| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第10-11页 |
| 1.2 发展概况 | 第11-12页 |
| 1.3 免疫系统中Toll信号通路 | 第12-13页 |
| 1.4 NF-κB信号通路在肠道组织炎症中的作用 | 第13-15页 |
| 1.5 乳酸杆菌对Toll信号途径的影响 | 第15页 |
| 1.6 本文的主要研究内容 | 第15-17页 |
| 1.6.1 S层蛋白的提取和纯化 | 第15-16页 |
| 1.6.2 S层蛋白及LPS对HT-29细胞活性的影响 | 第16页 |
| 1.6.3 信号通路的相关基因和蛋白表达量的研究 | 第16页 |
| 1.6.4 细胞凋亡的研究 | 第16-17页 |
| 1.7 技术路线 | 第17-18页 |
| 第2章 材料和方法 | 第18-28页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第18-21页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第19-21页 |
| 2.1.3 培养基 | 第21页 |
| 2.1.4 菌种及细胞来源 | 第21页 |
| 2.2 乳酸杆菌的培养 | 第21页 |
| 2.3 热灭活菌体的制备 | 第21-22页 |
| 2.4 乳酸杆菌S-层蛋白的提取和纯化 | 第22-23页 |
| 2.4.1 乳酸杆菌S-层蛋白的提取 | 第22页 |
| 2.4.2 乳酸杆菌S-层蛋白的纯化 | 第22页 |
| 2.4.3 SDS-PAGE电泳测定S-层蛋白分子量 | 第22-23页 |
| 2.4.4 BCA法测定S-层蛋白浓度 | 第23页 |
| 2.5 乳酸杆菌对HT-29细胞的干预处理 | 第23-25页 |
| 2.5.1 活菌体、热灭活菌体及S层蛋白对细胞的影响 | 第23-24页 |
| 2.5.2 S-层蛋白对细胞信号通路及凋亡的影响 | 第24-25页 |
| 2.6 WST-8法检测HT-29细胞的活性 | 第25页 |
| 2.7 不同处理对HT-29细胞Caspase活性的影响 | 第25-26页 |
| 2.8 流式细胞术测定细胞凋亡 | 第26页 |
| 2.9 测HT-29细胞上清液中NO的含量变化 | 第26页 |
| 2.10 ELISA法测HT-29细胞上清液中细胞因子含量 | 第26页 |
| 2.11 WesternBlot测定细胞内信号通路中相关蛋白表达量的变化 | 第26-27页 |
| 2.12 数据处理及绘图 | 第27-28页 |
| 第3章 乳酸杆菌对LPS引起细胞活性影响作用的研究 | 第28-38页 |
| 3.1 乳酸杆菌S-层蛋白的分离纯化 | 第28-30页 |
| 3.1.1 乳酸杆菌S-层蛋白的SDS-PAGE | 第28-29页 |
| 3.1.2 BCA法测定乳酸杆菌S-层蛋白的含量 | 第29-30页 |
| 3.2 WST-8检测不同处理下HT-29细胞活性 | 第30-36页 |
| 3.2.1 不同浓度的LPS对HT-29细胞活性的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.2 不同浓度的S-层蛋白对HT-29细胞活性的影响 | 第31-33页 |
| 3.2.3 不同浓度的活菌体、热灭活菌体对HT-29细胞活性的影响 | 第33-36页 |
| 3.3 本章小结 | 第36-38页 |
| 第4章 乳酸杆菌对TLR-MyD88-NF-κB信号通路的调节作用 | 第38-52页 |
| 4.1 乳酸杆菌对LPS诱导NO产生的抑制作用 | 第38-42页 |
| 4.2 ELISA法测HT-29细胞上清液中炎性因子的含量变化 | 第42-48页 |
| 4.2.1 S-层蛋白对HT-29细胞炎性因子的影响 | 第42-44页 |
| 4.2.2 活菌体对HT-29细胞炎性因子的影响 | 第44-46页 |
| 4.2.3 热灭活菌体对HT-29细胞炎性因子的影响 | 第46-48页 |
| 4.3 WesternBlot分析HT-29细胞信号通路中相关蛋白含量 | 第48-51页 |
| 4.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第5章 乳酸杆菌及其S-层蛋白拮抗LPS对细胞凋亡的研究 | 第52-61页 |
| 5.1 乳酸杆菌对HT-29细胞Caspase活性影响 | 第52-57页 |
| 5.1.1 S-层蛋白对HT-29细胞Caspase活性的研究 | 第52-54页 |
| 5.1.2 活菌体对HT-29细胞Caspase活性的研究 | 第54-55页 |
| 5.1.3 热灭活菌体对HT-29细胞Caspase活性的研究 | 第55-57页 |
| 5.2 两种S-层蛋白的不同处理对HT-29细胞凋亡的影响 | 第57-60页 |
| 5.3 本章小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
