| 缩略词 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 第一章 引言 | 第18-33页 |
| 1 古树名木保护的研究现状 | 第19-21页 |
| 2 植物离体种质保存进展 | 第21-23页 |
| 2.1 常规组织培养技术保存种质 | 第21页 |
| 2.2 限制生长保存法保存研究进展 | 第21-22页 |
| 2.3 超低温保存法保存研究进展 | 第22-23页 |
| 2.4 植物种质资源离体保存过程中的遗传变异研究 | 第23页 |
| 3 植物遗传多样性的DNA 分子标记分析 | 第23-25页 |
| 3.1 RAPD 标记技术及应用 | 第24页 |
| 3.2 ISSR 标记技术及应用 | 第24-25页 |
| 3.3 SRAP 标记技术及应用 | 第25页 |
| 4 植物基因同源克隆方法 | 第25-26页 |
| 5 蛋白质组学在植物上的应用 | 第26-27页 |
| 5.1 蛋白质组学研究内容及支柱技术 | 第26-27页 |
| 5.2 蛋白质组学在植物生命活动中的应用 | 第27页 |
| 6 植物GPX 研究进展 | 第27-28页 |
| 7 荔枝生物技术研究进展 | 第28-31页 |
| 7.1 荔枝体细胞胚胎发生 | 第28-29页 |
| 7.1.1 荔枝胚性愈伤组织的诱导 | 第28-29页 |
| 7.1.2 荔枝松散型胚性愈伤组织的筛选与保持 | 第29页 |
| 7.1.3 荔枝胚性愈伤组织的体胚发生与植株再生 | 第29页 |
| 7.2 荔枝器官发生 | 第29-30页 |
| 7.3 荔枝体细胞胚胎发生的细胞与分子生物学 | 第30页 |
| 7.4 荔枝种质超低温保存 | 第30页 |
| 7.5 荔枝遗传多样性DNA 分子标记分析 | 第30-31页 |
| 8 本研究的主要内容及意义 | 第31-33页 |
| 8.1 本研究的主要内容 | 第31-32页 |
| 8.2 研究意义 | 第32-33页 |
| 第二章 福州市荔枝古树遗传多样性的 RAPD 分析 | 第33-43页 |
| 1 材料与方法 | 第33-36页 |
| 1.1 材料 | 第33页 |
| 1.2 主要实验设备、实验试剂及所需溶液的配制 | 第33-35页 |
| 1.2.1 主要实验设备 | 第33-34页 |
| 1.2.2 主要试验试剂 | 第34页 |
| 1.2.3 主要溶液的配制 | 第34-35页 |
| 1.3 RAPD 分析方法 | 第35-36页 |
| 1.3.1 荔枝古树基因组DNA 的提取 | 第35页 |
| 1.3.2 荔枝古树基因组DNA 的检测 | 第35-36页 |
| 1.3.3 DNA 扩增反应 | 第36页 |
| 1.3.4 RAPD 反应引物筛选 | 第36页 |
| 1.3.5 扩增产物的数据分析方法 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-41页 |
| 2.1 荔枝古树基因组DNA 的提取质量 | 第36-37页 |
| 2.2 RAPD 引物筛选 | 第37页 |
| 2.3 荔枝古树资源RAPD 多态性分析 | 第37-40页 |
| 2.4 RAPD 标记福州荔枝古树的聚类分析 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 3.1 关于RAPD 重复性、稳定性问题 | 第41页 |
| 3.2 福州市荔枝古树核心种质的构建 | 第41-42页 |
| 3.3 福州荔枝古树资源的利用价值 | 第42-43页 |
| 3.3.1 福州荔枝古树资源的保护价值 | 第42页 |
| 3.3.2 福州荔枝古树基因资源的挖掘利用 | 第42-43页 |
| 第三章 福州市荔枝古树种质资源的离体限制生长保存 | 第43-60页 |
| 第一节 福州市荔枝古树离体保存材料的建立 | 第43-47页 |
| 1 材料与方法 | 第44-45页 |
| 1.1 材料 | 第44页 |
| 1.2 方法 | 第44-45页 |
| 1.2.1 外植体的处理 | 第44页 |
| 1.2.2 诱导培养基 | 第44页 |
