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壳聚糖及拮抗酵母菌对猕猴桃采后病害的防治机制研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
引言第14-25页
    0.1 概述第14-15页
    0.2 水果采后病害概述第15-17页
        0.2.1 水果采后损失发生类型第15页
        0.2.2 水果采后真菌病害发生类型第15-17页
            0.2.2.1 青霉菌第16页
            0.2.2.2 灰霉菌第16-17页
    0.3 水果保鲜及采后病害综合防治措施第17-19页
        0.3.1 农业防治措施第17页
        0.3.2 化学药物防治第17-18页
        0.3.3 物理保鲜技术第18页
        0.3.4 生物防治技术第18-19页
    0.4 壳聚糖及抑菌机理概述第19-21页
        0.4.1 壳聚糖简介及应用第19-20页
        0.4.2 抑菌机理研究概况第20-21页
            0.4.2.1 壳聚糖直接抑制病原菌第20页
            0.4.2.2 壳聚糖通过诱导植物产生抗性相关物质第20-21页
    0.5 酵母拮抗菌概述第21-24页
        0.5.1 生物拮抗菌的抗病机理概述第21-22页
            0.5.1.1 竞争作用第21页
            0.5.1.2 诱导抗性作用第21-22页
            0.5.1.3 寄生作用第22页
            0.5.1.4 抗生作用第22页
        0.5.2 酵母拮抗菌对采后病害防治的国内外研究现况第22-24页
    0.6 本课题的研究目的及意义第24-25页
第1章 实验材料与设备第25-30页
    1.1 实验材料与试剂第25-27页
        1.1.1 实验材料第25页
        1.1.2 常用试剂第25-26页
        1.1.3 常用试剂盒第26-27页
    1.2 仪器与设备第27-28页
    1.3 常用培养基及缓冲液的配制第28-30页
第2章 壳聚糖诱导寄主猕猴桃抗性的研究第30-48页
    2.1 前言第30页
    2.2 实验方法第30-39页
        2.2.1 病原真菌的致病性回接验证第30-31页
            2.2.1.1 寄主猕猴桃的预处理第30页
            2.2.1.2 孢子悬浮液的制备第30-31页
            2.2.1.3 侵染回接实验第31页
        2.2.2 壳聚糖储备液的配制及预处理第31页
        2.2.3 壳聚糖对猕猴桃灰霉病及青霉病的作用影响第31-32页
        2.2.4 壳聚糖对猕猴桃自然发病率及果实品质的影响第32-33页
            2.2.4.1 硬度的测定第32页
            2.2.4.2 可滴定酸含量的测定第32-33页
            2.2.4.3 可溶性固形物含量的测定第33页
            2.2.4.4 自然发病率的统计第33页
        2.2.5 壳聚糖对猕猴桃生理生化指标变化的影响第33-36页
            2.2.5.1 粗酶提取液的制备第33页
            2.2.5.2 Bradford法蛋白含量的测定第33-34页
            2.2.5.3 总酚的测定第34页
            2.2.5.4 CAT活性测定第34-35页
            2.2.5.5 SOD活性测定第35页
            2.2.5.6 APX活性测定第35-36页
        2.2.6 RT-q PCR分析壳聚糖对猕猴桃抗性基因表达量的影响第36-39页
            2.2.6.1 猕猴桃总RNA的提取第36-37页
            2.2.6.2 mRNA反转录为cDNA第37-38页
            2.2.6.3 RT-qPCR分析壳聚糖对抗性基因表达量的影响第38-39页
    2.3 结果与分析第39-46页
        2.3.1 病原菌的致病性验证第39-40页
        2.3.2 壳聚糖对猕猴桃自然发病率及贮藏品质的影响第40-41页
        2.3.3 壳聚糖对猕猴桃灰霉病及青霉病的作用影响第41-42页
        2.3.4 壳聚糖对猕猴桃生理生化变化的影响第42-44页
            2.3.4.1 壳聚糖对猕猴桃过氧化氢酶(CAT)活性的影响第42页
            2.3.4.2 壳聚糖对猕猴桃超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响第42-43页
            2.3.4.3 壳聚糖对猕猴桃抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的影响第43页
            2.3.4.4 壳聚糖对猕猴桃总酚含量的影响第43-44页
        2.3.5 壳聚糖对猕猴桃抗性基因表达量的影响第44-46页
            2.3.5.1 壳聚糖对猕猴桃CAT基因表达量的影响第44-45页
            2.3.5.2 壳聚糖对猕猴桃内SOD基因表达量的影响第45页
            2.3.5.3 壳聚糖对猕猴桃内APX基因表达量的影响第45-46页
    2.4 讨论第46-48页
第3章 酵母拮抗菌的生防效果检测及作用机制分析第48-66页
    3.1 前言第48页
    3.2 实验方法第48-56页
        3.2.1 酵母菌的初筛及鉴定第48-50页
            3.2.1.1 酵母菌的分离纯化第48-49页
            3.2.1.2 酵母菌的生物学鉴定第49-50页
        3.2.2 酵母菌的抑菌效果检测第50-51页
            3.2.2.1 猕猴桃品质参数的测定第50-51页
            3.2.2.2 寄主猕猴桃的接种第51页
            3.2.2.3 生防效力指标的测定第51页
        3.2.3 酵母拮抗菌对猕猴桃生理生化指标的影响第51-52页
            3.2.3.1 总酚含量测定第52页
            3.2.3.2 木质素含量测定第52页
        3.2.4 酵母拮抗菌对猕猴桃抗性基因表达量的影响第52-55页
            3.2.4.1 猕猴桃RNA的提取第52-53页
            3.2.4.2 RNA反转录为cDNA第53-54页
            3.2.4.3 RT-qPCR实验第54-55页
        3.2.5 酵母拮抗菌在寄主猕猴桃上种群生长动态变化分析第55-56页
    3.3 实验结果与分析第56-63页
        3.3.1 酵母菌的菌落特征第56页
        3.3.2 酵母菌的系统进化分析第56-57页
        3.3.3 酵母拮抗菌对猕猴桃灰霉病及青霉病的抑制效果第57-58页
        3.3.4 酵母拮抗菌对猕猴桃生理生化的影响第58-59页
            3.3.4.1 酵母拮抗菌对猕猴桃总酚含量的影响第58-59页
            3.3.4.2 酵母拮抗菌对猕猴桃木质素含量的影响第59页
        3.3.5 RT-qPCR分析酵母拮抗菌对猕猴桃抗性基因表达的影响第59-63页
            3.3.5.1 拮抗酵母菌对CAT基因表达的影响第59-60页
            3.3.5.2 拮抗酵母菌对SOD基因表达的影响第60-61页
            3.3.5.3 拮抗酵母菌对APX基因表达的影响第61-62页
            3.3.5.4 拮抗酵母菌对GR基因表达的影响第62-63页
        3.3.6 酵母拮抗菌种群生长动态分析第63页
    3.4 讨论第63-66页
第4章 结论与展望第66-68页
    4.1 结论第66-67页
    4.2 展望第67-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-74页
攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况第74-75页

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