| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第9-15页 |
| 1.1 丝氨酸蛋白酶简述 | 第9页 |
| 1.2 丝氨酸蛋白酶的分类 | 第9页 |
| 1.3 丝氨酸蛋白酶的作用 | 第9-10页 |
| 1.4 昆虫中丝氨酸蛋白酶的研究现状 | 第10-12页 |
| 1.4.1 家蚕丝氨酸蛋白酶级联研究 | 第10页 |
| 1.4.2 烟草天蛾丝氨酸蛋白酶研究 | 第10-11页 |
| 1.4.3 果蝇丝氨酸蛋白酶研究 | 第11-12页 |
| 1.5 昆虫免疫系统 | 第12-13页 |
| 1.5.1 酚氧化酶(PO)级联介导的昆虫黑化反应 | 第12-13页 |
| 1.5.2 抗菌肽诱导合成表达的相关信号通路 | 第13页 |
| 1.6 丝氨酸蛋白酶在昆虫免疫中的作用 | 第13-15页 |
| 1.6.1 丝氨酸蛋白酶在补体系统中的作用 | 第13页 |
| 1.6.2 丝氨酸蛋白酶在酚氧化酶原激活系统中的作用 | 第13页 |
| 1.6.3 丝氨酸蛋白酶在凝血系统中的作用 | 第13-14页 |
| 1.6.4 丝氨酸蛋白酶抗菌肽合成过程中的作用 | 第14-15页 |
| 2 引言 | 第15-17页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第15页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第15-16页 |
| 2.2.1 柞蚕ApHP6的原核表达及多克隆抗体制备 | 第15页 |
| 2.2.2 柞蚕ApHP6组织表达分布 | 第15页 |
| 2.2.3 柞蚕ApHP6在血细胞和血淋巴中的诱导表达模式 | 第15-16页 |
| 2.2.4 ApHP6蛋白对柞蚕血淋巴proPO激活及PO活性的影响 | 第16页 |
| 2.2.5 ApHP6蛋白对细菌诱导的AMPs表达的影响 | 第16页 |
| 2.2.6 ApHP6的RNA干扰对AMPs表达的影响 | 第16页 |
| 2.3 技术路线 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-30页 |
| 3.1 实验材料 | 第17页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第17-19页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第17页 |
| 3.2.2 主要生化试剂 | 第17-18页 |
| 3.2.3 主要溶液的配置 | 第18-19页 |
| 3.3 实验方法 | 第19-30页 |
| 3.3.1 柞蚕饲养 | 第19-20页 |
| 3.3.2 柞蚕总RNA的提取 | 第20页 |
| 3.3.3 提取总RNA质量的检测 | 第20页 |
| 3.3.4 柞蚕ApHP6基因的克隆 | 第20-23页 |
| 3.3.5 柞蚕ApHP6基因的原核表达 | 第23-25页 |
| 3.3.6 重组蛋白的检测 | 第25-26页 |
| 3.3.7 重组蛋白的纯化及多克隆抗体制备 | 第26-27页 |
| 3.3.8 实时定量PCR | 第27-28页 |
| 3.3.9 组织中总蛋白的提取 | 第28页 |
| 3.3.10 组织表达分布 | 第28页 |
| 3.3.11 免疫刺激对ApHP6表达的影响 | 第28页 |
| 3.3.12 ApHP6蛋白对proPO激活及PO活性的影响 | 第28-29页 |
| 3.3.13 ApHP6蛋白对细菌诱导的AMPs和proPO表达的影响 | 第29页 |
| 3.3.14 ApHP6的RNA干扰对AMPs和proPO表达的影响 | 第29页 |
| 3.3.15 数据分析 | 第29-30页 |
| 4 结果与分析 | 第30-41页 |
| 4.1 柞蚕ApHP6基因的序列分析 | 第30页 |
| 4.2 柞蚕ApHP6基因的克隆 | 第30-32页 |
| 4.3 柞蚕ApHP6重组表达载体的双酶切鉴定 | 第32页 |
| 4.4 柞蚕ApHP6蛋白表达的SDS-PAGE和Western Blot分析 | 第32-34页 |
| 4.5 柞蚕ApHP6蛋白纯化 | 第34页 |
| 4.6 柞蚕ApHP6组织表达分布 | 第34-35页 |
| 4.7 柞蚕ApHP6在血细胞和血淋巴中的诱导表达模式 | 第35-37页 |
| 4.8 ApHP6蛋白对柞蚕血淋巴proPO激活及PO活性的影响 | 第37-39页 |
| 4.9 ApHP6蛋白对细菌诱导的AMPs表达的影响 | 第39-40页 |
| 4.10 ApHP6的RNA干扰对AMPs表达的影响 | 第40-41页 |
| 5 讨论 | 第41-43页 |
| 6 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 个人简介 | 第50-51页 |
| 在研期间发表论文 | 第51页 |
