页 |
| 1.1.3 水稻籽粒发育的分子机制研究 | 第16-18页 |
| 1.2 14-3-3蛋白研究进展 | 第18-25页 |
| 1.2.1 14-3-3蛋白的发现 | 第18-19页 |
| 1.2.2 14-3-3蛋白的结构 | 第19-20页 |
| 1.2.3 14-3-3蛋白的作用机制 | 第20页 |
| 1.2.4 14-3-3蛋白功能研究 | 第20-24页 |
| 1.2.5 水稻14-3-3蛋白 | 第24-25页 |
| 1.3 蛋白质相互作用组学常用的研究方法 | 第25-28页 |
| 1.3.1 亲和层析pull-down技术 | 第25-26页 |
| 1.3.2 酵母双杂交技术 | 第26-27页 |
| 1.3.3 免疫共沉淀技术 | 第27页 |
| 1.3.4 双分子荧光互补技术 | 第27-28页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-48页 |
| 2.1 材料 | 第29-32页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第29页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第29页 |
| 2.1.3 主要实验设备 | 第29-30页 |
| 2.1.4 主要试剂来源 | 第30-31页 |
| 2.1.5 主要试剂配制 | 第31-32页 |
| 2.2 试验方法 | 第32-48页 |
| 2.2.1 水稻生长和处理 | 第32-33页 |
| 2.2.2 水稻14-3-3家族蛋白生物信息学分析 | 第33页 |
| 2.2.3 RT-PCR分析OsGF14-3-3s家族基因参与调控水稻籽粒发育过程 | 第33-37页 |
| 2.2.4 OsGF14-b和OsGF14-e基因参与调控水稻籽粒响应逆境胁迫 | 第37-38页 |
| 2.2.5 水稻OsGF14-b和OsGF14-e基因的克隆 | 第38-41页 |
| 2.2.6 OsGF14-b和OsGF14-e基因的表达载体构建 | 第41-44页 |
| 2.2.7 GST-OsGF14-B和GST-OsGF14-E融合蛋白的表达和纯化 | 第44-45页 |
| 2.2.8 GST pull-down捕获OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白 | 第45页 |
| 2.2.9 LC-MS/MS鉴定OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白 | 第45-47页 |
| 2.2.10 生物信息学分析OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-94页 |
| 3.1 生物信息学分析水稻OsGF14-3-3s家族蛋白 | 第48-50页 |
| 3.2 OsGF14-3-3s基因在水稻籽粒发育过程中的动态表达分析 | 第50-54页 |
| 3.2.1 转录水平分析OsGF14-3-3s基因在水稻籽粒发育中的响应 | 第50-51页 |
| 3.2.2 RT-PCR分析OsGF14-3-3s家族基因在水稻籽粒发育中的动态表达 | 第51-52页 |
| 3.2.3 OsGF14-b和OsGF14-e基因调控水稻籽粒响应逆境胁迫 | 第52-54页 |
| 3.3 水稻OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的生物信息学分析 | 第54-56页 |
| 3.4 GSTpull-down鉴定OsGF14-B和OsGF14-E蛋白在水稻发育籽粒中的互作蛋白 | 第56-86页 |
| 3.4.1 OsGF14-b和OsGF14-e基因的克隆及表达载体的构建 | 第56-61页 |
| 3.4.2 GST-OsGF14-B和GST-OsGF14-E融合蛋白的表达和纯化 | 第61-64页 |
| 3.4.3 GST pull-down捕获OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白 | 第64-67页 |
| 3.4.4 质谱鉴定OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白 | 第67-75页 |
| 3.4.5 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白磷酸化位点分析 | 第75页 |
| 3.4.6 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白在水稻籽粒发育中的转录本分析 | 第75-86页 |
| 3.5 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白的功能分析 | 第86-94页 |
| 3.5.1 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白的Gene Ontology分析 | 第86-89页 |
| 3.5.2 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白的pathway分析 | 第89-93页 |
| 3.5.3 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白的互作蛋白的差异分析 | 第93-94页 |
| 4 讨论 | 第94-104页 |
| 4.1 水稻OsGF14-3-3s家族蛋白保持了植物14-3-3蛋白的结构特征 | 第94-95页 |
| 4.2 OsGF14-3-3s基因响应调控水稻籽粒的发育 | 第95-97页 |
| 4.3 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白通过参与多种物质能量代谢和信号转导途径介导水稻籽粒的发育 | 第97-100页 |
| 4.4 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白协同参与调控水稻籽粒的发育 | 第100-101页 |
| 4.5 OsGF14-B和OsGF14-E蛋白在水稻籽粒发育中有着不同的功能 | 第101-102页 |
| 4.6 结论 | 第102-103页 |
| 4.7 展望 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
