中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
1 绪论 | 第12-20页 |
1.1 NAC转录因子的研究进展 | 第13-16页 |
1.1.1 NAC转录因子的命名及家族成员 | 第13页 |
1.1.2 NAC转录因子的结构 | 第13-14页 |
1.1.3 NAC转录因子的分类 | 第14页 |
1.1.4 NAC转录因子的功能 | 第14-16页 |
1.2 课题的提出及研究意义 | 第16页 |
1.3 本课题的研究目的及主要研究内容 | 第16-20页 |
1.3.1 本课题的研究目的 | 第16-17页 |
1.3.2 本课题研究的主要内容 | 第17页 |
1.3.3 SlNAC11 基因功能研究的技术路线 | 第17-18页 |
1.3.4 课题的创新点 | 第18-20页 |
2 番茄SlNAC11 基因的查找与生物信息学分析 | 第20-24页 |
2.1 材料及方法 | 第20-21页 |
2.2 结果与分析 | 第21-24页 |
2.2.1 SlNAC11 的氨基酸序列比对 | 第21-22页 |
2.2.2 SlNAC11 的系统进化分析 | 第22-24页 |
3 SlNAC11 基因的组织表达模式研究 | 第24-30页 |
3.1 引言 | 第24页 |
3.2 材料、设备及试剂 | 第24-26页 |
3.2.1 材料 | 第24-25页 |
3.2.2 仪器与设备 | 第25页 |
3.2.3 试剂 | 第25-26页 |
3.3 实验方法 | 第26-27页 |
3.3.1 总RNA的提取 | 第26页 |
3.3.2 cDNA的合成 | 第26-27页 |
3.4 SlNAC11 表达模式分析 | 第27-29页 |
3.4.1 SlNAC11 基因定量引物设计及扩增条件摸索 | 第27-28页 |
3.4.2 SlNAC11 表达模式分析 | 第28-29页 |
3.5 结果与分析 | 第29页 |
3.5.1 SlNAC11 基因在番茄不同组织和器官中的表达模式 | 第29页 |
3.6 小结 | 第29-30页 |
4. SlNAC11 基因沉默载体构建及转基因番茄的培育 | 第30-68页 |
4.1 材料 | 第30页 |
4.2 仪器与设备 | 第30-32页 |
4.3 试剂与培养基 | 第32-36页 |
4.4 实验方法 | 第36-40页 |
4.4.1DNA的纯化 | 第36页 |
4.4.2 大肠杆菌感受态的制备 | 第36-37页 |
4.4.3 转化大肠杆菌 | 第37页 |
4.4.4 目的基因沉默菌株与根癌农杆菌结合转移 | 第37-38页 |
4.4.5 SlNAC11-pBIN19 菌种转化农杆菌 | 第38-39页 |
4.4.6 农杆菌介导番茄的转化 | 第39-40页 |
4.5 SlNAC11 沉默载体的构建及转基因番茄的培育 | 第40-54页 |
4.5.1 目的基因SlNAC11 沉默片段的克隆 | 第41-42页 |
4.5.2 SlNAC11 基因沉默片段连接T载体 | 第42-44页 |
4.5.3 cmNAC11 -pHANNIBAL1 沉默中间载体的构建 | 第44-49页 |
4.5.4 SlNAC11-pBIN19 沉默载体的构建 | 第49-52页 |
4.5.5 SlNAC11-pBIN19 菌种转化农杆菌 | 第52页 |
4.5.6 SlNAC11-pBIN19 沉默载体转化番茄子叶外植体 | 第52页 |
4.5.7 转基因番茄的抗性筛选 | 第52页 |
4.5.8 PCR筛选转基因阳性番茄苗 | 第52-53页 |
4.5.9 SlNAC11 在阳性转基因番茄中沉默效果鉴定 | 第53-54页 |
4.6 结果与分析 | 第54-67页 |
4.6.1 目的基因SlNAC11 沉默片段的克隆 | 第54页 |
4.6.2 SlNAC11 基因沉默片段连接pMD18-T载体 | 第54-56页 |
4.6.3 cmNAC11 -pHANNIBAL-沉默中间载体的构建 | 第56-61页 |
4.6.4 SlNAC11-pBIN19 沉默载体的构建 | 第61-64页 |
4.6.5 SlNAC11-pBIN19 菌种转化农杆菌 | 第64-66页 |
4.6.6 农杆菌介导番茄的转化 | 第66页 |
4.6.7 培育转基因番茄 | 第66页 |
4.6.8 PCR筛选转基因阳性番茄苗 | 第66-67页 |
4.6.9 SlNAC11 基因在阳性转基因番茄中的表达分析 | 第67页 |
4.7 小结 | 第67-68页 |
5 SlNAC11 基因功能分析 | 第68-76页 |
5.1 激素及非生物胁迫处理AC幼苗 | 第68-69页 |
5.1.1 激素胁迫处理野生型番茄幼苗 | 第68页 |
5.1.2 非生物胁迫处理野生型番茄幼苗 | 第68-69页 |
5.2 转基因番茄抗性实验 | 第69-70页 |
5.2.1 转基因番茄T1 代种子萌发实验 | 第69页 |
5.2.2 转基因番茄T1 代幼苗灵敏性实验 | 第69页 |
5.2.3 转基因番茄T1 代幼苗干旱抗性实验 | 第69-70页 |
5.3 结果与分析 | 第70-76页 |
5.3.1 激素及非生物胁迫处理野生型番茄幼苗 | 第70-71页 |
5.3.2 转基因番茄T1 代种子萌发实验 | 第71-72页 |
5.3.3 转基因番茄T1 代幼苗灵敏性实验 | 第72-73页 |
5.3.4 转基因番茄T1 代幼苗干旱抗性实验 | 第73-76页 |
6 讨论 | 第76-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-86页 |
附录 | 第86页 |