目录 | 第3-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 钙调蛋白概述 | 第10-18页 |
1.1.1 钙调蛋白的氨基酸组成及其特征 | 第11-14页 |
1.1.2 钙调蛋白的生物功能 | 第14-18页 |
参考文献 | 第18-20页 |
第二章 钙离子诱导的钙调蛋白动力学和热动力学研究 | 第20-45页 |
2.1 研究背景 | 第20-21页 |
2.2 主要研究方法概述 | 第21-24页 |
2.2.1 圆二色谱(CD)技术 | 第21-22页 |
2.2.2 红外(FT-IR)技术 | 第22-23页 |
2.2.3 等温滴定量热(ITC)技术 | 第23-24页 |
2.3 实验部分 | 第24-29页 |
2.3.1 实验材料和药品 | 第24页 |
2.3.2 实验仪器 | 第24-25页 |
2.3.3 大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第25页 |
2.3.4 质粒转化 | 第25-26页 |
2.3.5 IPTG诱导CaM预表达 | 第26-27页 |
2.3.6 IPTG诱导CaM蛋白大量表达 | 第27-28页 |
2.3.7 CaM蛋白的提纯 | 第28页 |
2.3.8 蛋白浓度的测定 | 第28-29页 |
2.5 实验设计与方法 | 第29-32页 |
2.5.1 圆二色性测定CaM-Ca~(2+)相互作用 | 第29页 |
2.5.2 圆二色性测定CaM在GudnHCl诱导的钙调蛋白去折叠 | 第29-30页 |
2.5.3 FT-IR法测CaM在有无Ca~(2+)存在下的二级结构变化 | 第30-31页 |
2.5.4 FT-IR法测CaM在有无Ca~(2+)存在下的氢氘交换反应 | 第31页 |
2.5.5 等温滴定法研究CaM与Ca~(2+)的热动力学反应 | 第31-32页 |
2.6 结果与讨论 | 第32-42页 |
2.6.1 圆二色性测定CaM-Ca~(2+)相互作用 | 第32页 |
2.6.2 GudnHCl诱导的钙调蛋白去折叠 | 第32-33页 |
2.6.3 水溶液中钙调蛋白FT-IR | 第33-36页 |
2.6.4 钙调蛋白H-D交换 | 第36-40页 |
2.6.5 钙调蛋白的等温滴定 | 第40-42页 |
2.7 本章小结 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
第三章 钙离子浓度梯度对钙调蛋白构象的影响 | 第45-57页 |
3.1 引言 | 第45-46页 |
3.2 实验部分 | 第46-47页 |
3.2.1 实验材料及蛋白提取 | 第46-47页 |
3.2.2 样品准备 | 第47页 |
3.3 实验结果 | 第47-55页 |
3.4 结果讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-57页 |
第四章 对钙调蛋白与蛋白磷酸化酶作用的初步研究 | 第57-68页 |
4.1 钙调蛋白磷酸酶概述 | 第59-65页 |
4.1.1 蛋白磷酸化酶的结构组成 | 第60-61页 |
4.1.2 钙调蛋白磷酸酶的调节机制:受Ca~(2+)和CaM的调节 | 第61-63页 |
4.1.3 CN的提纯—基于Ni-NTA技术 | 第63-64页 |
4.1.4 自抑制域(AI)的提纯 | 第64-65页 |
4.2 实验结果 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-68页 |
论文发表情况 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |