| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| 1.1 卤虫的分类地位、生物学特征 | 第8-9页 |
| 1.2 窖蛋白1（caveolin-1）的结构及功能 | 第9-12页 |
| 1.2.1 窖蛋白-1 的结构特点 | 第9-11页 |
| 1.2.2 窖蛋白-1 的功能 | 第11-12页 |
| 1.3 山梨醇脱氢酶（SDH）的结构特征及功能 | 第12-14页 |
| 1.3.1 山梨醇脱氢酶的结构特征 | 第12-13页 |
| 1.3.2 山梨醇脱氢酶的功能 | 第13-14页 |
| 1.4 Caveolin-1 与 SDH 之间的调控关系 | 第14-15页 |
| 1.5 研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-34页 |
| 2.1 材料 | 第16-20页 |
| 2.1.1 卤虫的孵化及培养 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16-19页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-33页 |
| 2.2.1 卤虫 cDNA 的获得 | 第20-21页 |
| 2.2.2 Ascav-1 基因及 Assdh 基因 ORF 扩增反应 | 第21-22页 |
| 2.2.3 Ascav-1 重组蛋白的表达与纯化 | 第22-26页 |
| 2.2.4 AsSDH 重组蛋白的表达与纯化 | 第26-28页 |
| 2.2.5 兔抗卤虫 Ascav-1 及兔抗卤虫 AsSDH 多克隆抗体的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.6 不同发育时期蛋白表达 Westernblot 检测 | 第29-31页 |
| 2.2.7 不同温度胁迫下蛋白表达 Westernblot 检测 | 第31页 |
| 2.2.8 不同盐度胁迫下蛋白表达 Westernblot 检测 | 第31-32页 |
| 2.2.9 AsCAV1 亚细胞定位分析 | 第32-33页 |
| 2.3 生物信息学分析及统计学分析 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-55页 |
| 3.1 Ascav-1 及 As-sdh 基因 ORF 序列扩增 | 第34-35页 |
| 3.2 序列保守区分析 | 第35-36页 |
| 3.3 跨膜区预测分析 | 第36-37页 |
| 3.4 As-CAV-1 及 As-SDH 进化分析 | 第37-42页 |
| 3.4.1 As-CAV-1 及 As-SDH 与不同物种多蛋白序列比对 | 第37-40页 |
| 3.4.2 As-CAV-1 及 As-SDH 与不同物种系统进化关系分析 | 第40-42页 |
| 3.5 酶切检测分析 | 第42页 |
| 3.6 重组蛋白表达及纯化 | 第42-46页 |
| 3.6.1 As-CAV-1 重组蛋白表达及纯化 | 第42-44页 |
| 3.6.1.1 As-CAV-1 重组蛋白诱导条件的优化 | 第42-43页 |
| 3.6.1.2 As-CAV-1 重组蛋白可溶性鉴定 | 第43-44页 |
| 3.6.1.3 As-CAV-1 重组蛋白的纯化 | 第44页 |
| 3.6.2 As-SDH 重组蛋白表达及纯化 | 第44-46页 |
| 3．7 兔抗 As-CAV-1 及 As-SDH 多克隆抗体的特异性鉴定 | 第46-47页 |
| 3．8 As-CAV-1 蛋白的 Western blot 检测及亚细胞定位 | 第47-51页 |
| 3.8.1 As-CAV-1 亚细胞定位分析 | 第47-48页 |
| 3.8.2 As-CAV-1 在卤虫不同发育时期的表达 | 第48-49页 |
| 3.8.3 As-CAV-1 在不同温度胁迫下的表达 | 第49-50页 |
| 3.8.4 As-CAV-1 在不同盐度胁迫过程中的表达 | 第50-51页 |
| 3.9 As-SDH 蛋白的 Western blot 检测 | 第51-55页 |
| 3.9.1 As-SDH 在卤虫不同发育时期的表达 | 第51-52页 |
| 3.9.2 As-SDH 在不同温度胁迫过程中的表达 | 第52-53页 |
| 3.9.3 As-SDH 在不同盐度胁迫过程中的表达 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| 4.1 中国卤虫 As-cav-1 及 As-sdh 的 ORF 序列及蛋白同源性与进化关系 | 第55-56页 |
| 4.1.1 中国卤虫 As-cav-1 的 ORF 序列及其蛋白同源性与进化关系 | 第55页 |
| 4.1.2 中国卤虫 As-SDH 的 ORF 序列及其蛋白同源性与进化关系 | 第55-56页 |
| 4.2 原核表达重组蛋白与纯化 | 第56页 |
| 4.3 As-CAV-1 及 As-SDH 蛋白表达模式 | 第56-58页 |
| 4.3.1 中国卤虫 As-CAV-1 蛋白在不同发育时期、温度盐度胁迫下的表达分析与亚细胞定位 | 第56-57页 |
| 4.3.2 中国卤虫 As-SDH 蛋白在不同发育时期、温度盐度胁迫下的表达分析 | 第57-58页 |
| 4.4 As-CAV-1 及 As-SDH 蛋白在胚胎发育、温度盐度胁迫过程中的调控关系 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