| 1.2.3 荔枝古树花药愈伤组织的诱导 | 第44页 |
| 1.2.4 初始诱导愈伤组织的继代保存 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-46页 |
| 2.1 荔枝古树花药培养与愈伤组织的诱导 | 第45页 |
| 2.2 不同培养基、基因型对愈伤组织诱导的影响 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 3.1 花药培养诱导的胚性愈伤组织的来源 | 第46页 |
| 3.2 影响荔枝花药培养诱导EC 的因素 | 第46-47页 |
| 第二节 福州市荔枝古树胚性愈伤组织的离体限制生长保存 | 第47-55页 |
| 1 材料与方法 | 第47-48页 |
| 1.1 材料 | 第47页 |
| 1.2 方法 | 第47-48页 |
| 1.2.1 荔枝古树EC 的限制生长保存的优化 | 第47-48页 |
| 1.2.2 荔枝古树EC 继代培养过程中生长曲线的绘制 | 第48页 |
| 1.2.3 17份荔枝古树核心种质EC的离体保存 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-53页 |
| 2.1 荔枝古树EC 限制生长保存的优化 | 第48-53页 |
| 2.1.1 接种量对荔枝古树EC 保存的影响 | 第48-49页 |
| 2.1.2 光照强度对对荔枝古树EC 保存的影响 | 第49页 |
| 2.1.3 光质对对荔枝古树EC 保存的影响 | 第49-50页 |
| 2.1.4 蔗糖浓度对对荔枝古树EC 保存的影响 | 第50页 |
| 2.1.5 琼脂浓度对对荔枝古树EC 保存的影响 | 第50-51页 |
| 2.1.6 甘露醇对荔枝古树EC 保存的影响 | 第51-52页 |
| 2.1.7 温度对对荔枝古树EC 保存的影响 | 第52-53页 |
| 2.2 17 份福州市荔枝古树核心种质EC 的离体保存 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 3.1 改变接种量在荔枝EC离体种质保存中的作用 | 第53页 |
| 3.2 提高渗透压在荔枝EC离体种质保存中的作用 | 第53-54页 |
| 3.2.1 蔗糖在荔枝EC 离体种质保存中的作用 | 第53页 |
| 3.2.2 琼脂在荔枝EC 离体种质保存中的作用 | 第53-54页 |
| 3.2.3 甘露醇在荔枝EC 离体种质保存中的作用 | 第54页 |
| 3.3 温度在荔枝EC 离体种质保存中的作用 | 第54页 |
| 3.4 延长荔枝EC 保存周期的可能性 | 第54-55页 |
| 第三节 福州市荔枝古树EC的体胚发生及植株再生 | 第55-57页 |
| 1 材料与方法 | 第55-56页 |
| 1.1 材料 | 第55页 |
| 1.2 方法 | 第55-56页 |
| 1.2.1 荔枝古树体胚的诱导 | 第55页 |
| 1.2.2 荔枝古树体胚的成熟与萌发 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56页 |
| 2.1 不同荔枝古树EC 的体胚发生 | 第56页 |
| 2.2 荔枝古树体胚的成熟与萌发 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-57页 |
| 第四节 荔枝古树EC保存前后的遗传稳定性的RAPD检测 | 第57-60页 |
| 1 材料与方法 | 第57-58页 |
| 1.1 材料 | 第57页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第57页 |
| 1.3 DNA 的提取与检测 | 第57页 |
| 1.4 RAPD 反应引物筛选 | 第57-58页 |
| 1.5 RAPD 扩增 | 第58页 |
| 1.6 RAPD 数据分析 | 第58页 |
| 1.7 限制生长保存前后的变异率 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-59页 |
| 2.1 荔枝古树EC 的DNA 提取质量 | 第58-59页 |
