中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-34页 |
1.1 生长素的发现 | 第11页 |
1.2 生长素的结构 | 第11-13页 |
1.3 生长素合成代谢 | 第13-17页 |
1.4 生长素受体及其信号传导 | 第17-22页 |
1.5 生长素极性运输 | 第22-24页 |
1.5.1 生长素极性运输模型 | 第22页 |
1.5.2 生长素输入载体 | 第22-23页 |
1.5.3 生长素输出载体 | 第23-24页 |
1.6 细胞分裂素的双元组分系统信号传递 | 第24-28页 |
1.7 生长素信号途径与细胞分裂素信号途径的相互作用 | 第28-34页 |
1.7.1 生长素影响细胞分裂素的代谢及信号传导 | 第29-30页 |
1.7.2 细胞分裂素影响生长素的代谢及运输 | 第30-34页 |
本论文研究的目的和意义 | 第34-35页 |
第二章 材料与方法 | 第35-40页 |
2.1 实验材料 | 第35页 |
2.2 实验方法 | 第35-40页 |
2.2.1 拟南芥培养条件 | 第35页 |
2.2.2 突变体的筛选 | 第35页 |
2.2.3 表型实验分析 | 第35-36页 |
2.2.4 GUS染色 | 第36页 |
2.2.5 总RNA的提取及反转录 | 第36-38页 |
2.2.6 PI染液的配制及染色方法 | 第38页 |
2.2.7 杂交步骤 | 第38页 |
2.2.8 基因芯片操作流程 | 第38-40页 |
第三章 实验结果 | 第40-69页 |
3.1 筛选体系的建立与优化 | 第40-44页 |
3.1.1 筛选体系的建立 | 第40-41页 |
3.1.2 筛选体系的优化 | 第41-42页 |
3.1.3 筛选流程与研究程序 | 第42-44页 |
3.2 复筛突变体的整理研究 | 第44-50页 |
3.2.1 复筛突变体的表型 | 第46-47页 |
3.2.2 基因克隆 | 第47-50页 |
3.3 rc12(w52)部分 | 第50-60页 |
3.3.1 w52突变体表现为主根变短,对细胞分裂素不敏感以及向重力性缺陷 | 第50-52页 |
3.3.2 w52根卷曲表型能被外源生长素互补 | 第52-53页 |
3.3.3 w52的生长素和细胞分裂素信号通路正常 | 第53-54页 |
3.3.4 w52的基因克隆及连锁分析 | 第54-56页 |
3.3.4.1 Tail-PCR 和 Inverse-PCR | 第54页 |
3.3.4.2 AT2G46950和AT2G46960双基因突变与的连锁分析 | 第54-55页 |
3.3.4.3 基因芯片分析结果 | 第55-56页 |
3.3.5 图位克隆 | 第56-57页 |
3.3.6 遗传杂交分析 | 第57-59页 |
3.3.7 基因重测序分析 | 第59-60页 |
3.4 rw1(y81)部分 | 第60-69页 |
3.4.1 rw1(y81)是一个根向地性缺陷的突变体 | 第60-62页 |
3.4.2 rw1(y81)根卷曲表型能被外源生长素恢复 | 第62-63页 |
3.4.3 rw1(y81)突变体的根伸长能被低浓度生长素促进,对细胞分裂素不敏感 | 第63-64页 |
3.4.4 rwl(y81)突变体对IAA和细胞分裂素的信号通路正常 | 第64-65页 |
3.4.5 rw1(y81)突变体的愈伤组织诱导证明其对细胞分裂素不敏感,生长素含量降低 | 第65-66页 |
3.4.6 rw1(y81)突变体的生长素含量明显鉴定 | 第66页 |
3.4.7 突变位点的确定 | 第66-67页 |
3.4.8 基因重测序结果 | 第67-69页 |
第四章 讨论和展望 | 第69-73页 |
4.1 影响L-Trp合成的突变体同样具有根卷曲表型 | 第69-70页 |
4.2 生长素运输载体缺陷突变体同样适用于我们的筛选体系 | 第70页 |
4.3 T-DNA插入的特殊情况影响我们的基因克隆 | 第70-71页 |
4.4 rw1(y81)可能参与IBA到IAA转化而不参与L-Trp稳态调节的过程 | 第71-73页 |
第五章 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-88页 |
附录 | 第88-101页 |
附录一 相关激素及产物的配制方法 | 第88-89页 |
附录二 Tail-PCR克隆突变基因 | 第89-92页 |
附录三 Inverse-PCR克隆突变基因 | 第92-95页 |
附录四 PCR引物序列 | 第95-97页 |
附录五 w52样区段进一步检测结果 | 第97-98页 |
附录六 rw1(y81)重测序结果 | 第98-100页 |
附录七 PSKl15载体结构图 | 第100-101页 |
在学期间发表论文 | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |