| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表及其英汉对照 | 第11-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 分子进化及代谢途径进化的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 生物大分子的进化 | 第12-13页 |
| 1.1.2 分子系统发育 | 第13-14页 |
| 1.1.3 代谢途径的进化研究 | 第14-15页 |
| 1.2 异黄酮及其生物合成途径的研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 大豆异黄酮的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.2 异黄酮生物合成途径 | 第17-19页 |
| 1.2.3 基因工程调控异黄酮合成途径关键酶 | 第19-20页 |
| 1.2.4 异黄酮合成途径关键酶的互作研究 | 第20页 |
| 1.3 调控异黄酮合成的转录因子的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3.1 引入外源转录因子调控异黄酮合成 | 第21页 |
| 1.3.2 发现调控大豆异黄酮合成的内源转录因子 | 第21-22页 |
| 1.4 本研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 第2章 大豆异黄酮合成途径酶的进化分析及互作研究 | 第24-36页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第25-27页 |
| 2.2.1 参数计算和正选择分析 | 第25页 |
| 2.2.2 序列克隆及AD、BD载体的构建 | 第25-27页 |
| 2.2.3 蛋白互作预测 | 第27页 |
| 2.2.4 酵母双杂交法验证蛋白的相互作用 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.3.1 比较上下游基因的π,d_N和d_S | 第28-30页 |
| 2.3.2 编码分支位点酶的基因拷贝的差异进化模式 | 第30页 |
| 2.3.3 正选择的检测 | 第30-31页 |
| 2.3.4 蛋白互作预测 | 第31页 |
| 2.3.5 目的基因的克隆及AD、BD载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.6 酵母双杂交法验证蛋白的相互作用 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-36页 |
| 第3章 转录因子GmMYB184的筛选与克隆 | 第36-44页 |
| 3.1 实验材料、试剂与仪器设备 | 第36页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第36页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第36-39页 |
| 3.2.1 目的基因克隆及产物回收 | 第36-37页 |
| 3.2.2 pMD19-Tsimple载体与目的基因连接及转化大肠杆菌感受态 | 第37-39页 |
| 3.2.3 提取质粒 | 第39页 |
| 3.2.4 目的基因序列分析 | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-42页 |
| 3.3.1 GmMYB184全长序列的获取 | 第39-40页 |
| 3.3.2 基因序列的分析 | 第40-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第4章 GmMYB184功能的初步验证 | 第44-58页 |
| 4.1 实验材料、试剂与仪器设备 | 第44-45页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第44页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第44页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第44-45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-50页 |
| 4.2.1 不同组织中表达模式分析 | 第45-46页 |
| 4.2.2 亚细胞定位 | 第46页 |
| 4.2.3 谷胱甘肽诱导目标基因 | 第46-47页 |
| 4.2.4 构建双荧光素酶报告系统 | 第47-48页 |
| 4.2.5 农杆菌介导的大豆毛状根转化系统的构建及遗传转化 | 第48-50页 |
| 4.3 结果与分析 | 第50-56页 |
| 4.3.1 组织表达分析 | 第50-52页 |
| 4.3.2 谷胱甘肽诱导表达分析 | 第52-53页 |
| 4.3.3 亚细胞定位 | 第53-54页 |
| 4.3.4 GmMYB184对CHS8和IFS2的启动子激活活性分析 | 第54页 |
| 4.3.5 在大豆毛状根中过表达和干扰MYB184对异黄酮积累的影响 | 第54-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-58页 |
| 全文结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录 | 第68-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
