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ckrc类突变体筛选体系的应用与rw1(y81)的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第11-34页
    1.1 生长素的发现第11页
    1.2 生长素的结构第11-13页
    1.3 生长素合成代谢第13-17页
    1.4 生长素受体及其信号传导第17-22页
    1.5 生长素极性运输第22-24页
        1.5.1 生长素极性运输模型第22页
        1.5.2 生长素输入载体第22-23页
        1.5.3 生长素输出载体第23-24页
    1.6 细胞分裂素的双元组分系统信号传递第24-28页
    1.7 生长素信号途径与细胞分裂素信号途径的相互作用第28-34页
        1.7.1 生长素影响细胞分裂素的代谢及信号传导第29-30页
        1.7.2 细胞分裂素影响生长素的代谢及运输第30-34页
本论文研究的目的和意义第34-35页
第二章 材料与方法第35-40页
    2.1 实验材料第35页
    2.2 实验方法第35-40页
        2.2.1 拟南芥培养条件第35页
        2.2.2 突变体的筛选第35页
        2.2.3 表型实验分析第35-36页
        2.2.4 GUS染色第36页
        2.2.5 总RNA的提取及反转录第36-38页
        2.2.6 PI染液的配制及染色方法第38页
        2.2.7 杂交步骤第38页
        2.2.8 基因芯片操作流程第38-40页
第三章 实验结果第40-69页
    3.1 筛选体系的建立与优化第40-44页
        3.1.1 筛选体系的建立第40-41页
        3.1.2 筛选体系的优化第41-42页
        3.1.3 筛选流程与研究程序第42-44页
    3.2 复筛突变体的整理研究第44-50页
        3.2.1 复筛突变体的表型第46-47页
        3.2.2 基因克隆第47-50页
    3.3 rc12(w52)部分第50-60页
        3.3.1 w52突变体表现为主根变短,对细胞分裂素不敏感以及向重力性缺陷第50-52页
        3.3.2 w52根卷曲表型能被外源生长素互补第52-53页
        3.3.3 w52的生长素和细胞分裂素信号通路正常第53-54页
        3.3.4 w52的基因克隆及连锁分析第54-56页
            3.3.4.1 Tail-PCR 和 Inverse-PCR第54页
            3.3.4.2 AT2G46950和AT2G46960双基因突变与的连锁分析第54-55页
            3.3.4.3 基因芯片分析结果第55-56页
        3.3.5 图位克隆第56-57页
        3.3.6 遗传杂交分析第57-59页
        3.3.7 基因重测序分析第59-60页
    3.4 rw1(y81)部分第60-69页
        3.4.1 rw1(y81)是一个根向地性缺陷的突变体第60-62页
        3.4.2 rw1(y81)根卷曲表型能被外源生长素恢复第62-63页
        3.4.3 rw1(y81)突变体的根伸长能被低浓度生长素促进,对细胞分裂素不敏感第63-64页
        3.4.4 rwl(y81)突变体对IAA和细胞分裂素的信号通路正常第64-65页
        3.4.5 rw1(y81)突变体的愈伤组织诱导证明其对细胞分裂素不敏感,生长素含量降低第65-66页
        3.4.6 rw1(y81)突变体的生长素含量明显鉴定第66页
        3.4.7 突变位点的确定第66-67页
        3.4.8 基因重测序结果第67-69页
第四章 讨论和展望第69-73页
    4.1 影响L-Trp合成的突变体同样具有根卷曲表型第69-70页
    4.2 生长素运输载体缺陷突变体同样适用于我们的筛选体系第70页
    4.3 T-DNA插入的特殊情况影响我们的基因克隆第70-71页
    4.4 rw1(y81)可能参与IBA到IAA转化而不参与L-Trp稳态调节的过程第71-73页
第五章 结论第73-74页
参考文献第74-88页
附录第88-101页
    附录一 相关激素及产物的配制方法第88-89页
    附录二 Tail-PCR克隆突变基因第89-92页
    附录三 Inverse-PCR克隆突变基因第92-95页
    附录四 PCR引物序列第95-97页
    附录五 w52样区段进一步检测结果第97-98页
    附录六 rw1(y81)重测序结果第98-100页
    附录七 PSKl15载体结构图第100-101页
在学期间发表论文第101-102页
致谢第102页

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