摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
英汉缩略词表 | 第8-9页 |
前言 | 第9-13页 |
一、 材料 | 第13-18页 |
1 主要试剂 | 第13-14页 |
2 主要仪器和器材 | 第14-15页 |
3 实验动物 | 第15页 |
4 载体和菌株 | 第15页 |
5 主要溶液的配制 | 第15-18页 |
二、 方法 | 第18-31页 |
1 查询 SPAG6 基因图谱,确定 ARM 的碱基数 | 第18页 |
2 组织总 RNA 的提取及 RT-PCR | 第18-19页 |
3 SPAG6 全长及六个缺失 ARM 基因编码序列的扩增 | 第19-22页 |
4 TA 克隆 | 第22-23页 |
5 TA 克隆连接产物的转化与筛选 | 第23页 |
6 质粒的提取与纯化 | 第23-24页 |
7 SPAG6/PCR2.1 TA 克隆重组质粒的鉴定 | 第24页 |
8 真核重组质粒 SPAG6/ GFP 的构建 | 第24-26页 |
9 SPAG6/ GFP 重组质粒的鉴定 | 第26页 |
10 SPAG6/ pEGFP-N2 重组质粒转染细胞 | 第26-31页 |
三、 结果 | 第31-41页 |
1 小鼠 SPAG6 基因序列 | 第31-32页 |
2 小鼠 SPAG6 由 7 个 ARM 序列组成 | 第32-33页 |
3 提取睾丸总 RNA 的结果 | 第33-34页 |
4 全长及六个缺失 ARM 结构(七个)的小鼠 SPAG6 的 PCR 结果 | 第34页 |
5 七个 SPAG6/pCR 2.1TA vector 重组质粒双酶切鉴定结果 | 第34-35页 |
6 七个 SPAG6/pCR 2.1TA vector 克隆重组质粒测序结果 | 第35-37页 |
7 七个 SPAG6/pEGFP-N2 重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
8 七个 SPAG6/pEGFP-N2 重组质粒的测序结果 | 第38-39页 |
9 七个 SPAG6/GFP 重组质粒转染 CHO 细胞后的 Western Blot 结果 | 第39页 |
10 七个 SPAG6 /GFP 融合蛋白在细胞内的定位结果 | 第39-41页 |
四、 讨论 | 第41-44页 |
五、 研究的局限性 | 第44页 |
六、 研究的未来方向 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
附录:质粒载体的图谱 | 第50-54页 |
硕士期间参与的科研项目 | 第54-55页 |
硕士期间公开发表的论文 | 第55-56页 |
综述 | 第56-66页 |
参考文献 | 第61-66页 |
致谢 | 第66-67页 |