| 2.2 荔枝古树EC 离体限制生长保存前后的RAPD 检测 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-60页 |
| 第四章 福州市荔枝古树 EC 的 GPX 活性变化及其基因的克隆 | 第60-91页 |
| 第一节 福州市荔枝古树胚性愈伤组织的GPX活性变化 | 第60-64页 |
| 1 材料与方法 | 第61-62页 |
| 1.1 供试材料 | 第61页 |
| 1.2 试剂的配制 | 第61页 |
| 1.3 方法 | 第61-62页 |
| 1.3.1 GSH 标准曲线的绘制 | 第61页 |
| 1.3.2 荔枝古树EC 中蛋白质测定、GPX 粗酶液制备及GPX 酶活性测定 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-63页 |
| 2.1 常规继代保存过程的GPX 活性变化 | 第62-63页 |
| 2.2 最佳限制生长保存方案保存过程的GPX 活性变化 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 第二节 荔枝古树胚性愈伤组织GPX基因的cDNA及DNA克隆 | 第64-78页 |
| 1 材料与方法 | 第64-68页 |
| 1.1 供试材料 | 第64页 |
| 1.2 仪器和试剂 | 第64-65页 |
| 1.2.1 仪器 | 第64页 |
| 1.2.2 主要分子生物学及生化试剂 | 第64-65页 |
| 1.3 方法 | 第65-68页 |
| 1.3.1 荔枝古树胚性愈伤组织GPX 基因cDNA 的克隆 | 第65页 |
| 1.3.2 荔枝古树愈伤组织总DNA的提取方法和浓度检测 | 第65页 |
| 1.3.3 荔枝古树胚性愈伤组织GPX基因cDNA的克隆 | 第65-67页 |
| 1.3.4 荔枝古树EC基因组DNA GPX基因全长PCR扩增 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-77页 |
| 2.1 荔枝古树EC 基因组总RNA 提取纯度与浓度检测 | 第68-69页 |
| 2.2 荔枝古树EC 基因组GPX cDNA 扩增 | 第69-70页 |
| 2.3 荔枝GPX 编码基因开放阅读框序列分析 | 第70-73页 |
| 2.3.1 荔枝GPX 编码基因开放阅读框核甘酸序列分析 | 第70页 |
| 2.3.2 荔枝GPX编码基因开放阅读框氨基酸序列分析 | 第70-73页 |
| 2.4 荔枝古树EC基因组DNA的提取质量 | 第73页 |
| 2.5 PCR 扩增反应程序建立和Taq 酶的筛选 | 第73-74页 |
| 2.6 荔枝GPX 编码基因内含子分析 | 第74-77页 |
| 3 讨论 | 第77-78页 |
| 3.1 PCR 反应条件的优化 | 第77-78页 |
| 3.2 GPX 基因在荔枝古树EC 离体保存中的作用 | 第78页 |
| 第三节 荔枝古树GPX基因的生物信息学分析 | 第78-91页 |
| 1 材料与方法 | 第79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-90页 |
| 2.1 荔枝古树GPX 编码蛋白质理化性质预测分析 | 第79-81页 |
| 2.2 荔枝古树GPX 蛋白的亲疏水特性 | 第81页 |
| 2.3 保守结构域与功能域分析 | 第81-82页 |
| 2.4 荔枝古树GPX 信号肽的预测和分析 | 第82-83页 |
| 2.5 亚细胞定位预测 | 第83页 |
| 2.6 荔枝古树GPX 蛋白的跨膜结构预测 | 第83-84页 |
| 2.7 荔枝古树GPX 蛋白质二级结构预测 | 第84-85页 |
| 2.8 磷酸化位点预测 | 第85-87页 |
| 2.9 模序(Motif)分析 | 第87-88页 |
| 2.10 荔枝古树GPX 三维结构的预测和分析 | 第88-89页 |
| 2.11 荔枝古树GPX 氨基酸序列的分子系统进化分析 | 第89-90页 |
| 3 讨论 | 第90-91页 |
