摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-19页 |
1.1 引言 | 第11-12页 |
1.2 天然微管蛋白抑制剂的研究进展 | 第12-19页 |
1.2.1 微管结构和功能 | 第12页 |
1.2.2 以微管为靶点的抗肿瘤药物研究 | 第12-13页 |
1.2.3 以微管为靶点的抗肿瘤药物的分类 | 第13-16页 |
1.2.4 以微管为靶点的抗肿瘤药物的改造 | 第16-17页 |
1.2.5 以微管为靶点的抗肿瘤药物作用机制 | 第17-19页 |
第二章 试剂、材料和仪器 | 第19-29页 |
2.1 主要试剂及材料 | 第19-22页 |
2.1.1 培养细胞试剂 | 第19页 |
2.1.2 Westernblot试剂 | 第19-21页 |
2.1.3 流式及高内涵试剂 | 第21-22页 |
2.2 主要仪器 | 第22-23页 |
2.3 细胞株 | 第23-24页 |
2.4 试剂及主要溶液的配制 | 第24-29页 |
2.4.1 培养细胞所需试剂的配制 | 第24-25页 |
2.4.2 微管蛋白聚合抑制实验所需试剂 | 第25页 |
2.4.3 Westernblot实验所需试剂 | 第25-27页 |
2.4.4 其他试剂的配制 | 第27-29页 |
第三章 实验方法 | 第29-39页 |
3.1 细胞株的复苏与培养 | 第29页 |
3.2 MTT法检测A3对不同肿瘤细胞生长增值抑制作用 | 第29-30页 |
3.3 抑制或促进微管蛋白聚合实验 | 第30页 |
3.4 免疫荧光法检测细胞内微管蛋白分布情况 | 第30-31页 |
3.5 A3对HeLa细胞形态学影响实验 | 第31页 |
3.6 细胞荧光染色的测定 | 第31-32页 |
3.7 流式细胞术检测细胞周期、凋亡、线粒体膜电位及活性氧的变化 | 第32-33页 |
3.8 Westernblot蛋白免疫印迹法 | 第33-36页 |
3.8.1 蛋白的提取及浓度的测定 | 第33-34页 |
3.8.2 WesternBlot免疫印迹法 | 第34-36页 |
3.9 细胞迁移实验 | 第36-37页 |
3.9.1 细胞划痕实验 | 第36页 |
3.9.2 Transwell迁移实验 | 第36-37页 |
3.10 小管形成实验 | 第37页 |
3.11 统计学分析 | 第37-39页 |
第四章 实验结果 | 第39-61页 |
4.1 A3对不同肿瘤细胞的生长抑制的影响 | 第39页 |
4.2 A3对细胞内微管蛋白聚合的抑制作用 | 第39-40页 |
4.3 A3对细胞内微管蛋白分布的影响 | 第40-41页 |
4.4 A3对HeLa细胞周期影响 | 第41-45页 |
4.5 A3对HeLa细胞形态及细胞核的影响 | 第45-46页 |
4.6 A3对HeLa细胞凋亡的影响 | 第46-48页 |
4.7 A3对HeLa细胞线粒体膜电位的影响 | 第48-50页 |
4.8 A3对HeLa细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第50-52页 |
4.9 A3对HeLa细胞活性氧簇(ROS)的影响 | 第52-54页 |
4.10 A3对细胞迁移能力的影响 | 第54-56页 |
4.10.1 细胞划痕实验检测A3对HeLa细胞迁移的影响 | 第54-55页 |
4.10.2 Transwell实验检测A3对HeLa细胞迁移的影响 | 第55-56页 |
4.11 A3对血管生成的作用 | 第56-61页 |
4.11.1 A3对HUVEC细胞迁移能力的影响 | 第57-58页 |
4.11.2 A3对HUVEC细胞小管形成的影响 | 第58-61页 |
第五章 讨论 | 第61-65页 |
第六章 结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
附录 | 第73-75页 |
致谢 | 第75-76页 |