| 第一部分中文摘要 | 第5-6页 |
| 第一部分英文摘要 | 第6-7页 |
| 第二部分中文摘要 | 第7-8页 |
| 第二部分英文摘要 | 第8-12页 |
| 缩略词索引 | 第12-14页 |
| 第一部分 OPN对仔鼠免疫系统的影响 | 第14-40页 |
| 第1章 前言 | 第14-26页 |
| 1.1 免疫系统的介绍 | 第14-19页 |
| 1.1.1 免疫细胞的发育和成熟 | 第14-16页 |
| 1.1.2 免疫细胞的激活 | 第16页 |
| 1.1.3 T细胞依赖性抗原和T细胞非依赖性抗原 | 第16-17页 |
| 1.1.4 免疫应答 | 第17-19页 |
| 1.2 婴儿免疫系统的特点 | 第19-21页 |
| 1.2.1 先天性免疫系统 | 第19-20页 |
| 1.2.2 适应性免疫系统 | 第20-21页 |
| 1.3 母乳对婴儿免疫系统的影响及配方奶粉的发展 | 第21-22页 |
| 1.3.1 母乳对婴幼儿免疫系统的影响 | 第21-22页 |
| 1.3.2 配方奶粉的发展 | 第22页 |
| 1.4 骨桥蛋白在免疫系统中的重要作用及对婴儿生长发育的影响 | 第22-25页 |
| 1.4.1 骨桥蛋白在免疫系统中的作用 | 第23-24页 |
| 1.4.2 骨桥蛋白对婴儿免疫系统的影响 | 第24-25页 |
| 1.4.3 骨桥蛋白对婴儿大脑发育的影响 | 第25页 |
| 1.5 本课题研究的内容及意义 | 第25-26页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第26-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.2 动物胃饲 | 第26-27页 |
| 2.3 流式细胞术检测 | 第27页 |
| 2.3.1 细胞提取分离 | 第27页 |
| 2.3.2 流式仪鉴定 | 第27页 |
| 2.4 LPS免疫 | 第27-28页 |
| 2.5 OVA免疫 | 第28页 |
| 2.6 ELISA检测 | 第28-29页 |
| 2.7 数据的统计与分析 | 第29-30页 |
| 第3章 实验结果 | 第30-37页 |
| 3.1 仔鼠生长情况 | 第30页 |
| 3.2 OPN添加在配方奶粉中对CD3~+、T细胞和B220~+ B细胞分化的影响 | 第30-33页 |
| 3.2.1 OPN对胸腺中CD3~+T细胞和B220~+B细胞分化的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.2 OPN对脾脏中CD3~+T细胞和B220~+B细胞分化的影响 | 第31-32页 |
| 3.2.3 OPN对淋巴结中CD3~+T细胞和B220~+B细胞分化的影响 | 第32-33页 |
| 3.3 OPN添加在配方奶粉中对CD4~+、T细胞和CD8~+T细胞分化的影响 | 第33-35页 |
| 3.3.1 OPN对胸腺中CD4~+T细胞和CD8~+T细胞分化的影响 | 第33页 |
| 3.3.2 OPN对脾脏中CD4~+T细胞和CD8~+T细胞分化的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.3 OPN对淋巴结中CD4~+T细胞和CD8~+T细胞分化的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 OPN添加在配方奶粉中对血中LPS免疫后的免疫球蛋白的影响 | 第35-36页 |
| 3.5 OPN添加在配方奶粉中对血中OVA免疫后的免疫球蛋白的影响 | 第36-37页 |
| 第4章 讨论 | 第37-39页 |
| 第5章 结论 | 第39-40页 |
| 第二部分 PTPRU敲除的恶性胶质瘤稳定细胞株的建立 | 第40-68页 |
| 第1章 前言 | 第40-49页 |
| 1.1 胶质瘤的介绍及研究进展 | 第40-41页 |
| 1.1.1 胶质瘤的发生与发展 | 第40-41页 |
| 1.1.2 胶质瘤的分级和分类 | 第41页 |
| 1.2 胶质瘤的主要治疗手段 | 第41-42页 |
| 1.3 PTPRU在胶质瘤治疗中的重要作用 | 第42-45页 |
| 1.3.1 PTPs家族简介 | 第43页 |
| 1.3.2 R2B家族在肿瘤发展和治疗中的重要作用 | 第43-45页 |
| 1.3.3 非全长R2B RPTP片段可能有致癌作用 | 第45页 |
| 1.4 基因编辑技术是生物研究中的重要手段 | 第45-48页 |
| 1.4.1 基因编辑技术的发展 | 第45-47页 |
| 1.4.2 CRISPR Cas9在疾病治疗中的研究进展 | 第47-48页 |
| 1.5 本课题的研究内容及意义 | 第48-49页 |
| 第2章 材料与方法 | 第49-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 2.2 构建含目的基因的质粒 | 第50-52页 |
| 2.2.1 设计sgRNA的目的序列 | 第50页 |
| 2.2.2 质粒载体的酶切 | 第50-51页 |
| 2.2.3 琼脂糖胶回收 | 第51页 |
| 2.2.4 稀释引物和引物退火 | 第51页 |
| 2.2.5 T4DNA连接及转化 | 第51-52页 |
| 2.2.6 PCR鉴定及挑菌 | 第52页 |
| 2.2.7 质粒提取及浓度鉴定 | 第52页 |
| 2.3 转染 | 第52-53页 |
| 2.4 筛选 | 第53页 |
| 2.5 提取细胞DNA及测序 | 第53-54页 |
| 2.6 筛选单克隆 | 第54页 |
| 2.7 数据统计与分析 | 第54-55页 |
| 第3章 实验结果 | 第55-65页 |
| 3.1 PTPRU CRISPR Cas9载体系统的构建和鉴定 | 第55-58页 |
| 3.1.1 PTPRU CRISPR Cas9载体系统的构建 | 第55-56页 |
| 3.1.2 U6-PTPRU-sgRNA载体的鉴定 | 第56-57页 |
| 3.1.3 Cas9质粒和U6-PTPRU-sgRNA质粒的抽提 | 第57-58页 |
| 3.2 PTPRU CRISPR Cas9载体系统转染恶性胶质瘤细胞系 | 第58-60页 |
| 3.3 CRISPR Cas9系统在U87细胞中成功敲除目的基因 | 第60-62页 |
| 3.4 PTPRU基因敲除的单克隆筛选 | 第62-65页 |
| 第4章 讨论 | 第65-67页 |
| 第5章 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 附录Ⅰ 硕士期间的成果 | 第79页 |