| 第五章 荔枝古树EC离体保存中蛋白质组学研究 | 第91-116页 |
| 第一节 荔枝古树EC离体保存过程中蛋白质变化的双向电泳分析 | 第91-102页 |
| 1 材料与方法 | 第91-95页 |
| 1.1 供试材料 | 第91-92页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第92-93页 |
| 1.2.1 主要仪器设备 | 第92页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第92-93页 |
| 1.3 方法 | 第93-95页 |
| 1.3.1 蛋白质样品的提取 | 第93-94页 |
| 1.3.2 蛋白质样品的定量 | 第94页 |
| 1.3.3 荔枝EC 蛋白质样品双向电泳 | 第94页 |
| 1.3.4 电泳后检测 | 第94-95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-101页 |
| 2.1 离体保存过程中荔枝古树EC 的蛋白数目总体变化 | 第95-96页 |
| 2.2 常规离体保存过程中荔枝古树EC 的蛋白变化分析 | 第96页 |
| 2.3 不同保存方案下荔枝古树EC 保存30 d 的蛋白变化分析 | 第96-98页 |
| 2.4 荔枝古树EC 保存过程中凝胶上不同pI 范围蛋白点数目变化 | 第98-99页 |
| 2.5 荔枝古树EC 保存过程中凝胶上小于15KD 的蛋白点的变化 | 第99-101页 |
| 3 讨论 | 第101-102页 |
| 3.1 高分辨率固相pH 梯度凝胶双向电泳技术的应用 | 第101页 |
| 3.2 荔枝古树EC 在离体保存过程中的蛋白组分变化 | 第101-102页 |
| 3.3 离体保存过程中荔枝古树EC 的蛋白质变化与pI 分布的关系 | 第102页 |
| 第二节 荔枝古树EC 离体保存过程中相关蛋白的质谱鉴定 | 第102-116页 |
| 1 材料与方法 | 第102-103页 |
| 1.1 供试材料 | 第102页 |
| 1.2 试验仪器 | 第102页 |
| 1.3 荔枝古树EC 离体保存过程中特异蛋白的质谱鉴定 | 第102-103页 |
| 1.3.1 差异蛋白的胶内酶解 | 第102-103页 |
| 1.3.2 质谱分析与数据库检索 | 第103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-115页 |
| 2.1 荔枝古树离体保存过程EC 相关蛋白的质谱鉴定结果 | 第103-109页 |
| 2.2 荔枝古树离体保存过程EC 相关蛋白的功能分析 | 第109-115页 |
| 2.2.1 胁迫反应/氧化还原相关蛋白及其功能分析 | 第109-110页 |
| 2.2.2 蛋白质代谢与修复相关蛋白及其功能分析 | 第110-112页 |
| 2.2.3 核酸代谢相关蛋白及其功能分析 | 第112-113页 |
| 2.2.4 氨基酸代谢相关蛋白及其功能分析 | 第113页 |
| 2.2.5 脂类代谢相关蛋白及其功能分析 | 第113-114页 |
| 2.2.6 细胞组成与信号传导相关蛋白及其功能分析 | 第114页 |
| 2.2.7 能量和碳代谢相关蛋白及其功能分析 | 第114-115页 |
| 3 讨论 | 第115-116页 |
| 3.1 荔枝古树EC 在常规保存继代过程中相关蛋白的表达规律 | 第115页 |
| 3.2 最佳保存方案和常规保存下30 d 时荔枝古树EC 相关蛋白表达的差异 | 第115-116页 |
| 第六章 小结 | 第116-119页 |
| 参考文献 | 第119-130页 |
| 附录一 图版及图版说明 | 第130-184页 |
| 附录二 66份荔枝古树遗传资源的DNA纯度 | 第184-185页 |
| 附录三 荔枝古树GPX 基因的cDNA/DNA 全长序列登录 GenBank 信息及编码蛋白三级结构预测 | 第185-192页 |
| 附录四 荔枝古树EC离体保存过程中蛋白质的pI和MW | 第192-231页 |
| 在学期间发表论文 | 第231-232页 |
| 致谢 | 第232页 |
