中文摘要 | 第10-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-40页 |
1.1 我国苹果生产现状 | 第13页 |
1.2 我国化肥施用现状 | 第13-14页 |
1.3 土壤中的氮素形式 | 第14-15页 |
1.4 氮素对植物生长发育中的作用 | 第15-30页 |
1.4.1 植物对硝酸盐的吸收和转运 | 第15-22页 |
1.4.2 植物对硝酸盐的同化 | 第22-23页 |
1.4.3 硝酸盐的信号途径 | 第23-30页 |
1.5 MYB转录因子 | 第30-39页 |
1.5.1 MYB转录因子的结构 | 第30-32页 |
1.5.2 MYB转录因子的功能 | 第32-38页 |
1.5.3 红肉苹果MdMYB10转录因子 | 第38-39页 |
1.6 研究的目的和意义 | 第39-40页 |
2 材料和方法 | 第40-77页 |
2.1 材料 | 第40-43页 |
2.1.1 植物材料及其培养和处理 | 第40-41页 |
2.1.2 菌株 | 第41页 |
2.1.3 载体 | 第41页 |
2.1.4 试剂和药品 | 第41-42页 |
2.1.5 引物 | 第42页 |
2.1.6 培养基配方 | 第42-43页 |
2.1.7 抗生素 | 第43页 |
2.2 实验方法 | 第43-77页 |
2.2.1 植物总RNA的提取和含量检测 | 第43-45页 |
2.2.2 cDNA的反转录 | 第45页 |
2.2.3 cDNA模板的合成 | 第45-46页 |
2.2.4 基因的克隆 | 第46-47页 |
2.2.5 PCR产物回收 | 第47页 |
2.2.6 连接反应 | 第47-48页 |
2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第48页 |
2.2.8 测序 | 第48页 |
2.2.9 质粒DNA的提取 | 第48-49页 |
2.2.10 质粒DNA的酶切反应 | 第49页 |
2.2.11 表达载体的构建 | 第49-51页 |
2.2.12 农杆菌感受态细胞的转化 | 第51页 |
2.2.13 植物材料的准备及转化 | 第51-52页 |
2.2.14 植物基因组DNA的提取 | 第52-53页 |
2.2.15 植物总蛋白的提取 | 第53-54页 |
2.2.16 酵母双杂交 | 第54-56页 |
2.2.17 酵母单杂交 | 第56-59页 |
2.2.18 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第59-61页 |
2.2.19 凝胶变动迁移率(EMSA) | 第61-64页 |
2.2.20 蛋白相关实验技术 | 第64-68页 |
2.2.21 GUS组织化学染色 | 第68-71页 |
2.2.22 硝态氮含量的测定 | 第71-72页 |
2.2.23 硝酸还原酶活性的测定-活体法 | 第72-73页 |
2.2.24 全氮的测定-消煮蒸馏法 | 第73-74页 |
2.2.25 15N的吸收测定 | 第74-75页 |
2.2.26 花青苷测定 | 第75页 |
2.2.27 瞬时表达系统 | 第75-77页 |
3 结果与分析 | 第77-113页 |
3.1 红肉苹果红肉位点基因MdMYB10参与调控氮素的利用率 | 第77-83页 |
3.2 MdMYB10转录因子调控硝酸盐的利用率 | 第83-84页 |
3.3 红肉苹果红肉位点基因MdMYB10参与调控硝酸盐吸收和利用的基因 | 第84-90页 |
3.4 MdMYB10转录因子直接结合MdNRT2.4-1的启动子并转录激活其表达 | 第90-96页 |
3.5 MdMYB10转录因子部分通过MdNRT2.4-1调节硝酸盐的利用率 | 第96-103页 |
3.6 红肉苹果控制硝酸盐从老叶到新叶的再分配 | 第103-111页 |
3.7 MdMYB10转录因子和它的同源蛋白在调节硝酸盐的吸收和利用方面具有保守性 | 第111-113页 |
4 讨论 | 第113-118页 |
4.1 红肉苹果红肉位点基因MdMYB10提高硝酸盐的吸收和利用 | 第113-114页 |
4.2 调节硝酸盐吸收和利用的转录调节子 | 第114-115页 |
4.3 MdMYB10在碳(C)和氮(N)营养平衡中的作用 | 第115页 |
4.4 MdMYB10除了通过调控硝酸盐的吸收途径以外也可以通过其他调控途径提高氮素利用效率 | 第115-116页 |
4.5 MdMYB10转录因子和它的同源蛋白在调节硝酸盐吸收过程中存在保守性 | 第116-118页 |
5 结论 | 第118-119页 |
6 参考文献 | 第119-143页 |
7 附录 | 第143-148页 |
8 致谢 | 第148-150页 |
9 攻读学位期间发表及待发表的论文 | 第150页 |