摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
中英文缩写词表 | 第12-13页 |
第1章 前言 | 第13-16页 |
第2章 材料 | 第16-22页 |
2.1 细胞株 | 第16页 |
2.2 主要试剂与耗材 | 第16-17页 |
2.3 主要仪器与设备 | 第17-18页 |
2.4 主要实验试剂的配制 | 第18-22页 |
第3章 方法 | 第22-30页 |
3.1 细胞培养与实验分组 | 第22-23页 |
3.1.1 细胞传代 | 第22页 |
3.1.2 细胞冻存 | 第22-23页 |
3.1.3 细胞复苏 | 第23页 |
3.2 台盼蓝染色检测细胞活力 | 第23页 |
3.3 MTT 检测细胞增殖抑制率 | 第23-24页 |
3.4 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第24页 |
3.5 逆转录-多聚酶链式反应检测分析基因表达 | 第24-26页 |
3.5.1 各组细胞总 RNA 的提取 | 第24-25页 |
3.5.2 cDNA 的合成 | 第25页 |
3.5.3 PCR 扩增 Notch1、Hes1、Bcl-2 和内参β-actin | 第25-26页 |
3.6 免疫荧光染色技术检测 Notch1、Hes1 蛋白的表达 | 第26-27页 |
3.7 蛋白印迹法检测各组细胞蛋白水平的表达 | 第27-29页 |
3.7.1 提取细胞总蛋白 | 第27页 |
3.7.2 配制 SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳 | 第27-28页 |
3.7.3 转膜 | 第28页 |
3.7.4 免疫学检测 | 第28-29页 |
3.7.5 化学发光反应 | 第29页 |
3.8 统计学处理 | 第29-30页 |
第4章 结果 | 第30-35页 |
4.1 U87 细胞的形态学观察 | 第30页 |
4.2 Notch 信号的诱导情况,Notch1 受体及靶基因 Hes1 在 U87 细胞中的表达 | 第30-31页 |
4.3 rhNF-κB、DAPT 作用后对 U87 细胞活力的影响 | 第31页 |
4.4 MTT、流式细胞仪检测 rhNF-κB、DAPT 作用后对 U87 细胞增殖、凋亡 的影响 | 第31-33页 |
4.5 Notch 信号调控 U87 细胞增殖凋亡的机制 | 第33-35页 |
第5章 讨论 | 第35-41页 |
第6章 结论与展望 | 第41-42页 |
6.1 结论 | 第41页 |
6.2 展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附图 | 第47-50页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第50-51页 |
综述 | 第51-57页 |
参考文献 | 第55-57页 |