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立枯丝核菌菌核形成过程中H2O2的作用及CAT的功能分析

摘要第12-14页
Abstract第14-15页
第一章 玉米纹枯病和过氧化氢酶的研究进展第16-29页
    1.1 玉米纹枯病的研究进展第16-17页
        1.1.1 玉米纹枯病的发生与危害第16页
        1.1.2 玉米纹枯病病原菌的生物学特性与菌丝融合群第16-17页
    1.2 菌核形成研究进展第17-20页
        1.2.1 丝状真菌菌核的研究进展第17-18页
        1.2.2 菌核形成的环境因素第18-19页
        1.2.3 菌核的氧胁迫诱导机制第19-20页
    1.3 过氧化氢酶的研究进展第20-23页
        1.3.1 过氧化氢酶的分类与功能第20-21页
        1.3.2 过氧化氢酶的催化机理第21页
        1.3.3 过氧化氢酶的活性测定第21-22页
        1.3.4 过氧化氢酶的应用第22-23页
    1.4 荧光定量PCR的研究进展第23-27页
        1.4.1 荧光定量PCR的发展及应用第23-24页
        1.4.2 荧光定量PCR的原理和分类第24-26页
        1.4.3 内参基因的选择第26-27页
    1.5 基因功能研究方法的进展第27-29页
        1.5.1 基因克隆技术第27页
        1.5.2 基因沉默技术第27-29页
第二章 玉米纹枯病菌CAT基因的克隆与生物信息学分析第29-42页
    2.1 试验材料第29-31页
        2.1.1 供试菌株第29页
        2.1.2 试验试剂第29-30页
        2.1.3 质粒与感受态细胞第30页
        2.1.4 试验使用培养基及其他第30页
        2.1.5 试验仪器第30页
        2.1.6 生物信息学分析软件第30-31页
    2.2 试验方法第31-35页
        2.2.1 菌体的培养第31页
        2.2.2 总RNA的提取以及反转录合成cDNA第31-32页
        2.2.3 RsCAT基因的克隆第32-34页
        2.2.4 RsCAT蛋白质生物信息学分析第34-35页
    2.3 结果与分析第35-41页
        2.3.1 RsCAT基因的扩增第35-37页
        2.3.2 RsCAT蛋白的生物信息学分析第37-41页
    2.4 小结第41-42页
第三章 过氧化氢(H_2O_2)和过氧化氢酶抑制剂对立枯丝核菌菌核形成的影响第42-57页
    3.1 试验材料第43页
        3.1.1 试验菌株第43页
        3.1.2 试验试剂第43页
        3.1.3 试验培养基和其他第43页
        3.1.4 试验仪器第43页
    3.2 试验方法第43-48页
        3.2.1 菌种的纯化第43-44页
        3.2.2 试验用具的处理第44页
        3.2.3 外源添加过氧化氢(H_2O_2)处理第44-45页
        3.2.4 外源添加3-氨基-1,2,4-三唑(AT)处理第45-46页
        3.2.5 不同时期立枯丝核菌菌内H_2O_2浓度的测定第46-47页
        3.2.6 过氧化氢酶活性的检测第47页
        3.2.7 数据的处理第47-48页
    3.3 结果与分析第48-55页
        3.3.1 外源添加过氧化氢(H_2O_2)对立枯丝核菌的影响第48-49页
        3.3.2 外源添加AT对立枯丝核菌的影响第49-51页
        3.3.3 两种处理对菌落形态的影响第51-53页
        3.3.4 不同处理组菌内过氧化氢浓度的测定第53-54页
        3.3.5 不同处理组菌内过氧化氢酶活性的测定第54-55页
    3.4 小结第55-57页
第四章 立枯丝核菌CAT基因的表达分析第57-64页
    4.1 实验材料第57页
        4.1.1 试验菌株第57页
        4.1.2 试验试剂第57页
        4.1.3 试验培养基和其他第57页
        4.1.4 试验仪器第57页
    4.2 试验方法第57-60页
        4.2.1 菌株的培养与采样第57-58页
        4.2.2 RNA的提取和反转录第58页
        4.2.3 Real-timePCR引物的设计第58页
        4.2.4 引物特异性检测第58-59页
        4.2.5 反应扩增效率的计算第59页
        4.2.6 RsCAT在菌核形成过程中表达差异分析第59页
        4.2.7 RsCAT在两种处理条件下的表达差异分析第59-60页
    4.3 结果与分析第60-63页
        4.3.1 引物特异性检测第60页
        4.3.2 引物扩增效率第60-61页
        4.3.3 RsCAT在菌核形成过程中表达差异分析结果第61-62页
        4.3.4 RsCAT在两种处理条件下的表达差异分析第62-63页
    4.4 小结第63-64页
第五章 结论与讨论第64-68页
    5.1 玉米纹枯病菌CAT基因的克隆与生物信息学分析第64页
    5.2 过氧化氢(H_2O_2)和过氧化氢酶抑制剂对立枯丝核菌菌核形成的影响第64-65页
    5.3 立枯丝核菌CAT基因的表达分析第65-66页
    5.4 其他试验相关结果第66-68页
参考文献第68-73页
致谢第73-74页
攻读硕士期间发表论文第74-75页

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