| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第8-19页 |
| 1.1 硫代谢 | 第8-13页 |
| 1.2 非蛋白质氨基酸 | 第13-17页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 2 cysK 基因的分子克隆及原核表达 | 第19-36页 |
| 2.1 材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 菌株与载体 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.2.1 cysK 基因的分子克隆 | 第23-27页 |
| 2.2.2 cysK 基因原核表达及重组蛋白纯化 | 第27-30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-35页 |
| 2.3.1 cysK 基因原核表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.3.2 重组 OASS-A 的诱导表达和纯化 | 第32-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 3 S-苯基-L-半胱氨酸的合成及鉴定 | 第36-41页 |
| 3.1 材料 | 第36页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第36页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 3.2.1 OASS-A 酶活分析 | 第36页 |
| 3.2.2 S-苯基-L-半胱氨酸的合成 | 第36-37页 |
| 3.2.3 S-苯基-L-半胱氨酸的鉴定 | 第37页 |
| 3.3 结果 | 第37-39页 |
| 3.3.1 酶活性测定结果 | 第37页 |
| 3.3.2 HPLC 鉴定结果 | 第37-38页 |
| 3.3.3 ~1H NMR 鉴定结果 | 第38-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-40页 |
| 3.5 小结 | 第40-41页 |
| 4 S-苯基-L-半胱氨酸作为中间体参与新药合成及活性分析 | 第41-49页 |
| 4.1 材料 | 第41页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第41页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-45页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第41页 |
| 4.2.2 S-苯基-L-半胱氨酸作为中间体参与新药的合成 | 第41-44页 |
| 4.2.3 癌细胞增殖抑制作用的初步检测——MTT 法 | 第44-45页 |
| 4.3 结果 | 第45-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 4.5 小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 本文创新点 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录 A pET22b(+)质粒图谱 | 第58-59页 |
| 附录 B CysK-pET22b(+)重组质粒测序结果 | 第59-60页 |
| 附录 C 积雪草酸及脱氧胆酸衍生物结构鉴定图谱 | 第60-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
