| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表(ABBREVIATION) | 第12-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-36页 |
| 1.1 聚羟基脂肪酸酯的概述 | 第14-18页 |
| 1.1.1 聚羟基脂肪酸酯的组成和分类 | 第14-15页 |
| 1.1.2 聚羟基脂肪酸酯的材料学性质及改性研究 | 第15-16页 |
| 1.1.3 聚羟基脂肪酸酯的应用及前景 | 第16-18页 |
| 1.2 PHA的生物合成 | 第18-25页 |
| 1.2.1 PHA生物合成的主要酶及其改造 | 第18-21页 |
| 1.2.2 PHA合成的底物 | 第21-22页 |
| 1.2.3 PHA的微生物合成途径 | 第22-24页 |
| 1.2.4 PHA合成途径的代谢调控 | 第24-25页 |
| 1.3 PHB的生产 | 第25-30页 |
| 1.3.1 PHB微生物合成 | 第25-26页 |
| 1.3.2 PHB的微生物合成途径及相关酶 | 第26-27页 |
| 1.3.3 PHB生产菌株 | 第27-28页 |
| 1.3.4 PHB生产菌株的代谢改造 | 第28-30页 |
| 1.4 多样自动化的基因组改造技术(MAGE) | 第30-32页 |
| 1.4.1 MAGE简介 | 第30-31页 |
| 1.4.2 MAGE实验设计原则 | 第31-32页 |
| 1.5 本论文的选题背景、研究工作及意义 | 第32-36页 |
| 1.5.1 非氧化糖酵解途径的简介 | 第32-35页 |
| 1.5.2 重组大肠杆菌中PP-bifido途径的构建用于合成PHB | 第35-36页 |
| 第二章 大肠杆菌PP-bifido途径的构建 | 第36-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-40页 |
| 2.1.1 实验菌株和质粒 | 第36-37页 |
| 2.1.2 实验引物 | 第37页 |
| 2.1.3 培养基 | 第37-38页 |
| 2.1.4 相关试剂与缓冲液 | 第38页 |
| 2.1.5 常用生化试剂 | 第38页 |
| 2.1.6 常用试剂盒 | 第38-39页 |
| 2.1.7 仪器与设备 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.2.1 菌种和核酸片段的保藏 | 第40页 |
| 2.2.2 分子生物学常规操作技术 | 第40-41页 |
| 2.2.3 重组大肠杆菌生产PHB的发酵方法 | 第41-42页 |
| 2.2.4 检测方法 | 第42-43页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第43-47页 |
| 2.3.1 fxpk基因的可溶性表达检测 | 第43-44页 |
| 2.3.2 F/Xpk的引入 | 第44页 |
| 2.3.3 Fpk酶活检测 | 第44-46页 |
| 2.3.4 引入F/Xpk生产PHB | 第46页 |
| 2.3.5 讨论 | 第46-47页 |
| 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 PP-bifido途径相关竞争途径关键基因的敲除 | 第48-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第49-50页 |
| 3.1.2 实验引物 | 第50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 3.2.1 大肠杆菌DH5a的基因敲除 | 第50-51页 |
| 3.2.2 大肠杆菌DH5a普通感受态的制备 | 第51-52页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第52-55页 |
| 3.3.1 edd和pfkA基因的敲除 | 第52-53页 |
| 3.3.2 ptsG基因的敲除 | 第53-54页 |
| 3.3.3 讨论 | 第54-55页 |
| 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 利用MAGE改造葡萄糖吸收系统 | 第56-66页 |
| 4.1 实验材料 | 第57页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第57页 |
| 4.1.2 实验单链核苷酸 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 4.2.1 MAGE操作步骤 | 第57-58页 |
| 4.2.2 MAGE筛选方法 | 第58-59页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第59-64页 |
| 4.3.1 MAGE单链核苷酸设计 | 第59页 |
| 4.3.2 MAGE筛选结果 | 第59-60页 |
| 4.3.3 MAGE筛选菌株发酵检测 | 第60-62页 |
| 4.3.4 发酵条件优化 | 第62-63页 |
| 4.3.5 CO_2释放量检测 | 第63-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-65页 |
| 本章小结 | 第65-66页 |
| 全文总结 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76页 |