摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
缩略词汇总表 | 第15-16页 |
第一章 绪论 | 第16-37页 |
1 研究背景 | 第16-18页 |
2 立项依据 | 第18-19页 |
3 细胞凋亡及其分子机制的研究 | 第19-31页 |
3.1 细胞凋亡的特征 | 第20页 |
3.2 细胞凋亡的调控因素 | 第20-31页 |
参考文献 | 第31-37页 |
第二章 线粒体通路介导特勒内酯诱导的肝癌细胞凋亡 | 第37-60页 |
1 实验材料 | 第37-39页 |
1.1 细胞株 | 第37页 |
1.2 药品及试剂 | 第37-38页 |
1.3 试剂配制 | 第38-39页 |
1.4 实验仪器 | 第39页 |
2 实验方法 | 第39-45页 |
2.1 细胞复苏及培养 | 第39-40页 |
2.2 MTT法检测药物的细胞毒性 | 第40页 |
2.3 细胞凋亡的形态学观察 | 第40页 |
2.4 凋亡的检测 | 第40-41页 |
2.5 活性氧检测 | 第41页 |
2.6 线粒体膜电势的检测 | 第41-42页 |
2.7 细胞内Ca~(2+)水平的检测 | 第42页 |
2.8 细胞全蛋白的提取 | 第42页 |
2.9 分离线粒体,细胞核和细胞液 | 第42页 |
2.10 蛋白含量的测定 | 第42-43页 |
2.11 Westem Blot分析 | 第43-45页 |
3 实验结果 | 第45-55页 |
3.1 MTT实验结果 | 第45-47页 |
3.2 Telekin诱导肝癌细胞凋亡 | 第47-49页 |
3.3 Telekin诱导线粒体膜电位下降,细胞色素C释放 | 第49-50页 |
3.4 Telekin诱导肝癌细胞产生ROS | 第50-52页 |
3.5 Telekin诱导肝癌细胞内游离Ca~(2+)水平升高 | 第52页 |
3.6 Telekin对Bcl-2家族蛋白的影响 | 第52-53页 |
3.7 Telekin活化细胞内的caspase-9和caspase-3 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
5 小结 | 第57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
第三章 P38 MAPK通路介导特勒内酯诱导肝癌细胞G_2/M期阻滞 | 第60-86页 |
1 实验材料 | 第60-61页 |
1.1 细胞株 | 第60页 |
1.2 药品及试剂 | 第60-61页 |
1.3 试剂配制 | 第61页 |
2 试验方法 | 第61-63页 |
2.1 MTT法检测药物的细胞毒性 | 第61页 |
2.2 Annexin V-PI染色检测细胞凋亡 | 第61页 |
2.3 活性氧检测 | 第61-62页 |
2.4 流式细胞仪测细胞周期分布 | 第62页 |
2.5 Western Blot分析 | 第62-63页 |
3 结果 | 第63-81页 |
3.1 Telekin诱导HepG-2细胞出现G_2/M期阻滞 | 第63-65页 |
3.2 Telekin诱导ROS积累 | 第65-66页 |
3.3 P38 MAPK信号通路参与了G_2/M期阻滞 | 第66-68页 |
3.4 ROS清除剂NAC可以削弱telekin诱导的G2/M期阻滞 | 第68-70页 |
3.5 抑制ROS的积累会导致相关蛋白表达改变 | 第70-72页 |
3.6 抑制p38 MAPK对telekin引起G_2/M期阻滞的影响 | 第72-74页 |
3.7 抑制p38 MAPK对G_2/M期调节蛋白的影响 | 第74-77页 |
3.8 P38 MAPK抑制剂降低了telekin的细胞毒性 | 第77-79页 |
3.9 P38 MAPK抑制剂削弱了telekin诱导的细胞凋亡 | 第79-81页 |
4 讨论 | 第81-82页 |
5 小结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第87-88页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第88页 |