| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略语 | 第14-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-23页 |
| 1.1 髓系肿瘤 | 第16-18页 |
| 1.2 长链非编码RNA | 第18-20页 |
| 1.3 H19基因 | 第20-23页 |
| 第二章 研究目的、方案设计、意义 | 第23-25页 |
| 2.1 研究目的 | 第23页 |
| 2.2 研究方案设计 | 第23-24页 |
| 2.3 研究的意义 | 第24-25页 |
| 第三章 材料和方法 | 第25-38页 |
| 3.1 材料 | 第25-27页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第25页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
| 3.1.4 引物 | 第26-27页 |
| 3.2 方法 | 第27-38页 |
| 3.2.1 BMMNCs 分离 | 第27页 |
| 3.2.2 细胞总RNA和DNA提取 | 第27-28页 |
| 3.2.3 逆转录合成cDNA | 第28页 |
| 3.2.4 亚硫酸盐修饰基因组DNA | 第28-29页 |
| 3.2.5 RQ-PCR检测H19、ID2、miR-675 表达的水平 | 第29-31页 |
| 3.2.6 RQ-MSP检测H19甲基化水平 | 第31-32页 |
| 3.2.7 BSP检测H19甲基化密度 | 第32-33页 |
| 3.2.8 PCR产物纯化回收 | 第33页 |
| 3.2.9 重组载体构建 | 第33-34页 |
| 3.2.10 重组质粒转化 | 第34页 |
| 3.2.11 重组质粒提取 | 第34-35页 |
| 3.2.12 质粒鉴定、测序 | 第35页 |
| 3.2.13 阳性模板建立 | 第35页 |
| 3.2.14 细胞遗传学检查 | 第35页 |
| 3.2.15 基因突变及融合基因检测 | 第35页 |
| 3.2.16 生物信息数据分析 | 第35-36页 |
| 3.2.17 细胞培养 | 第36页 |
| 3.2.18 siRNA干扰实验 | 第36页 |
| 3.2.19 半数抑制浓度（IC50）检测 | 第36-37页 |
| 3.2.20 细胞计数法检测细胞增殖 | 第37页 |
| 3.2.21 Annexin V-PE/7-AAD方法检测细胞凋亡 | 第37页 |
| 3.2.22 统计学处理 | 第37-38页 |
| 第四章 结果 | 第38-72页 |
| 4.1 AML中H19表达、甲基化及其临床意义 | 第38-54页 |
| 4.1.1 对照组和AML患者中H19表达 | 第38页 |
| 4.1.2 H19表达具有鉴别意义 | 第38-39页 |
| 4.1.3 H19表达与AML患者的临床及实验室参数相关性 | 第39-40页 |
| 4.1.4 H19表达与AML患者预后的关系 | 第40-45页 |
| 4.1.5 H19表达与AML患者疾病缓解和复发的随访分析 | 第45-46页 |
| 4.1.6 AML患者中H19甲基化情况 | 第46-47页 |
| 4.1.7 AML细胞株及临床样本中H19表达和甲基化的相关性 | 第47-49页 |
| 4.1.8 miR-675 在AML中的表达情况及临床意义 | 第49-54页 |
| 4.1.8.1 对照组和AML中miR-675 的表达水平 | 第49-50页 |
| 4.1.8.2 miR-675 表达水平可判别AML与正常对照 | 第50页 |
| 4.1.8.3 miR-675 表达与AML患者实验室及临床参数相关性 | 第50-52页 |
| 4.1.8.4 miR-675 表达与AML患者预后的关系 | 第52-53页 |
| 4.1.8.5 AML患者中miR-675 表达与H19表达的相关性 | 第53-54页 |
| 4.1.8.6 去甲基化药物 5-aza-dC对细胞中miR-675 表达的影响 | 第54页 |
| 4.2 CML中H19表达、甲基化及临床意义 | 第54-60页 |
| 4.2.1 CML患者中H19表达水平 | 第54-55页 |
| 4.2.2 H19表达可用于判别CML和正常对照 | 第55-56页 |
| 4.2.3 H19表达与CML患者临床及实验室参数的相关性 | 第56页 |
| 4.2.4 同一CML患者不同临床分期H19表达情况 | 第56-57页 |
| 4.2.5 H19表达与CML患者疾病缓解的随访分析 | 第57-58页 |
| 4.2.6 CML患者中H19甲基化情况 | 第58-59页 |
| 4.2.7 CML细胞株及临床样本中H19表达和甲基化的相关性 | 第59-60页 |
| 4.3 MDS中H19表达、甲基化及其临床意义 | 第60-64页 |
| 4.3.1 MDS患者中H19表达水平 | 第60-61页 |
| 4.3.2 H19表达可用于判别MDS和正常对照 | 第61页 |
| 4.3.3 H19表达与MDS患者临床及实验室参数的相关性 | 第61-62页 |
| 4.3.4 H19表达与MDS患者预后的关系 | 第62-63页 |
| 4.3.5 MDS患者中H19甲基化态势及其与H19表达的相关性 | 第63-64页 |
| 4.4 H19体外生物学功能研究 | 第64-72页 |
| 4.4.1 H19干预细胞株的构建及干扰效率检测 | 第64-65页 |
| 4.4.2 H19干预对细胞增殖能力的影响 | 第65-66页 |
| 4.4.3 H19干预对细胞凋亡率的影响 | 第66-67页 |
| 4.4.4 H19干预对去甲基化药物反应性的影响 | 第67页 |
| 4.4.5 H19靶基因的筛选 | 第67-72页 |
| 第五章 讨论 | 第72-76页 |
| 第六章 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第92-93页 |
