| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一部分 前言 | 第13-33页 |
| 1.1 植物对非生物逆境响应的特点 | 第13-15页 |
| 1.2 功能蛋白基因的作用 | 第15-18页 |
| 1.2.1 渗透压保护物质合成基因 | 第15-17页 |
| 1.2.1.1 无机离子 | 第15页 |
| 1.2.1.2 有机溶质 | 第15-17页 |
| 1.2.2 水通道蛋白基因 | 第17页 |
| 1.2.3 活性氧清除基因 | 第17-18页 |
| 1.2.4 晚期胚胎丰富蛋白基因 | 第18页 |
| 1.3 信号转导基因的作用 | 第18-22页 |
| 1.3.1 钙信号转导途径 | 第19-20页 |
| 1.3.2 MAPK参与的信号转导途径 | 第20-21页 |
| 1.3.3 SnRK参与的信号传导途径 | 第21-22页 |
| 1.4 与抗逆相关的转录因子基因 | 第22-26页 |
| 1.4.1 转录因子的结构 | 第22-23页 |
| 1.4.2 转录因子的分类与生物学功能 | 第23-24页 |
| 1.4.3 DERB1/CBF转录因子研究进展 | 第24-26页 |
| 1.5 拟南芥突变体的产生和筛选 | 第26-27页 |
| 1.5.1 拟南芥突变体的产生 | 第26-27页 |
| 1.5.2 拟南芥突变体的筛选 | 第27页 |
| 1.6 RNAi的研究进展 | 第27-31页 |
| 1.6.1 RNAi的原理 | 第28-29页 |
| 1.6.2 siRNA设计原则 | 第29-30页 |
| 1.6.2.1 以siRNA序列及其能量为依据的siRNA设计原则 | 第29页 |
| 1.6.2.2 靶mRNA的空间结构对siRNA沉默效率的影响 | 第29-30页 |
| 1.6.2.3 RISC对siRNA效率的影响 | 第30页 |
| 1.6.2.4 植物RNAi的设计原则 | 第30页 |
| 1.6.3 RNAi技术的应用 | 第30-31页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第33-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-35页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第33页 |
| 2.1.3 主要培养基和溶液 | 第33-35页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第35页 |
| 2.2. 实验方法 | 第35-43页 |
| 2.2.1 盐芥总RNA的提取及cDNA的合成 | 第35-36页 |
| 2.2.2 基因的克隆 | 第36页 |
| 2.2.3 RNAi结构的设计 | 第36-37页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳与目的片段的回收 | 第37页 |
| 2.2.5 基因片段的连接 | 第37页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒转化及提取 | 第37页 |
| 2.2.7 农杆菌感受态细胞的制备及质粒转化 | 第37-38页 |
| 2.2.8 拟南芥的转化 | 第38-39页 |
| 2.2.9 拟南芥种子消毒 | 第39页 |
| 2.2.10 转基因植株的筛选 | 第39页 |
| 2.2.11 突变体拟南芥的鉴定和纯系的获得 | 第39-40页 |
| 2.2.12 CTAB法提取植物基因组DNA | 第40页 |
| 2.2.13 Trizol法提取总RNA | 第40页 |
| 2.2.14 RNA反转录成cDNA和Real-Time RT-PCR | 第40-41页 |
| 2.2.15 不同胁迫条件下种子萌发率测定 | 第41页 |
| 2.2.16 不可胁迫条件下弯根实验 | 第41页 |
| 2.2.17 盐胁迫处理 | 第41-42页 |
| 2.2.18 数据处理 | 第42-43页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第43-68页 |
| 3.1 盐芥抗逆相关基因克隆、RNAi结构设计和植物表达载体的构建 | 第43-48页 |
| 3.1.1 盐芥胁迫相关基因的克隆 | 第43-44页 |
| 3.1.2 RNAi结构的设计 | 第44-45页 |
| 3.1.3 植物表达载体的构建 | 第45-48页 |
| 3.2 拟南芥中抗逆相关基因的表达分析 | 第48-49页 |
| 3.3 转基因拟南芥株系的筛选和突变体确定 | 第49-51页 |
| 3.3.1 转基因拟南芥株系的筛选 | 第49-50页 |
| 3.3.2 拟南芥突变体的鉴定与纯系的获得 | 第50-51页 |
| 3.4 拟南芥转基因植株和突变体植株表型及靶基因的表达量检测 | 第51-55页 |
| 3.4.1 转基因植株和突变体植株表型观察 | 第51-54页 |
| 3.4.2 转基因植株和突变体植株靶基因的表达量 | 第54-55页 |
| 3.5 CBF3、CDPK6、GolS2、P5CS2、SRK2C基因表达变化对拟南芥抗逆性影响 | 第55-68页 |
| 3.5.1 ABA处理对种子萌发率和幼苗生长的影响 | 第55-57页 |
| 3.5.2 不同NaCl浓度胁迫对拟南芥不同株系的影响 | 第57-63页 |
| 3.5.3 不同甘露醇浓度对拟南芥不同株系种子萌发率和幼苗生长的影响 | 第63-66页 |
| 3.5.4 不同H_2O_2浓度对不同株系种子萌发率及幼苗生长的影响 | 第66-68页 |
| 第四部分 讨论 | 第68-72页 |
| 4.1 靶基因的表达变化与拟南芥抗逆性的关系 | 第68-70页 |
| 4.2 拟南芥植株抗逆性降低有利于在适宜条件下的快速生长 | 第70页 |
| 4.3 RNAi结构对基因表达的影响 | 第70-71页 |
| 4.4 植物抗逆机制调节可通过多条途径进行 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第83页 |
