摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
主要缩略词表 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 光与植物光受体 | 第12页 |
1.2 光敏色素概述 | 第12-16页 |
1.2.1 光敏色素基因家族 | 第13页 |
1.2.2 光敏色素结构特征 | 第13-14页 |
1.2.3 光敏色素的生物学功能 | 第14-16页 |
1.2.3.1 种子萌发 | 第14-15页 |
1.2.3.2 光形态建成 | 第15页 |
1.2.3.3 避荫性反应 | 第15页 |
1.2.3.4 生物钟节律 | 第15页 |
1.2.3.5 开花期 | 第15-16页 |
1.2.3.6 气孔运动 | 第16页 |
1.3 光敏色素C的研究进展 | 第16-17页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-33页 |
2.1 材料 | 第18-23页 |
2.1.1 试验材料及处理方法 | 第18-19页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第19页 |
2.1.3 试剂及其配制 | 第19-21页 |
2.1.4 引物设计 | 第21-22页 |
2.1.5 仪器设备 | 第22-23页 |
2.1.6 生物信息学分析的相关数据库 | 第23页 |
2.2 试验方法 | 第23-33页 |
2.2.1 总RNA的提取与鉴定 | 第23-24页 |
2.2.2 cDNA第一链合成与鉴定 | 第24页 |
2.2.3 光敏色素C基因的克隆 | 第24-25页 |
2.2.4 扩增产物回收 | 第25-26页 |
2.2.5 目的基因片段与克隆载体的连接 | 第26页 |
2.2.6 克隆载体转化大肠杆菌感受态细胞 | 第26页 |
2.2.7 重组质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.8 阳性克隆的鉴定 | 第27-28页 |
2.2.9 基因测序 | 第28页 |
2.2.10 生物信息学分析 | 第28页 |
2.2.10.1. 基因序列分析 | 第28页 |
2.2.10.2. 蛋白质结构分析 | 第28页 |
2.2.10.3. 构建系统进化树 | 第28页 |
2.2.11 实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
2.2.12 数据分析 | 第29页 |
2.2.13 表达载体构建 | 第29页 |
2.2.14 转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第29-30页 |
2.2.15 农杆菌电击感受态细胞的制备 | 第30页 |
2.2.16 电击转化农杆菌感受态细胞 | 第30-31页 |
2.2.17 农杆菌渗透转化拟南芥 | 第31页 |
2.2.18 转基因植株筛选及鉴定 | 第31-32页 |
2.2.19 拟南芥幼苗下胚轴长度的测量 | 第32页 |
2.2.20 拟南芥幼苗总蛋白的提取 | 第32页 |
2.2.21 蛋白免疫印迹 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-40页 |
3.1 2个ZmPHYC基因的克隆和酶切鉴定 | 第33页 |
3.2 2个ZmPHYC基因的氨基酸序列和结构域分析 | 第33-35页 |
3.3 常见物种PHYC同源蛋白的系统进化树构建 | 第35页 |
3.4 2个ZmPHYC基因转录表达的组织特异性分析 | 第35-36页 |
3.5 2个ZmPHYC基因转录表达对持续光质的响应 | 第36-37页 |
3.6 2个ZmPHYC基因转录表达对不同光质转换的响应 | 第37页 |
3.7 2个ZmPHYC基因转录表达对光周期的响应 | 第37-38页 |
3.8 表达载体的双酶切鉴定 | 第38-39页 |
3.9 Myc-ZmPHYC1转基因植株的获得和鉴定 | 第39页 |
3.10 Myc-ZmPHYC1转基因拟南芥下胚轴缩短 | 第39-40页 |
4 讨论与结论 | 第40-43页 |
4.1 讨论 | 第40-42页 |
4.1.1 ZmPHYC1和ZmPHYC2蛋白结构的差异 | 第40页 |
4.1.2 ZmPHYC1和ZmPHYC2与禾本科物种PHYC的联系 | 第40页 |
4.1.3 ZmPHYC1和ZmPHYC2基因表达的器官特异性 | 第40-41页 |
4.1.4 ZmPHYC1和ZmPHYC2基因表达丰度对各种光照处理的响应 | 第41页 |
4.1.5 ZmphyC1参与拟南芥光形态建成的遗传转化 | 第41-42页 |
4.2 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第50页 |