| 摘要 | 第3-9页 |
| ABSTRACT | 第9-14页 |
| 前言 | 第18-21页 |
| 第一章 实验材料 | 第21-24页 |
| 1.1 细胞株、基因敲除小鼠及实验体系、乳腺癌组织 | 第21页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第21-23页 |
| 1.3 材料与仪器 | 第23-24页 |
| 第二章 实验方法 | 第24-47页 |
| 2.1 细胞培养方法及药物配制 | 第24-25页 |
| 2.2 MTT法检测细胞增殖 | 第25页 |
| 2.3 PI染色检测细胞周期 | 第25-26页 |
| 2.4 AnnexinV /PI染色检测细胞凋亡 | 第26-27页 |
| 2.5 核蛋白提取 | 第27页 |
| 2.6 DNMTs活性的检测 | 第27-29页 |
| 2.7 细胞基因组DNA的抽提 | 第29-31页 |
| 2.8 DNA的变性和亚硫酸氢盐修饰 | 第31-32页 |
| 2.9 提取总RNA | 第32-33页 |
| 2.10 RT-PCR | 第33-34页 |
| 2.11 总蛋白质的提取与浓度测定 | 第34-35页 |
| 2.12 蛋白质免疫印迹(Western blotting) | 第35-38页 |
| 2.13 免疫荧光方法检测细胞TAp73及△Np73蛋白的表达 | 第38-39页 |
| 2.14 质粒的转化、扩增及提取 | 第39-40页 |
| 2.15 瞬时转染 | 第40-41页 |
| 2.16 免疫组织化学 | 第41页 |
| 2.17 CHIP实验 | 第41-46页 |
| 2.18 统计学分析 | 第46-47页 |
| 第三章 实验结果 | 第47-62页 |
| 3.1 5-氮杂脱氧胞苷对乳腺癌细胞株功能作用的影响 | 第47-49页 |
| 3.1.1 5-氮杂脱氧胞苷抑制乳腺癌细胞的增殖 | 第47-48页 |
| 3.1.2 5-氮杂脱氧胞苷诱导乳腺癌细胞G1期阻滞 | 第48页 |
| 3.1.3 5-氮杂脱氧胞苷促进乳腺癌细胞凋亡增加 | 第48-49页 |
| 3.2 5-氮杂脱氧胞苷对乳腺癌细胞DNA甲基化的影响 | 第49-53页 |
| 3.2.1 5-氮杂脱氧胞苷对三株乳腺癌细胞株DNMTs活性的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.2 药物在乳腺癌细胞株中对p73基因不同启动子区甲基化的影响 | 第50-53页 |
| 3.3 乳腺癌细胞MCF-7中TAp73及△Np73的mRNA和蛋白表达水平的变化 | 第53-55页 |
| 3.3.1 乳腺癌细胞MCF-7中TAp73 mRNA表达增加而△Np73 mRNA表达减少 | 第53-54页 |
| 3.3.2 乳腺癌细胞MCF-7中TAp73蛋白表达增加而△Np73蛋白表达减少 | 第54-55页 |
| 3.4 Nrf-2与P1及P2的结合情况 | 第55-57页 |
| 3.4.1 生物信息学分析Nrf-2与P1及P2的结合情况 | 第55-56页 |
| 3.4.2 CHIP实验检测Nrf-2与P1及P2的结合情况 | 第56-57页 |
| 3.5 Nrf-2对TAp73及△Np73表达调控的影响 | 第57-62页 |
| 3.5.1 在乳腺癌细胞株中Nrf-2使TAp73及△Np73表达增加 | 第57-58页 |
| 3.5.2 在Nrf-2基因敲出小鼠中Nrf-2对TAp73及△Np73表达调控的影响 | 第58-59页 |
| 3.5.3 在乳腺癌组织中Nrf-2与TAp73及△Np73蛋白表达的关系 | 第59-62页 |
| 第四章 讨论 | 第62-65页 |
| 结论与展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 综述 | 第69-77页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-82页 |
