| 致谢 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 RNAi 及其在植物研究中的应用 | 第10-16页 |
| 1.1.1 RNAi 技术 | 第10-12页 |
| 1.1.1.1 RNAi 的发现 | 第10页 |
| 1.1.1.2 RNAi 的分子机制 | 第10-11页 |
| 1.1.1.3 RNAi 的作用特点 | 第11-12页 |
| 1.1.2 RNAi 技术在植物上的应用 | 第12-14页 |
| 1.1.2.1 基因功能的研究 | 第12-13页 |
| 1.1.2.2 在植物品种改良上的应用 | 第13页 |
| 1.1.2.3 细胞信号传导通路的研究 | 第13页 |
| 1.1.2.4 在植物抗病毒上的应用 | 第13-14页 |
| 1.1.2.5 雄性不育材料的获得 | 第14页 |
| 1.1.3 植物中 RNAi 的研究方法 | 第14-15页 |
| 1.1.4 RNAi 技术存在的问题及展望 | 第15-16页 |
| 1.2 光敏色素研究进展 | 第16-23页 |
| 1.2.1 光敏色素的发现 | 第16-17页 |
| 1.2.2 光敏色素的结构 | 第17-18页 |
| 1.2.3 光敏色素的生理功能 | 第18-20页 |
| 1.2.3.1 细胞生长 | 第18-19页 |
| 1.2.3.2 调节酶 | 第19页 |
| 1.2.3.3 光周期反应 | 第19-20页 |
| 1.2.3.4 对基因表达的调控 | 第20页 |
| 1.2.3.5 对植物激素的影响 | 第20页 |
| 1.2.4 光敏色素的作用机制 | 第20-22页 |
| 1.2.4.1 光敏色素的作用方式 | 第20-21页 |
| 1.2.4.2 光敏色素的信号传导途径 | 第21-22页 |
| 1.2.5 结语 | 第22-23页 |
| 2 引言 | 第23-24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-33页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 3.1.2 试剂及载体 | 第24页 |
| 3.1.3 菌株及载体 | 第24页 |
| 3.1.4 仪器 | 第24页 |
| 3.1.5 引物合成 | 第24-25页 |
| 3.1.6 分析软件 | 第25页 |
| 3.1.7 培养基与实验中部分溶液的配置 | 第25页 |
| 3.1.7.1 培养基的配置 | 第25页 |
| 3.1.7.2 溶液的配置 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-33页 |
| 3.2.1 目的片段的选择和引物设计 | 第25-27页 |
| 3.2.1.1 目的片段的选择 | 第25-26页 |
| 3.2.1.2 引物设计结果 | 第26-27页 |
| 3.2.2 紫花苜蓿总 RNA 的提取 | 第27-28页 |
| 3.2.2.1 RNA 提取前的准备 | 第27页 |
| 3.2.2.2 RNA 的提取 | 第27-28页 |
| 3.2.2.3 提取 RNA 质量的检测 | 第28页 |
| 3.2.3 RT-PCR | 第28-29页 |
| 3.2.3.1 反转录反应 | 第28页 |
| 3.2.3.2 聚合酶链式反应（PCR） | 第28-29页 |
| 3.2.3.3 PCR 产物的检测 | 第29页 |
| 3.2.4 PCR 产物的克隆测序与序列分析 | 第29-30页 |
| 3.2.4.1 PCR 产物的纯化回收 | 第29页 |
| 3.2.4.2 连接反应 | 第29页 |
| 3.2.4.3 大肠杆菌转化 | 第29-30页 |
| 3.2.4.4 质粒提取、检测及测序 | 第30页 |
| 3.2.4.5 测序结果的分析比对 | 第30页 |
| 3.2.5 中间载体的构建及鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.5.1 phyAs 片段与载体pHANNIBAL 连接及鉴定 | 第30页 |
| 3.2.5.2 phyAa 片段与phyAs-pHAN 连接及鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.6 phyARNAi 表达载体的构建及鉴定 | 第31页 |
| 3.2.7 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第31-33页 |
| 4 结果与分析 | 第33-40页 |
| 4.1 紫花苜蓿总 RNA 的提取 | 第33页 |
| 4.2 RT-PCR 扩增产物 | 第33页 |
| 4.3 产物的克隆测序 | 第33-36页 |
| 4.3.1 质粒提取及 PCR 鉴定 | 第33-34页 |
| 4.3.2 测序结果及序列比对 | 第34-36页 |
| 4.4 中间载体的构建及鉴定 | 第36-38页 |
| 4.4.1 phyAs 片段与载体pHANNIBAL 连接及鉴定 | 第36-37页 |
| 4.4.2 phyAa 片段与 phyAs-pHAN 的连接及鉴定 | 第37-38页 |
| 4.5 phyARNAi 表达载体的构建及鉴定 | 第38-39页 |
| 4.6 农杆菌转化 | 第39-40页 |
| 5 讨论 | 第40-43页 |
| 5.1 影响提取RNA质量的因素 | 第40页 |
| 5.2 利用RNAi技术研究基因功能与其他方法相比的优点 | 第40-41页 |
| 5.3 RNAi效率的影响因素 | 第41页 |
| 5.4 dsRNA 导入植物体内的方法 | 第41-43页 |
| 6 结论与展望 | 第43-44页 |
| 6.1 结论 | 第43页 |
| 6.2 展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-54页 |
| 英文摘要 | 第54页 |
