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沉默NOL3基因对前列腺癌细胞浸润性发展及凋亡分子机制的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
中英文缩略词表第9-10页
第1章 引言第10-13页
第2章 材料和方法第13-38页
    2.1 实验材料第13页
        2.1.1 组织标本第13页
        2.1.2 细胞来源第13页
    2.2 主要仪器和试剂第13-16页
        2.2.1 主要仪器第13-14页
        2.2.2 主要试剂第14-15页
        2.2.3 试剂配置第15-16页
    2.3 实验方法第16-26页
        2.3.1 前列腺癌组织中基因表达差异性检测第16页
        2.3.2 PCa/BPH的鉴定及分离第16-18页
        2.3.3 Rt2 Profiler PCR Array检测前列腺癌信号通路基因的差异性表达第18-21页
        2.3.4 q RT-PCR检测PCa与BPH组织中关联基因的表达差异第21-26页
    2.4 靶向沉默NOL3基因对前列腺肿瘤细胞的影响第26-37页
        2.4.1 细胞培养第26-28页
        2.4.2 细胞转染第28-30页
        2.4.3 转染 48h后,q RT-PCR检测前列腺癌细胞NOL3的m RNA表达第30-33页
        2.4.4 转染 48h后,western blot检测NOL3的蛋白表达第33-35页
        2.4.5 MTT检测细胞生长增殖情况第35-36页
        2.4.6 Transwell检测细胞侵袭力的改变第36页
        2.4.7 caspase-8/9 荧光检测试剂盒检测caspsase-8/9 蛋白的表达情况第36-37页
        2.4.8 流式细胞仪检测前列腺肿瘤细胞凋亡情况第37页
    2.5 统计方法第37-38页
第3章 结果第38-50页
    3.1 Rt2 Profiler PCR Array检测前列腺癌信号通路基因差异性表达第38-45页
        3.1.1 荧光定量PCR扩增结果第38-41页
        3.1.2 PCR Array数据分析第41-44页
        3.1.3 GNCPro分析软件模拟12个兴趣基因交互关系第44-45页
    3.2 9个关联基因在前列腺癌及良性前列腺增生组织中的表达量第45-46页
    3.3 靶向沉默NOL3基因对PCa细胞株的影响第46-50页
        3.3.1 慢病毒转染效率第46页
        3.3.2 PL/sh RNA/GFP-homo-NOL3转染后抑制前列腺癌PC3和DU145细胞中NOL3的表达第46-47页
        3.3.3 PL/sh RNA/GFP-homo-NOL3转染后抑制前列腺癌PC3和DU145细胞中NOL3蛋白的表达第47-48页
        3.3.4 下调NOL3的表达可抑制前列腺癌PC3和DU145细胞的增殖第48页
        3.3.5 抑制NOL3的表达可降低前列腺癌PC3和DU145细胞的侵袭力第48页
        3.3.6 抑制NOL3的表达可提高Caspase-8 及Caspase-9 的活化程度 ..39第48-49页
        3.3.7 抑制NOL3的表达可促进前列腺癌PC3和DU145细胞发生凋亡第49-50页
第4章 讨论第50-53页
第5章 结论与展望第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-58页
附图第58-62页
综述 Caspase调控细胞凋亡的机制研究第62-68页
    参考文献第66-68页

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