| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-16页 |
| 第一部分 骨髓间充质干细胞中Insulin2基因新的结合蛋白COUP-TFI的研究 | 第16-33页 |
| 1 前言 | 第16-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-26页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 细胞和动物 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第21页 |
| 2.2.2 小鼠bmMSC的分化 | 第21-22页 |
| 2.2.3 流式细胞分析 | 第22页 |
| 2.2.4 DNA亲和沉淀 | 第22-23页 |
| 2.2.5 总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.6 RT-PCR | 第23-24页 |
| 2.2.7 Western Blot | 第24页 |
| 2.2.8 冰冻切片制作 | 第24-25页 |
| 2.2.9 冰冻切片免疫荧光 | 第25页 |
| 2.2.10 细胞免疫荧光 | 第25页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-30页 |
| 3.1 bmMSC和Min6细胞培养 | 第26页 |
| 3.2 bmMSC的生物学特征鉴定 | 第26-28页 |
| 3.3 筛选新的与胰岛素启动子区结合蛋白 | 第28页 |
| 3.4 COUP-TFI在bmMSC和Min6细胞中的表达和分布 | 第28-29页 |
| 3.5 COUP-TFI在胰腺组织中的表达和分布 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 第二部分 抑制COUP-TFI促进bmMSC向胰岛素分泌细胞分化的研究 | 第33-51页 |
| 1 前言 | 第33-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-43页 |
| 2.1 材料 | 第35-36页 |
| 2.1.1 细胞和动物 | 第35页 |
| 2.1.2 试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第36页 |
| 2.2 方法 | 第36-43页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第36-37页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第37页 |
| 2.2.3 基因组DNA提取 | 第37页 |
| 2.2.4 载体构建 | 第37-39页 |
| 2.2.5 双荧光素酶报告基因检测 | 第39页 |
| 2.2.6 病毒颗粒的制作 | 第39-40页 |
| 2.2.7 总RNA的提取 | 第40页 |
| 2.2.8 RT-qPCR | 第40-41页 |
| 2.2.9 细胞免疫荧光 | 第41-42页 |
| 2.2.10 ELISA检测 | 第42页 |
| 2.2.11 双硫腙染色 | 第42页 |
| 2.2.12 细胞移植 | 第42页 |
| 2.2.13 统计学分析 | 第42-43页 |
| 3 实验结果 | 第43-48页 |
| 3.1 COUP-TFI对Ins2表达的影响 | 第43-44页 |
| 3.2 抑制COUP-TFI促进bmMSC分化为胰岛素分泌细胞 | 第44-46页 |
| 3.3 分化后的胰岛素分泌细胞的功能检测 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 第三部分 转录抑制因子COUP-TFI调控Insulin2的分子机制研究 | 第51-63页 |
| 1 前言 | 第51-52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-56页 |
| 2.1 材料 | 第52-53页 |
| 2.1.1 细胞 | 第52页 |
| 2.1.2 试剂 | 第52-53页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第53页 |
| 2.2 方法 | 第53-56页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第53页 |
| 2.2.2 ChIP | 第53-54页 |
| 2.2.3 细胞核蛋白提取 | 第54页 |
| 2.2.4 Co-IP | 第54-55页 |
| 2.2.5 EMSA | 第55-56页 |
| 2.2.6 DNA亲和沉淀 | 第56页 |
| 2.2.7 Western Blot | 第56页 |
| 3 实验结果 | 第56-60页 |
| 3.1 COUP-TFI结合于Ins2启动子区的DR1位点 | 第56-58页 |
| 3.2 COUP-TFI与NCoR、SMRT、HDAC3形成转录共抑制复合物 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 综述 | 第71-82页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 在学期间科研成绩 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 个人简介 | 第84页 |
