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pEGFP-Cl-MyD88真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

英文縮写及中英文全名对照表第1-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-12页
第一章 综述第12-23页
   ·MYD88概况第12-16页
     ·MyD88基因结构第12页
     ·MyD88的结构与功能的关系第12-16页
     ·MyD88的组织和细胞分布第16页
   ·MYD88参与的信号转导途径第16-18页
     ·MyD88与TLRs/IL-1Rs信号转导第16-17页
     ·MyD88与其他信号转导第17-18页
   ·MYD88与疾病第18-20页
     ·炎症及自身免疫性疾病第18-19页
     ·心血管疾病第19页
     ·癌症第19-20页
   ·MYD88与细胞凋亡第20-21页
   ·MYD88拮抗剂第21-22页
   ·研究目的和意义第22-23页
第二章 材料与方法第23-39页
   ·实验材料与仪器第23-27页
     ·载体、菌株和细胞第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要试剂的配制第23-26页
     ·主要仪器第26-27页
   ·实验方法第27-39页
     ·引物设计与合成第27页
     ·水牛外周血白细胞总RNA的提取第27-28页
     ·RT-PCR扩增MyD88目的基因第28-30页
     ·pEGFP-C1-MyD88融合蛋白表达载体的构建第30-33页
     ·细胞传代、冻存和复苏第33-34页
     ·pEGFP-C1-MyD88在HEK293细胞中的瞬时表达第34-37页
     ·pEGFP-C1-MyD88在HEK293细胞中的稳定表达第37-39页
第三章 结果与分析第39-46页
   ·RT-PCR扩增MYD88目的基因第39页
   ·PEGFP-C1-MYD88重组表达载体的构建和鉴定第39-40页
   ·重组质粒在HEK293细胞中的瞬时表达第40-43页
     ·倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达第40-41页
     ·FCM分析融合蛋白表达第41-43页
     ·Western Blot检测融合蛋白表达第43页
   ·重组质粒在HEK293细胞中的稳定表达第43-46页
     ·G418最佳筛选浓度的确定第43页
     ·荧光显微镜观察稳定细胞系蛋白表达第43-44页
     ·FCM分析稳定细胞系蛋白表达第44-45页
     ·Western blot检测稳定细胞系蛋白表达第45-46页
第四章 讨论第46-51页
   ·HEK293宿主细胞的选择第46-47页
   ·真核表达载体的选择第47-48页
   ·转染方法第48页
   ·转染条件优化第48-49页
   ·EGFP-MYD88融合蛋白的细胞内定位第49-51页
第五章 总结与展望第51-52页
参考文献第52-57页
在读期间发表论文第57-58页
致谢第58页

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