| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪言 | 第13-22页 |
| 1.1 宫颈癌 | 第13-14页 |
| 1.2 HPV与宫颈癌的关系 | 第14-15页 |
| 1.3 宫颈癌对顺铂(Cisplatin,CDDP)的抗药性是临床的突出问题 | 第15页 |
| 1.4 CDC25(cell division cycle 25)对细胞周期调控的重要作用,其pre-mRNA存在选择性剪接 | 第15-22页 |
| 1.4.1 CDC25B(cell division cycle 25B)概述 | 第17-19页 |
| 1.4.2 CDC25C(cell division cycle 25C)概述 | 第19-22页 |
| 第二章 实验方法及结果 | 第22-53页 |
| 2.1 材料和方法 | 第22-37页 |
| 2.1.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1.1 研究对象 | 第22页 |
| 2.1.1.2 主要药品试剂和仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第23-37页 |
| 2.1.2.1 细胞培养：复苏、传代、冻存与计数 | 第23-25页 |
| 2.1.2.1.1 细胞的复苏 | 第23-24页 |
| 2.1.2.1.2 细胞的传代培养 | 第24页 |
| 2.1.2.1.3 细胞冻存 | 第24-25页 |
| 2.1.2.1.4 细胞计数 | 第25页 |
| 2.1.2.2 支原体检测 | 第25-27页 |
| 2.1.2.2.1 检测支原体的目的 | 第25页 |
| 2.1.2.2.2 检测支原体的原理 | 第25页 |
| 2.1.2.2.3 检测支原体的方法 | 第25-27页 |
| 2.1.2.3 样品总RNA抽提与质检 | 第27-29页 |
| 2.1.2.3.1 样品总RNA的抽提方法 | 第27-28页 |
| 2.1.2.3.2 总RNA质检 | 第28-29页 |
| 2.1.2.4 MTT法测定宫颈癌SiHa,C33A细胞的CDDP半致死量浓度 | 第29页 |
| 2.1.2.5 逆转录PCR筛选CDC25B和CDC25C的mRNA的选择性剪接体 | 第29-32页 |
| 2.1.2.5.1 逆转录(Reverse Transcr iption,RT)合成cDNA | 第29-30页 |
| 2.1.2.5.2 引物设计 | 第30-31页 |
| 2.1.2.5.3 PCR | 第31-32页 |
| 2.1.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| 2.1.2.7 琼脂糖凝胶电泳胶回收 | 第32页 |
| 2.1.2.8 酶切 | 第32页 |
| 2.1.2.9 质粒提取 | 第32-34页 |
| 2.1.2.9.1 感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| 2.1.2.9.2 质粒转化 | 第33页 |
| 2.1.2.9.3 质粒的小量抽提 | 第33-34页 |
| 2.1.2.10 质粒瞬转 | 第34-35页 |
| 2.1.2.11 蛋白免疫印迹分析 | 第35-36页 |
| 2.1.2.12 免疫荧光 | 第36-37页 |
| 2.2 统计学方法 | 第37-38页 |
| 2.3 结果 | 第38-53页 |
| 2.3.1 MTT法确定的顺铂半致死量浓度 | 第38-40页 |
| 2.3.2 RT-PCR筛选剪接体 | 第40-44页 |
| 2.3.3 Timecourse确定细胞处理时间 | 第44页 |
| 2.3.4 转染荧光成像图 | 第44-46页 |
| 2.3.5 Western blotting | 第46-47页 |
| 2.3.6 基因上调后细胞的半致死量浓度测定 | 第47-53页 |
| 第三章 讨论 | 第53-57页 |
| 第四章 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-73页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第73页 |
