| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 1 绪论 | 第15-22页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 JaspineB类化合物简介 | 第15-16页 |
| 1.3 JaspineB及其衍生物的抗肿瘤生物活性的研究 | 第16-21页 |
| 1.3.1 抑制肿瘤细胞增殖 | 第17-18页 |
| 1.3.2 促进肿瘤细胞凋亡 | 第18-19页 |
| 1.3.3 促进肿瘤细胞自噬 | 第19-21页 |
| 1.4 提出本课题 | 第21-22页 |
| 2 化合物C-2降低膀胱癌细胞的存活率并诱导细胞凋亡 | 第22-34页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.3 化合物与细胞株 | 第24页 |
| 2.2.4 实验中常用试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第25-27页 |
| 2.3.2 MTT法测定细胞存活率 | 第27页 |
| 2.3.3 AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第27-28页 |
| 2.3.4 蛋白免疫印迹试验(WesternBlot) | 第28-31页 |
| 2.3.5 统计学分析 | 第31页 |
| 2.4 结果 | 第31-33页 |
| 2.4.1 C-2降低膀胱癌细胞(BIU87,EJ与5637)的存活率 | 第31-32页 |
| 2.4.2 C-2诱导膀胱癌细胞的凋亡 | 第32-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 3 C-2通过线粒体途径诱导膀胱癌细胞凋亡 | 第34-40页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料 | 第34-37页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第34-35页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 3.2.3 化合物与细胞株 | 第36页 |
| 3.2.4 实验中常用试剂的配制 | 第36-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37页 |
| 3.3.1 线粒体膜电位的检测 | 第37页 |
| 3.3.2 蛋白免疫印迹试验(WesternBlot) | 第37页 |
| 3.3.3 统计学分析 | 第37页 |
| 3.4 结果 | 第37-39页 |
| 3.5 本章小结 | 第39-40页 |
| 4 C-2诱导膀胱癌细胞发生自噬 | 第40-46页 |
| 4.1 引言 | 第40页 |
| 4.2 实验材料 | 第40-42页 |
| 4.2.1 主要仪器 | 第40页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第40-41页 |
| 4.2.3 化合物与细胞株 | 第41-42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第42页 |
| 4.3.2 蛋白免疫印迹试验(WesternBlot) | 第42页 |
| 4.3.3 免疫荧光 | 第42页 |
| 4.3.4 统计分析 | 第42-43页 |
| 4.4 结果 | 第43-45页 |
| 4.4.1 C-2上调膀胱癌细胞中自噬蛋白的表达 | 第43-44页 |
| 4.4.2 免疫荧光检测LC3表达增加 | 第44-45页 |
| 4.5 本章小结 | 第45-46页 |
| 5 C-2激活JNK途径诱导膀胱癌细胞自噬 | 第46-52页 |
| 5.1 引言 | 第46页 |
| 5.2 实验材料 | 第46-47页 |
| 5.2.1 主要仪器 | 第46-47页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第47页 |
| 5.2.3 化合物与细胞株 | 第47页 |
| 5.3 实验方法 | 第47-49页 |
| 5.3.1 细胞培养 | 第47-48页 |
| 5.3.2 WesternBlot | 第48页 |
| 5.3.3 免疫共沉淀 | 第48-49页 |
| 5.3.4 统计学方法 | 第49页 |
| 5.4 结果 | 第49-51页 |
| 5.4.1 C-2促进JNK和c-Jun蛋白的磷酸化 | 第49-50页 |
| 5.4.2 C-2 激活JNK途径解离Beclin-1/Bcl-2 与 Beclin-1/Bcl-xL蛋白复合物诱导细胞自噬 | 第50-51页 |
| 5.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 6 C-2通过JNK上调P62蛋白表达激活Nrf2途径从而抵抗膀胱癌细胞凋亡 | 第52-62页 |
| 6.1 引言 | 第52-53页 |
| 6.2 实验材料 | 第53-54页 |
| 6.2.1 主要仪器 | 第53页 |
| 6.2.2 主要试剂 | 第53-54页 |
| 6.2.3 化合物与细胞株 | 第54页 |
| 6.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 6.3.1 细胞培养 | 第54页 |
| 6.3.2 WesternBlot | 第54页 |
| 6.3.3 MTT法测定细胞存活率 | 第54-55页 |
| 6.3.4 Annexin-V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第55页 |
| 6.3.5 细胞siRNA转染 | 第55页 |
| 6.3.6 免疫共沉淀 | 第55页 |
| 6.3.7 统计分析 | 第55-56页 |
| 6.4 实验结果 | 第56-61页 |
| 6.4.1 C-2上调P62蛋白表达激活Nrf2信号通路 | 第56-57页 |
| 6.4.2 SP600125抑制JNK-P62-Keap1/Nrf2途径而促进C-2诱导细胞凋亡 | 第57-59页 |
| 6.4.3 Baf-A1促进P62激活Nrf2途径并抑制C-2诱导细胞凋亡 | 第59-60页 |
| 6.4.4 P62siRNA与JNKsiRNA增加C-2导致的细胞死亡 | 第60-61页 |
| 6.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 7 C-2体内抗肿瘤活性评价 | 第62-68页 |
| 7.1 引言 | 第62页 |
| 7.2 实验材料 | 第62-63页 |
| 7.2.1 主要仪器 | 第62页 |
| 7.2.2 主要试剂 | 第62页 |
| 7.2.3 药品、细胞株及实验动物 | 第62-63页 |
| 7.3 实验方法 | 第63-64页 |
| 7.3.1 细胞培养 | 第63页 |
| 7.3.2 体内抗肿瘤作用的研究 | 第63-64页 |
| 7.3.3 统计分析 | 第64页 |
| 7.4 实验结果 | 第64-67页 |
| 7.4.1 C-2可以抑制EJ细胞移植瘤的生长速度 | 第64-66页 |
| 7.4.2 C-2诱导EJ细胞移植瘤中发生自噬与凋亡 | 第66-67页 |
| 7.5 本章小结 | 第67-68页 |
| 8 讨论 | 第68-72页 |
| 全文总结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
