| 中文摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第14-23页 |
| 1 siRNA治疗 | 第14页 |
| 2 PKM2简介 | 第14-16页 |
| 3 化学药物与基因共转运 | 第16-17页 |
| 4 PAMAM给药系统 | 第17-19页 |
| 5 环境响应型纳米给药系统 | 第19-20页 |
| 6 靶向肽 | 第20-21页 |
| 7 课题思路 | 第21-23页 |
| 第一章 聚合物T7-PEG-SS-PAMAM的合成及表征 | 第23-30页 |
| 1 材料与仪器 | 第23页 |
| 1.1 材料 | 第23页 |
| 1.2 仪器 | 第23页 |
| 1.3 细胞 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.1 聚合物的合成 | 第23-25页 |
| 2.2 聚合物的结构确证 | 第25页 |
| 2.3 粒径和Zeta电位测定 | 第25页 |
| 2.4 载体的安全性考察 | 第25-26页 |
| 3 结果与讨论 | 第26-29页 |
| 3.1 聚合物的1HNMR分析 | 第26-27页 |
| 3.2 粒径和Zeta电位 | 第27-28页 |
| 3.3 载体安全性考察 | 第28-29页 |
| 4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第二章 复合物T7-PEG-SS-PAMAM/siRNA的构建及其沉默靶基因的研究 | 第30-49页 |
| 1 材料与仪器 | 第30-31页 |
| 1.1 材料 | 第30-31页 |
| 1.2 仪器 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-36页 |
| 2.1 聚合物/siRNA的制备和表征 | 第31-33页 |
| 2.2 流式细胞术检测复合物的细胞摄取 | 第33页 |
| 2.3 复合物在HepG2细胞中的分布和溶酶体逃逸 | 第33页 |
| 2.4 复合物下调PKM2表达的研究 | 第33-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-47页 |
| 3.1 凝胶阻滞实验 | 第36-37页 |
| 3.2 复合物粒径与表面电位 | 第37-38页 |
| 3.3 透射电镜观察 | 第38页 |
| 3.4 RNase稳定性试验 | 第38-39页 |
| 3.5 血清保护试验 | 第39-40页 |
| 3.6 存储稳定性试验 | 第40页 |
| 3.7 复合物体外释放 | 第40-42页 |
| 3.8 流式细胞术检测复合物的细胞摄取 | 第42-43页 |
| 3.9 复合物在HepG2细胞中的分布和溶酶体逃逸 | 第43页 |
| 3.10 RT-PCR考察复合物对PKM2mRNA表达水平的影响 | 第43-44页 |
| 3.11 WesternBlot考察复合物对PKM2蛋白表达 | 第44-45页 |
| 3.12 考察复合物对细胞代谢能力的影响 | 第45-46页 |
| 3.13 考察复合物对细胞迁移能力影响 | 第46-47页 |
| 3.14 考察下调PKM2对细胞凋亡的影响 | 第47页 |
| 4 本章小结 | 第47-49页 |
| 第三章 共转运系统T7-PEG-SS-PAMAM/DOX/siRNA的构建及其体外抗肿瘤研究 | 第49-60页 |
| 1 材料与仪器 | 第49页 |
| 1.1 材料 | 第49页 |
| 1.2 仪器 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-52页 |
| 2.1 聚合物/DOX/siRNA的制备和表征 | 第49-51页 |
| 2.2 聚合物/DOX/siRNA细胞学评价 | 第51-52页 |
| 3 结果与讨论 | 第52-58页 |
| 3.1 DOX的标准曲线的绘制 | 第52-53页 |
| 3.2 聚合物/DOX的表征 | 第53页 |
| 3.3 共载系统的制备与表征 | 第53-54页 |
| 3.4 共载纳米粒体外药物阿霉素释放 | 第54-55页 |
| 3.5 共载纳米粒的摄取与分布 | 第55-56页 |
| 3.6 共载纳米粒对细胞的抑制作用 | 第56-57页 |
| 3.7 共载纳米粒联合抗肿瘤作用机制的探讨 | 第57-58页 |
| 4 本章小结 | 第58-60页 |
| 第四章 T7-PEG-SS-PAMAM/DOX/siRNA的体内抗肿瘤效果评价 | 第60-69页 |
| 1 材料与仪器 | 第60页 |
| 1.1 材料 | 第60页 |
| 1.2 仪器 | 第60页 |
| 1.3 实验动物 | 第60页 |
| 1.4 溶液配制 | 第60页 |
| 2 实验方法 | 第60-62页 |
| 2.1 聚合物/DOX/siRNA的制备 | 第60-61页 |
| 2.2 HepG2裸鼠模型的建立 | 第61页 |
| 2.3 小动物活体成像 | 第61页 |
| 2.4 体内药效学评价 | 第61-62页 |
| 2.5 离体组织H&E染色 | 第62页 |
| 2.6 数据分析 | 第62页 |
| 3 结果与讨论 | 第62-67页 |
| 3.1 荷瘤裸鼠活体荧光成像 | 第62-63页 |
| 3.2 荷瘤裸鼠离体器官成像及组织分布 | 第63-64页 |
| 3.3 体内药效学评价 | 第64-66页 |
| 3.4 病理组织学评价 | 第66-67页 |
| 4 本章小结 | 第67-69页 |
| 全文总结 | 第69-71页 |
| 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 缩略词表 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
