消减免疫法筛选HPV型间杂合颗粒特异单克隆抗体及其表位研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第8-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-46页 |
| 1. HPV简介 | 第15-27页 |
| 1.1 HPV基因组结构 | 第15-16页 |
| 1.2 HPV的组装 | 第16-17页 |
| 1.3 病毒的感染途径和传播方式 | 第17-18页 |
| 1.4 人乳头瘤病毒的分类 | 第18-20页 |
| 1.5 HPV的致病机制 | 第20-22页 |
| 1.6 HPV的流行病学 | 第22-24页 |
| 1.7 HPV的免疫 | 第24-27页 |
| 2. HPV疫苗的研究 | 第27-33页 |
| 2.1 预防性疫苗的研究 | 第27-31页 |
| 2.2 治疗性疫苗的研究 | 第31-33页 |
| 3. 消减免疫的种类和应用 | 第33-38页 |
| 3.1 高区带耐受消减免疫法 | 第33-34页 |
| 3.2 新生期耐受消减免疫法 | 第34-36页 |
| 3.3 药物介导耐受消减免疫法 | 第36-38页 |
| 4. 抗原表位的研究方法 | 第38-44页 |
| 4.1 氨基酸替换和突变技术 | 第39页 |
| 4.2 肽扫描技术 | 第39页 |
| 4.3 生物信息学工具预测分析 | 第39-41页 |
| 4.4 免疫复合物晶体结构解析 | 第41-43页 |
| 4.5 其他抗原表位研究方法 | 第43-44页 |
| 5. 本研究的思路、目的和意义 | 第44-46页 |
| 第二章 材料与方法 | 第46-73页 |
| 1 仪器 | 第46-47页 |
| 2 主要耗材 | 第47-48页 |
| 3 主要试剂与实验动物 | 第48-54页 |
| 3.1 菌株、质粒、酶和软件 | 第48页 |
| 3.2 单克隆抗体、细胞株及实验动物 | 第48-49页 |
| 3.3 其它试剂 | 第49页 |
| 3.4 常见溶液及培养基的配制 | 第49-54页 |
| 4 方法 | 第54-59页 |
| 4.1 分子生物学实验方法 | 第54-57页 |
| 4.2 蛋白诱导表达、纯化及鉴定方法 | 第57-59页 |
| 5 小鼠免疫及免疫评价实验方法 | 第59-73页 |
| 5.1 小鼠常规免疫 | 第59-60页 |
| 5.2 小鼠消减免疫 | 第60页 |
| 5.3 融合杂交瘤的筛选 | 第60-63页 |
| 5.4 杂交瘤细胞的培养 | 第63-64页 |
| 5.5 单克隆抗体的制备及性质鉴定 | 第64-68页 |
| 5.6 单抗的表位鉴定 | 第68-73页 |
| 第三章 结果与分析 | 第73-105页 |
| 1. 消减免疫方案的研究 | 第73-87页 |
| 1.1 小鼠免疫原的制备 | 第73-76页 |
| 1.2 HPV杂合VLP免疫原性考察 | 第76-78页 |
| 1.3 消减免疫耐受方案研究 | 第78-84页 |
| 1.4 消减次数对耐受持久性的影响 | 第84-87页 |
| 1.5 第一部分小结 | 第87页 |
| 2. HPV杂合颗粒单克隆抗体的筛选及性质鉴定 | 第87-95页 |
| 2.1 单抗细胞株的筛选及稳定单克隆细胞株的获得 | 第87-88页 |
| 2.2 单抗基本性质鉴定 | 第88-94页 |
| 2.3 第二部分小结 | 第94-95页 |
| 3. HPV杂合VLP表位的预测 | 第95-105页 |
| 3.1 单抗2B3可变区同源模建 | 第95-96页 |
| 3.2 HPV杂合VLP同源模建 | 第96-98页 |
| 3.3 Ramachandran plot评估 | 第98-99页 |
| 3.4 Profile-3D分析 | 第99-100页 |
| 3.5 单抗2B3-Fab与2个五聚体的分子对接 | 第100页 |
| 3.6 对接结果分子间氢键分析 | 第100-101页 |
| 3.7 对接结果溶剂可及表面分析 | 第101-103页 |
| 3.8 单抗2B3识别表位的预测 | 第103-104页 |
| 3.9 第三部分小结 | 第104-105页 |
| 第四章 讨论 | 第105-113页 |
| 1. 消减免疫方案的摸索 | 第105-108页 |
| 1.1 环磷酰胺作用原理 | 第105页 |
| 1.2 佐剂使用的分析 | 第105-106页 |
| 1.3 耐受原剂量的分析 | 第106页 |
| 1.4 环磷酰胺剂量的分析 | 第106-107页 |
| 1.5 消减次数的分析 | 第107页 |
| 1.6 消减免疫效果评价 | 第107-108页 |
| 2. HPV杂合VLP的结构 | 第108-109页 |
| 3. HPV杂合VLP表位的研究 | 第109-111页 |
| 4. HPV杂合VLP在疫苗中的应用 | 第111-113页 |
| 小结与展望 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 附录 | 第125页 |
