| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-34页 |
| 1.1 拟南芥离体器官再生 | 第11-15页 |
| 1.1.1 植物细胞的全能性 | 第11页 |
| 1.1.2 植物再生过程 | 第11-13页 |
| 1.1.3 拟南芥根为外植体的组织培养 | 第13-14页 |
| 1.1.4 分化成芽的细胞来源于紧邻木质部的中柱鞘细胞 | 第14-15页 |
| 1.2 不同生态型拟南芥存在遗传、生理和植物发育等方面的多态性 | 第15-20页 |
| 1.2.1 种子休眠和萌发的多态性 | 第15-16页 |
| 1.2.2 下胚轴长度多态性 | 第16页 |
| 1.2.3 根液压多态性 | 第16-17页 |
| 1.2.4 HIPV的多态性 | 第17-18页 |
| 1.2.5 生长素反应后转录水平的多态性 | 第18-19页 |
| 1.2.6 生殖阶段的多态性 | 第19页 |
| 1.2.7 再生能力的多态性 | 第19-20页 |
| 1.3 不同生态型拟南芥再生芽能力存在的可能参与机制 | 第20-25页 |
| 1.3.1 生长素相关的基因 | 第21页 |
| 1.3.2 细胞分裂素相关基因 | 第21-22页 |
| 1.3.3 SAM相关基因 | 第22-23页 |
| 1.3.4 AP2/ERF基因 | 第23-25页 |
| 1.4 QTL定位 | 第25-33页 |
| 1.4.1 数量性状 | 第25-26页 |
| 1.4.2 QTL定位的原理 | 第26-27页 |
| 1.4.3 QTL定位的作图群体及定位方法 | 第27-29页 |
| 1.4.4 分子标记 | 第29-31页 |
| 1.4.5 QTL精细定位策略 | 第31-33页 |
| 1.5 本实验研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.1.1 植物材料及生长条件 | 第34页 |
| 2.1.2 生化试剂 | 第34页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第34页 |
| 2.1.4 引物 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-46页 |
| 2.2.1 拟南芥的组织培养 | 第34-36页 |
| 2.2.1.1 拟南芥的种子处理 | 第34-35页 |
| 2.2.1.2 拟南芥幼苗的竖直培养 | 第35页 |
| 2.2.1.3 拟南芥幼苗根外植体的取材 | 第35页 |
| 2.2.1.4 愈伤组织的诱导 | 第35页 |
| 2.2.1.5 芽的诱导 | 第35页 |
| 2.2.1.6 CIM和SIM中生长素和细胞分裂素的浓度梯度配制方案 | 第35-36页 |
| 2.2.1.7 每块愈伤组织再生芽个数的表型统计 | 第36页 |
| 2.2.2 植物基因组DNA的提取与纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.2.1 植物基因组DNA的提取与纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.2.2 植物基因组DNA浓度的测定及稀释 | 第37页 |
| 2.2.3 分子标记PCR以及凝胶电泳 | 第37-38页 |
| 2.2.3.1 分子标记PCR | 第37页 |
| 2.2.3.2 凝胶电泳 | 第37-38页 |
| 2.2.4 表达载体的构建 | 第38-41页 |
| 2.2.4.1 PCR扩增 | 第38-39页 |
| 2.2.4.2 连接反应 | 第39页 |
| 2.2.4.3 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第39-40页 |
| 2.2.4.4 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第40-41页 |
| 2.2.4.5 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第41页 |
| 2.2.5 拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2.5.1 拟南芥的转化 | 第41-42页 |
| 2.2.5.2 转基因拟南芥的鉴定 | 第42页 |
| 2.2.6 植物组织总RNA的提取 | 第42-43页 |
| 2.2.7 反转录cDNA第一链的合成 | 第43页 |
| 2.2.8 实时定量PCR | 第43-44页 |
| 2.2.9 半薄切片的制作以及切片照相 | 第44-45页 |
| 2.2.9.1 半薄切片的制作流程 | 第44页 |
| 2.2.9.2 半薄切片中试剂的配方 | 第44-45页 |
| 2.2.9.3 切片、染色和照相 | 第45页 |
| 2.2.10 DIC照相 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-67页 |
| 3.1 拟南芥KY和Col-0生态型每块愈伤组织再生芽数目存在显著差异 | 第46页 |
| 3.2 KY和Col-0在CIM上愈伤组织形成阶段中中柱鞘细胞的增殖差异分析 | 第46-48页 |
| 3.3 芽再生过程中不同生态型愈伤组织对激素响应的分析 | 第48-52页 |
| 3.3.1 不同生态型愈伤组织对生长素的响应分析 | 第49-51页 |
| 3.3.2 不同生态型愈伤组织对细胞分裂素的响应分析 | 第51-52页 |
| 3.4 在CIM上愈伤组织形成关键基因的定量PCR分析 | 第52-57页 |
| 3.4.1 生长素相关基因的表达模式 | 第52-54页 |
| 3.4.2 细胞分裂素相关基因的表达模式 | 第54页 |
| 3.4.3 SAM相关基因的表达模式 | 第54-55页 |
| 3.4.4 愈伤组织形成关键基因的表达模式 | 第55-56页 |
| 3.4.5 ClassⅢ HD-ZIP相关基因的表达模式 | 第56-57页 |
| 3.5 每块愈伤组织再生芽数目的QTL mapping | 第57-67页 |
| 3.5.1 KYxCol-0 F2代植株的性状分离统计 | 第57-59页 |
| 3.5.2 显性效应分析 | 第59-60页 |
| 3.5.3 粗定位结果 | 第60-65页 |
| 3.5.4 精细定位 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| 5 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 附录 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
