| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5页 |
| 引言 | 第8-15页 |
| 1.1 非生物胁迫概述 | 第8页 |
| 1.2 小干扰RNA(microRNA) | 第8-10页 |
| 1.2.1 microRNA(miRNA)的结构特点 | 第8页 |
| 1.2.2 miRNA的合成过程 | 第8-10页 |
| 1.3 小干扰RNA(microRNA)与非生物胁迫 | 第10-12页 |
| 1.3.1 microRNA与植物抗旱 | 第10页 |
| 1.3.2 microRNA与植物耐盐 | 第10-11页 |
| 1.3.3 microRNA与植物耐高温 | 第11-12页 |
| 1.3.4 microRNA与植物耐低温 | 第12页 |
| 1.3.5 microRNA与植物抗氧化 | 第12页 |
| 1.4 短串联靶向模拟结构(STTM) | 第12-14页 |
| 1.4.1 靶向模拟结构(TM) | 第12-13页 |
| 1.4.2 短串联靶向模拟结构(STTM) | 第13-14页 |
| 1.5 本论文研究的目的及意义 | 第14-15页 |
| 材料与方法 | 第15-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第15页 |
| 2.1.2 实验的主要试剂及配制方法 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-28页 |
| 2.2.1 玉米B73基因组DNA的提取 | 第16页 |
| 2.2.2 玉米耐逆相关microRNA的查找 | 第16-17页 |
| 2.2.3 玉米耐逆相关microRNA以及相对应的STTM结构的克隆 | 第17-21页 |
| 2.2.4 表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.5 热击法转化农杆菌 | 第22页 |
| 2.2.6 转基因拟南芥的获得 | 第22-23页 |
| 2.2.7 转基因阳性拟南芥植株胁迫处理 | 第23页 |
| 2.2.8 转基因拟南芥植株叶绿素含量的检测 | 第23-24页 |
| 2.2.9 转基因拟南芥失水率的测定 | 第24页 |
| 2.2.10 RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.11 目的基因表达量的检测 | 第24-25页 |
| 2.2.12 耐逆能力增强的转基因株系中受miRNA调控的靶基因表达变化水平检测 | 第25-28页 |
| 结果与分析 | 第28-52页 |
| 3.1 在玉米中查找到的耐逆相关microRNA | 第28-30页 |
| 3.2 玉米耐逆相关的microRNA前体基因的克隆 | 第30页 |
| 3.2.1 部分microRNA前体基因的PCR克隆 | 第30页 |
| 3.2.2 部分microRNA前体基因PCR产物连接pMD18-T测序结果的比对 | 第30页 |
| 3.3 玉米耐逆相关的microRNA相应的STTM结构的克隆 | 第30-31页 |
| 3.3.1 部分microRNA相应的STTM结构的PCR克隆 | 第30-31页 |
| 3.3.2 部分microRNA的STTM结构PCR产物连接pMD18-T测序结果的比对 | 第31页 |
| 3.4 基因表达载体的构建 | 第31-34页 |
| 3.4.1 载体双酶切 | 第31-32页 |
| 3.4.2 载体与目的片段进行连接转化 | 第32-33页 |
| 3.4.3 已构建好的microRNA以及STTM结构的过表达载体 | 第33-34页 |
| 3.5 转基因拟南芥植株的筛选 | 第34-36页 |
| 3.5.1 转基因拟南芥植株的获得 | 第34-35页 |
| 3.5.2 转基因阳性植株Bar试纸条检验 | 第35页 |
| 3.5.3 转基因T1代植株目的基因的检测 | 第35-36页 |
| 3.6 已获得的转基因阳性植株 | 第36页 |
| 3.7 miR162与耐干旱和高盐 | 第36-45页 |
| 3.7.1 miR162O与miR162S的转基因T2代植株中基因的表达情况 | 第36-37页 |
| 3.7.2 miR162与干旱 | 第37-41页 |
| 3.7.3 miR162与高盐 | 第41-45页 |
| 3.8 miR394与干旱和高盐 | 第45-50页 |
| 3.8.1 miR394O与miR394S的转基因T2代植株中基因的表达情况 | 第45-46页 |
| 3.8.2 miR394与干旱 | 第46-48页 |
| 3.8.3 miR394与高盐 | 第48-50页 |
| 3.9 耐逆能力增强的转基因株系中受miRNA调控的靶基因表达水平的变化 | 第50-52页 |
| 3.9.1 miR162的靶基因表达量的变化 | 第50页 |
| 3.9.2 miR394的靶基因表达量的变化 | 第50-52页 |
| 讨论 | 第52-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
