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长期高盐摄入诱导自发性高血压大鼠心肌自噬性空泡形成

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
中英文缩略语对照表第13-16页
前言第16-19页
    研究现状、成果第16-17页
    研究目的、方法第17-19页
材料和方法第19-44页
    1 动物实验第19-34页
        1.1 实验动物第19页
        1.2 主要试剂第19-20页
        1.3 溶液配制第20-23页
        1.4 主要仪器及耗材第23-24页
        1.5 动物分组第24页
        1.6 有创血流动力学检测第24-25页
        1.7 动物组织的取材与处理第25-27页
            1.7.1 取材与固定第25页
            1.7.2 透射电子显微镜检测第25页
            1.7.3 脱水、透明与浸蜡第25-26页
            1.7.4 包埋第26页
            1.7.5 载玻片的清洗与挂胶第26页
            1.7.6 切片第26-27页
        1.8 病理实验第27-30页
            1.8.1 WGA染色第27页
            1.8.2 HE染色第27-28页
            1.8.3 冰冻切片油红O染色第28页
            1.8.4 甲苯胺蓝染色第28页
            1.8.5 AB-PAS染色第28-29页
            1.8.6 Masson染色第29页
            1.8.7 病理图像分析第29-30页
        1.9 Western蛋白印迹分析心肌组织自噬相关蛋白及TonEBP表达水平第30-34页
            1.9.1 组织匀浆第30页
                1.9.1.1 物品准备第30页
                1.9.1.2 操作过程第30页
            1.9.2 BCA试剂盒测定蛋白浓度第30-31页
            1.9.3 变性(SDS)不连续凝胶电泳第31-32页
                1.9.3.1 制胶第31-32页
                1.9.3.2 上样第32页
                1.9.3.3 电泳第32页
            1.9.4 电转膜(半干法)第32-33页
            1.9.5 封闭第33页
            1.9.6 免疫反应第33页
            1.9.7 成像第33页
            1.9.8 Western blot结果分析第33-34页
    2 细胞实验第34-43页
        2.1 实验细胞第34页
        2.2 主要试剂及试剂盒第34页
        2.3 溶液配制第34-36页
        2.4 主要仪器及耗材第36页
        2.5 H9c2心肌细胞培养第36-37页
            2.5.1 H9c2心肌细胞传代第36-37页
            2.5.2 H9c2心肌细胞冻存第37页
            2.5.3 H9c2心肌细胞复苏第37页
        2.6 CoroNa Green测定细胞内Na~+第37页
        2.7 CCK-8实验检测NAC安全浓度第37-38页
        2.8 DCFH-DA探针检测H9c2心肌细胞内ROS产生水平第38页
        2.9 H9c2心肌细胞凋亡检测第38页
        2.10 荧光定量PCR法检测H9c2心肌细胞自噬相关基因Beclin1、LC3b、ATG9A、ATG16L1的mRNA表达情况第38-42页
            2.10.1 RNA提取第38-39页
            2.10.2 RNA定量及变性电泳第39-40页
            2.10.3 两步法逆转录合成cDNA第40页
            2.10.4 cDNA定量第40页
            2.10.5 荧光定量PCR法检测H9c2心肌细胞自噬相关基因Beclin1、Ⅱb、ATG9A、ATG16L1及内参β-Actin的mRNA表达情况第40-42页
                2.10.5.1 物品准备第40-41页
                2.10.5.2 操作流程第41-42页
        2.11 Western蛋白印迹检测H9c2心肌细胞自噬相关蛋白表达水平第42-43页
            2.11.1 H9c2心肌细胞蛋白提取第42-43页
            2.11.2 BCA试剂盒测定蛋白浓度及Western blot检测(同1.9.2~1.9.8)第43页
    3 统计学方法第43-44页
结果第44-62页
    1 高盐负荷诱导SHR心肌由代偿性肥厚向失代偿性肥厚转变第44-48页
    2 心肌组织空泡样结构病理学与分子生物学分析第48-53页
    3 高盐负荷诱导自噬的相关机制第53-62页
        3.1 长期高盐负荷导致间质高渗改变第53-54页
        3.2 细胞实验证实细胞内Na~+浓度随细胞外Na~+浓度增加而增加第54-55页
        3.3 细胞外Na~+浓度增加使凋亡和细胞自噬相关基因与蛋白水平上调第55-57页
        3.4 细胞外Na~+浓度增加诱导ROS依赖性的自噬上调第57-62页
讨论第62-68页
    1 高盐摄入与高血压性心脏病第62-64页
    2 高盐摄入加速诱导高血压性心脏病中细胞自噬第64-65页
    3 高盐摄入与氧化应激和细胞凋亡第65-66页
    4 氧化应激参与高盐摄入诱导自噬的关键环节第66-68页
局限性和研究展望第68-69页
结论第69-70页
参考文献第70-76页
发表论文和参加科研情况说明第76-77页
综述第77-93页
    综述参考文献第86-93页
致谢第93页

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