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新型微管蛋白抑制剂A3的抗肿瘤作用及机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第11-19页
    1.1 引言第11-12页
    1.2 天然微管蛋白抑制剂的研究进展第12-19页
        1.2.1 微管结构和功能第12页
        1.2.2 以微管为靶点的抗肿瘤药物研究第12-13页
        1.2.3 以微管为靶点的抗肿瘤药物的分类第13-16页
        1.2.4 以微管为靶点的抗肿瘤药物的改造第16-17页
        1.2.5 以微管为靶点的抗肿瘤药物作用机制第17-19页
第二章 试剂、材料和仪器第19-29页
    2.1 主要试剂及材料第19-22页
        2.1.1 培养细胞试剂第19页
        2.1.2 Westernblot试剂第19-21页
        2.1.3 流式及高内涵试剂第21-22页
    2.2 主要仪器第22-23页
    2.3 细胞株第23-24页
    2.4 试剂及主要溶液的配制第24-29页
        2.4.1 培养细胞所需试剂的配制第24-25页
        2.4.2 微管蛋白聚合抑制实验所需试剂第25页
        2.4.3 Westernblot实验所需试剂第25-27页
        2.4.4 其他试剂的配制第27-29页
第三章 实验方法第29-39页
    3.1 细胞株的复苏与培养第29页
    3.2 MTT法检测A3对不同肿瘤细胞生长增值抑制作用第29-30页
    3.3 抑制或促进微管蛋白聚合实验第30页
    3.4 免疫荧光法检测细胞内微管蛋白分布情况第30-31页
    3.5 A3对HeLa细胞形态学影响实验第31页
    3.6 细胞荧光染色的测定第31-32页
    3.7 流式细胞术检测细胞周期、凋亡、线粒体膜电位及活性氧的变化第32-33页
    3.8 Westernblot蛋白免疫印迹法第33-36页
        3.8.1 蛋白的提取及浓度的测定第33-34页
        3.8.2 WesternBlot免疫印迹法第34-36页
    3.9 细胞迁移实验第36-37页
        3.9.1 细胞划痕实验第36页
        3.9.2 Transwell迁移实验第36-37页
    3.10 小管形成实验第37页
    3.11 统计学分析第37-39页
第四章 实验结果第39-61页
    4.1 A3对不同肿瘤细胞的生长抑制的影响第39页
    4.2 A3对细胞内微管蛋白聚合的抑制作用第39-40页
    4.3 A3对细胞内微管蛋白分布的影响第40-41页
    4.4 A3对HeLa细胞周期影响第41-45页
    4.5 A3对HeLa细胞形态及细胞核的影响第45-46页
    4.6 A3对HeLa细胞凋亡的影响第46-48页
    4.7 A3对HeLa细胞线粒体膜电位的影响第48-50页
    4.8 A3对HeLa细胞凋亡相关蛋白的影响第50-52页
    4.9 A3对HeLa细胞活性氧簇(ROS)的影响第52-54页
    4.10 A3对细胞迁移能力的影响第54-56页
        4.10.1 细胞划痕实验检测A3对HeLa细胞迁移的影响第54-55页
        4.10.2 Transwell实验检测A3对HeLa细胞迁移的影响第55-56页
    4.11 A3对血管生成的作用第56-61页
        4.11.1 A3对HUVEC细胞迁移能力的影响第57-58页
        4.11.2 A3对HUVEC细胞小管形成的影响第58-61页
第五章 讨论第61-65页
第六章 结论第65-67页
参考文献第67-73页
附录第73-75页
致谢第75-76页

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