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苹果红肉位点基因MdMYB10调控硝酸盐吸收和分配的机理研究

中文摘要第10-11页
英文摘要第11-12页
1 前言第13-40页
    1.1 我国苹果生产现状第13页
    1.2 我国化肥施用现状第13-14页
    1.3 土壤中的氮素形式第14-15页
    1.4 氮素对植物生长发育中的作用第15-30页
        1.4.1 植物对硝酸盐的吸收和转运第15-22页
        1.4.2 植物对硝酸盐的同化第22-23页
        1.4.3 硝酸盐的信号途径第23-30页
    1.5 MYB转录因子第30-39页
        1.5.1 MYB转录因子的结构第30-32页
        1.5.2 MYB转录因子的功能第32-38页
        1.5.3 红肉苹果MdMYB10转录因子第38-39页
    1.6 研究的目的和意义第39-40页
2 材料和方法第40-77页
    2.1 材料第40-43页
        2.1.1 植物材料及其培养和处理第40-41页
        2.1.2 菌株第41页
        2.1.3 载体第41页
        2.1.4 试剂和药品第41-42页
        2.1.5 引物第42页
        2.1.6 培养基配方第42-43页
        2.1.7 抗生素第43页
    2.2 实验方法第43-77页
        2.2.1 植物总RNA的提取和含量检测第43-45页
        2.2.2 cDNA的反转录第45页
        2.2.3 cDNA模板的合成第45-46页
        2.2.4 基因的克隆第46-47页
        2.2.5 PCR产物回收第47页
        2.2.6 连接反应第47-48页
        2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的转化第48页
        2.2.8 测序第48页
        2.2.9 质粒DNA的提取第48-49页
        2.2.10 质粒DNA的酶切反应第49页
        2.2.11 表达载体的构建第49-51页
        2.2.12 农杆菌感受态细胞的转化第51页
        2.2.13 植物材料的准备及转化第51-52页
        2.2.14 植物基因组DNA的提取第52-53页
        2.2.15 植物总蛋白的提取第53-54页
        2.2.16 酵母双杂交第54-56页
        2.2.17 酵母单杂交第56-59页
        2.2.18 染色质免疫共沉淀(ChIP)第59-61页
        2.2.19 凝胶变动迁移率(EMSA)第61-64页
        2.2.20 蛋白相关实验技术第64-68页
        2.2.21 GUS组织化学染色第68-71页
        2.2.22 硝态氮含量的测定第71-72页
        2.2.23 硝酸还原酶活性的测定-活体法第72-73页
        2.2.24 全氮的测定-消煮蒸馏法第73-74页
        2.2.25 15N的吸收测定第74-75页
        2.2.26 花青苷测定第75页
        2.2.27 瞬时表达系统第75-77页
3 结果与分析第77-113页
    3.1 红肉苹果红肉位点基因MdMYB10参与调控氮素的利用率第77-83页
    3.2 MdMYB10转录因子调控硝酸盐的利用率第83-84页
    3.3 红肉苹果红肉位点基因MdMYB10参与调控硝酸盐吸收和利用的基因第84-90页
    3.4 MdMYB10转录因子直接结合MdNRT2.4-1的启动子并转录激活其表达第90-96页
    3.5 MdMYB10转录因子部分通过MdNRT2.4-1调节硝酸盐的利用率第96-103页
    3.6 红肉苹果控制硝酸盐从老叶到新叶的再分配第103-111页
    3.7 MdMYB10转录因子和它的同源蛋白在调节硝酸盐的吸收和利用方面具有保守性第111-113页
4 讨论第113-118页
    4.1 红肉苹果红肉位点基因MdMYB10提高硝酸盐的吸收和利用第113-114页
    4.2 调节硝酸盐吸收和利用的转录调节子第114-115页
    4.3 MdMYB10在碳(C)和氮(N)营养平衡中的作用第115页
    4.4 MdMYB10除了通过调控硝酸盐的吸收途径以外也可以通过其他调控途径提高氮素利用效率第115-116页
    4.5 MdMYB10转录因子和它的同源蛋白在调节硝酸盐吸收过程中存在保守性第116-118页
5 结论第118-119页
6 参考文献第119-143页
7 附录第143-148页
8 致谢第148-150页
9 攻读学位期间发表及待发表的论文第150页

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