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Jaspine B衍生物C-2通过JNK激活细胞自噬与P62-Nrf2途径调节膀胱癌细胞凋亡

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
英文缩略词表第14-15页
1 绪论第15-22页
    1.1 引言第15页
    1.2 JaspineB类化合物简介第15-16页
    1.3 JaspineB及其衍生物的抗肿瘤生物活性的研究第16-21页
        1.3.1 抑制肿瘤细胞增殖第17-18页
        1.3.2 促进肿瘤细胞凋亡第18-19页
        1.3.3 促进肿瘤细胞自噬第19-21页
    1.4 提出本课题第21-22页
2 化合物C-2降低膀胱癌细胞的存活率并诱导细胞凋亡第22-34页
    2.1 引言第22页
    2.2 实验材料第22-25页
        2.2.1 主要仪器第22-23页
        2.2.2 主要试剂第23-24页
        2.2.3 化合物与细胞株第24页
        2.2.4 实验中常用试剂配制第24-25页
    2.3 实验方法第25-31页
        2.3.1 细胞培养第25-27页
        2.3.2 MTT法测定细胞存活率第27页
        2.3.3 AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡第27-28页
        2.3.4 蛋白免疫印迹试验(WesternBlot)第28-31页
        2.3.5 统计学分析第31页
    2.4 结果第31-33页
        2.4.1 C-2降低膀胱癌细胞(BIU87,EJ与5637)的存活率第31-32页
        2.4.2 C-2诱导膀胱癌细胞的凋亡第32-33页
    2.5 本章小结第33-34页
3 C-2通过线粒体途径诱导膀胱癌细胞凋亡第34-40页
    3.1 引言第34页
    3.2 实验材料第34-37页
        3.2.1 主要仪器第34-35页
        3.2.2 主要试剂第35-36页
        3.2.3 化合物与细胞株第36页
        3.2.4 实验中常用试剂的配制第36-37页
    3.3 实验方法第37页
        3.3.1 线粒体膜电位的检测第37页
        3.3.2 蛋白免疫印迹试验(WesternBlot)第37页
        3.3.3 统计学分析第37页
    3.4 结果第37-39页
    3.5 本章小结第39-40页
4 C-2诱导膀胱癌细胞发生自噬第40-46页
    4.1 引言第40页
    4.2 实验材料第40-42页
        4.2.1 主要仪器第40页
        4.2.2 主要试剂第40-41页
        4.2.3 化合物与细胞株第41-42页
    4.3 实验方法第42-43页
        4.3.1 细胞培养第42页
        4.3.2 蛋白免疫印迹试验(WesternBlot)第42页
        4.3.3 免疫荧光第42页
        4.3.4 统计分析第42-43页
    4.4 结果第43-45页
        4.4.1 C-2上调膀胱癌细胞中自噬蛋白的表达第43-44页
        4.4.2 免疫荧光检测LC3表达增加第44-45页
    4.5 本章小结第45-46页
5 C-2激活JNK途径诱导膀胱癌细胞自噬第46-52页
    5.1 引言第46页
    5.2 实验材料第46-47页
        5.2.1 主要仪器第46-47页
        5.2.2 主要试剂第47页
        5.2.3 化合物与细胞株第47页
    5.3 实验方法第47-49页
        5.3.1 细胞培养第47-48页
        5.3.2 WesternBlot第48页
        5.3.3 免疫共沉淀第48-49页
        5.3.4 统计学方法第49页
    5.4 结果第49-51页
        5.4.1 C-2促进JNK和c-Jun蛋白的磷酸化第49-50页
        5.4.2 C-2 激活JNK途径解离Beclin-1/Bcl-2 与 Beclin-1/Bcl-xL蛋白复合物诱导细胞自噬第50-51页
    5.5 本章小结第51-52页
6 C-2通过JNK上调P62蛋白表达激活Nrf2途径从而抵抗膀胱癌细胞凋亡第52-62页
    6.1 引言第52-53页
    6.2 实验材料第53-54页
        6.2.1 主要仪器第53页
        6.2.2 主要试剂第53-54页
        6.2.3 化合物与细胞株第54页
    6.3 实验方法第54-56页
        6.3.1 细胞培养第54页
        6.3.2 WesternBlot第54页
        6.3.3 MTT法测定细胞存活率第54-55页
        6.3.4 Annexin-V-FITC/PI双染检测细胞凋亡第55页
        6.3.5 细胞siRNA转染第55页
        6.3.6 免疫共沉淀第55页
        6.3.7 统计分析第55-56页
    6.4 实验结果第56-61页
        6.4.1 C-2上调P62蛋白表达激活Nrf2信号通路第56-57页
        6.4.2 SP600125抑制JNK-P62-Keap1/Nrf2途径而促进C-2诱导细胞凋亡第57-59页
        6.4.3 Baf-A1促进P62激活Nrf2途径并抑制C-2诱导细胞凋亡第59-60页
        6.4.4 P62siRNA与JNKsiRNA增加C-2导致的细胞死亡第60-61页
    6.5 本章小结第61-62页
7 C-2体内抗肿瘤活性评价第62-68页
    7.1 引言第62页
    7.2 实验材料第62-63页
        7.2.1 主要仪器第62页
        7.2.2 主要试剂第62页
        7.2.3 药品、细胞株及实验动物第62-63页
    7.3 实验方法第63-64页
        7.3.1 细胞培养第63页
        7.3.2 体内抗肿瘤作用的研究第63-64页
        7.3.3 统计分析第64页
    7.4 实验结果第64-67页
        7.4.1 C-2可以抑制EJ细胞移植瘤的生长速度第64-66页
        7.4.2 C-2诱导EJ细胞移植瘤中发生自噬与凋亡第66-67页
    7.5 本章小结第67-68页
8 讨论第68-72页
全文总结第72-73页
参考文献第73-80页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第80-81页
致谢第81页

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