摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第14-35页 |
1.1 研究的目的和意义 | 第14-15页 |
1.2 国内外研究综述 | 第15-33页 |
1.2.1 酿酒酵母及其衰老 | 第15-18页 |
1.2.2 合成遗传阵列(Synthetic Genetic Array,SGA)方法的研究现状 | 第18-24页 |
1.2.3 聚集体/包涵体的形成及不对称遗传研究进展 | 第24-33页 |
1.3 目前存在的主要问题 | 第33页 |
1.4 课题来源及主要研究内容 | 第33-35页 |
1.4.1 课题来源 | 第33页 |
1.4.2 本文的主要研究内容 | 第33-35页 |
第2章 材料与方法 | 第35-46页 |
2.1 实验材料 | 第35-38页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第35页 |
2.1.2 培养基及试剂 | 第35-37页 |
2.1.3 实验主要试剂 | 第37页 |
2.1.4 实验主要仪器 | 第37-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-46页 |
2.2.1 质询菌株的构建 | 第38-39页 |
2.2.2 利用SGA方法构建基因组规模阵列 | 第39页 |
2.2.3 热诱导包涵体形成所需基因的大规模筛选 | 第39-40页 |
2.2.4 大规模筛选结果的手动人工验证 | 第40页 |
2.2.5 基因网络图谱分析 | 第40-41页 |
2.2.6 荧光显微镜成像 | 第41页 |
2.2.7 FM4-64染色 | 第41页 |
2.2.8 酿酒酵母寿命的检测 | 第41页 |
2.2.9 应用条件TS必需基因阵列进行SIR2的SGA分析 | 第41-42页 |
2.2.10 HttQ103-GFP表达及聚集体滞留率分析 | 第42页 |
2.2.11 通过ConA染色对热诱导聚集体的清除及滞留分析 | 第42-43页 |
2.2.12 Htt103Q-GFP聚集体的稳定性测定 | 第43页 |
2.2.13 经CHX处理增加代时后的聚集体遗传 | 第43页 |
2.2.14 Western杂交 | 第43-44页 |
2.2.15 溶解度实验 | 第44页 |
2.2.16 硫磺素T染色 | 第44页 |
2.2.17 Hsp104-Y662A-mCherry聚集体的诱导 | 第44页 |
2.2.18 聚集体形态及共定位的定量分析 | 第44-45页 |
2.2.19 肌动蛋白去极化分析 | 第45页 |
2.2.20 超高分辨率三维结构光照明显微镜 | 第45-46页 |
第3章 热诱导包涵体形成所需基因的大规模筛选 | 第46-61页 |
3.1 引言 | 第46页 |
3.2 酿酒酵母细胞热激处理后的表型分析 | 第46-49页 |
3.3 利用SGA方法进行阵列的构建 | 第49-50页 |
3.4 热诱导包涵体形成所需基因的高通量筛选及验证 | 第50-55页 |
3.5 热诱导包涵体形成所需基因的网络图谱分析 | 第55-56页 |
3.6 热诱导包涵体形成所需基因的分析 | 第56-60页 |
3.7 本章小结 | 第60-61页 |
第4章 HTT103Q聚集体不对称遗传模型的研究 | 第61-79页 |
4.1 引言 | 第61-62页 |
4.2 SIR2Δ细胞的聚集体遗传特性分析 | 第62-65页 |
4.3 SIR2Δ细胞一些细胞特征的量化分析 | 第65-69页 |
4.3.1 细胞芽颈的量化分析 | 第65-67页 |
4.3.2 细胞生长速率的量化分析 | 第67页 |
4.3.3 细胞几何长度的量化分析 | 第67-68页 |
4.3.4 细胞聚集体丰度的量化分析 | 第68-69页 |
4.4 世代时间的延长对聚集体遗传的影响 | 第69-72页 |
4.5 利用3D-SIM对聚集体与肌动蛋白关系的分析 | 第72-77页 |
4.5.1 热诱导聚集体与肌动蛋白细胞骨架的共定位研究 | 第73-76页 |
4.5.2 Htt103Q聚集体与肌动蛋白细胞骨架的共定位研究 | 第76-77页 |
4.6 本章小结 | 第77-79页 |
第5章 热诱导及HTT103Q聚集体不对称遗传所需的SIR2互作因子的研究 | 第79-108页 |
5.1 引言 | 第79-80页 |
5.2 SIR2的必须基因遗传互作网络图谱分析 | 第80-89页 |
5.3 热诱导聚集体不对称遗传所需因子的研究 | 第89-99页 |
5.4 HTT103Q聚集体偏向母细胞隔离所需因子的研究 | 第99-105页 |
5.5 本章小结 | 第105-108页 |
结论 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-127页 |
附录 | 第127-131页 |
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第131-133页 |
致谢 | 第133-134页 |
个人简历 | 第134页 |