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番茄NAC转录因子SlNAC11的克隆及功能研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
缩略词表第10-12页
1 绪论第12-20页
    1.1 NAC转录因子的研究进展第13-16页
        1.1.1 NAC转录因子的命名及家族成员第13页
        1.1.2 NAC转录因子的结构第13-14页
        1.1.3 NAC转录因子的分类第14页
        1.1.4 NAC转录因子的功能第14-16页
    1.2 课题的提出及研究意义第16页
    1.3 本课题的研究目的及主要研究内容第16-20页
        1.3.1 本课题的研究目的第16-17页
        1.3.2 本课题研究的主要内容第17页
        1.3.3 SlNAC11 基因功能研究的技术路线第17-18页
        1.3.4 课题的创新点第18-20页
2 番茄SlNAC11 基因的查找与生物信息学分析第20-24页
    2.1 材料及方法第20-21页
    2.2 结果与分析第21-24页
        2.2.1 SlNAC11 的氨基酸序列比对第21-22页
        2.2.2 SlNAC11 的系统进化分析第22-24页
3 SlNAC11 基因的组织表达模式研究第24-30页
    3.1 引言第24页
    3.2 材料、设备及试剂第24-26页
        3.2.1 材料第24-25页
        3.2.2 仪器与设备第25页
        3.2.3 试剂第25-26页
    3.3 实验方法第26-27页
        3.3.1 总RNA的提取第26页
        3.3.2 cDNA的合成第26-27页
    3.4 SlNAC11 表达模式分析第27-29页
        3.4.1 SlNAC11 基因定量引物设计及扩增条件摸索第27-28页
        3.4.2 SlNAC11 表达模式分析第28-29页
    3.5 结果与分析第29页
        3.5.1 SlNAC11 基因在番茄不同组织和器官中的表达模式第29页
    3.6 小结第29-30页
4. SlNAC11 基因沉默载体构建及转基因番茄的培育第30-68页
    4.1 材料第30页
    4.2 仪器与设备第30-32页
    4.3 试剂与培养基第32-36页
    4.4 实验方法第36-40页
        4.4.1DNA的纯化第36页
        4.4.2 大肠杆菌感受态的制备第36-37页
        4.4.3 转化大肠杆菌第37页
        4.4.4 目的基因沉默菌株与根癌农杆菌结合转移第37-38页
        4.4.5 SlNAC11-pBIN19 菌种转化农杆菌第38-39页
        4.4.6 农杆菌介导番茄的转化第39-40页
    4.5 SlNAC11 沉默载体的构建及转基因番茄的培育第40-54页
        4.5.1 目的基因SlNAC11 沉默片段的克隆第41-42页
        4.5.2 SlNAC11 基因沉默片段连接T载体第42-44页
        4.5.3 cmNAC11 -pHANNIBAL1 沉默中间载体的构建第44-49页
        4.5.4 SlNAC11-pBIN19 沉默载体的构建第49-52页
        4.5.5 SlNAC11-pBIN19 菌种转化农杆菌第52页
        4.5.6 SlNAC11-pBIN19 沉默载体转化番茄子叶外植体第52页
        4.5.7 转基因番茄的抗性筛选第52页
        4.5.8 PCR筛选转基因阳性番茄苗第52-53页
        4.5.9 SlNAC11 在阳性转基因番茄中沉默效果鉴定第53-54页
    4.6 结果与分析第54-67页
        4.6.1 目的基因SlNAC11 沉默片段的克隆第54页
        4.6.2 SlNAC11 基因沉默片段连接pMD18-T载体第54-56页
        4.6.3 cmNAC11 -pHANNIBAL-沉默中间载体的构建第56-61页
        4.6.4 SlNAC11-pBIN19 沉默载体的构建第61-64页
        4.6.5 SlNAC11-pBIN19 菌种转化农杆菌第64-66页
        4.6.6 农杆菌介导番茄的转化第66页
        4.6.7 培育转基因番茄第66页
        4.6.8 PCR筛选转基因阳性番茄苗第66-67页
        4.6.9 SlNAC11 基因在阳性转基因番茄中的表达分析第67页
    4.7 小结第67-68页
5 SlNAC11 基因功能分析第68-76页
    5.1 激素及非生物胁迫处理AC幼苗第68-69页
        5.1.1 激素胁迫处理野生型番茄幼苗第68页
        5.1.2 非生物胁迫处理野生型番茄幼苗第68-69页
    5.2 转基因番茄抗性实验第69-70页
        5.2.1 转基因番茄T1 代种子萌发实验第69页
        5.2.2 转基因番茄T1 代幼苗灵敏性实验第69页
        5.2.3 转基因番茄T1 代幼苗干旱抗性实验第69-70页
    5.3 结果与分析第70-76页
        5.3.1 激素及非生物胁迫处理野生型番茄幼苗第70-71页
        5.3.2 转基因番茄T1 代种子萌发实验第71-72页
        5.3.3 转基因番茄T1 代幼苗灵敏性实验第72-73页
        5.3.4 转基因番茄T1 代幼苗干旱抗性实验第73-76页
6 讨论第76-78页
致谢第78-80页
参考文献第80-86页
附录第86页

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