miR-10a抑制肝癌细胞生长及其机制探讨
| 英文缩略词表 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 材料与方法 | 第10-20页 |
| 一、实验材料 | 第10-14页 |
| 1. 人肝癌组织 | 第10页 |
| 2. 细胞系及细胞培养用品 | 第10页 |
| 3. 主要试剂及材料 | 第10-11页 |
| 4. 载体和菌株 | 第11-13页 |
| 5. 引物 | 第13页 |
| 6. 主要设备及软件 | 第13-14页 |
| 二、溶液的配置 | 第14-17页 |
| 1. DEPC处理水(1L) | 第14页 |
| 2. lOxPBS (1L) | 第14页 |
| 3. 大肠杆菌培养基的配制 | 第14-15页 |
| 4. SDS-PAGE溶液配制 | 第15-16页 |
| 5. DNA电泳缓冲液配制(10×TBE) | 第16页 |
| 6. Western Blotting相关溶液 | 第16-17页 |
| 三、实验方法 | 第17-20页 |
| 1. 组织总RNA提取,cDNA制备及定量PCR | 第17页 |
| 2. 细胞转染miRNA | 第17-18页 |
| 3. CCK8法检测细胞增殖 | 第18页 |
| 4. 细胞凋亡检测 | 第18页 |
| 5. 细胞周期检测 | 第18页 |
| 6. 3’UTR报告基因及其突变载体构建 | 第18-19页 |
| 7. 荧光素酶报告基因检测与分析 | 第19页 |
| 8. Western blot检测 | 第19页 |
| 9. 统计学分析 | 第19-20页 |
| 实验结果 | 第20-29页 |
| 1. miR-10a在肝癌组织中表达下调 | 第20-24页 |
| 2. miR-10a对肝癌细胞生物学行为的影响 | 第24-26页 |
| 3. miR-10a靶向作用于转录因子E2F3 | 第26-28页 |
| 4. E2F3参与调控肝癌细胞G1/S期 | 第28-29页 |
| 讨论 | 第29-32页 |
| 总结 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-37页 |
| 综述 | 第37-55页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 个人简历、在学期间参加的学术会议与发表的学术论文 | 第57-58页 |
