摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
中英缩略词表 | 第11-12页 |
第1章 引言 | 第12-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-32页 |
2.0 实验所用细胞 | 第14-15页 |
2.0.1 实验动物 | 第14页 |
2.0.2 主要实验试剂和耗材 | 第14-15页 |
2.1 主要仪器 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-31页 |
2.2.1 实验器材的准备 | 第16-17页 |
2.2.2 相关液体配制 | 第17-20页 |
2.2.3 心肌细胞的提取及培养 | 第20-22页 |
2.2.4 MTT检测细胞存活率 | 第22页 |
2.2.5 DCF-DA染料检测细胞质内ROS | 第22-23页 |
2.2.6 Mitosox Red染料检测线粒体ROS | 第23页 |
2.2.7 HET染料检测细胞质内ROS | 第23-24页 |
2.2.8 罗丹明123检测细胞线粒体膜电位变化 | 第24页 |
2.2.9 心肌细胞NOX活性检测 | 第24页 |
2.2.10 氧耗量检测 | 第24-25页 |
2.2.11 心肌细胞总RNA提取 | 第25-27页 |
2.2.12 TUNAL染色 | 第27-28页 |
2.2.13 Western blot检测各组GAPDH、LC3蛋白的表达 | 第28-31页 |
2.3 统计学分析 | 第31-32页 |
第3章 结果 | 第32-47页 |
3.1 心肌细胞的生长特点 | 第32页 |
3.2 Hcy+Cu对心肌细胞存活率的影响 | 第32-34页 |
3.3 Hcy+Cu对心肌细胞形态的改变 | 第34页 |
3.4 Hcy+Cu对心肌细胞线粒体膜电位的影响 | 第34-40页 |
3.5 Hcy+Cu造成线粒体ROS大量生产,对细胞质内ROS无明显影响 | 第40-42页 |
3.6 NOX不参与生成ROS,NOX抑制剂不能阻止Hcy和Cu处理后的细胞死亡,反而增加死亡 | 第42-43页 |
3.7 氧耗量实验结果 | 第43-44页 |
3.8 qRT-PCR检测相关基因的表达 | 第44-45页 |
3.8.1 qRT-PCR检测基因SCO2mRNA表达水平 | 第44页 |
3.8.2 qRT-PCR检测基因p53mRNA表达水平 | 第44-45页 |
3.9 TUNEL染色实验结果 | 第45页 |
3.10 western blot检测心肌细胞LC3蛋白表达结果 | 第45-47页 |
第4章 讨论 | 第47-51页 |
第5章 结论与展望 | 第51-52页 |
5.1 结论 | 第51页 |
5.2 展望与不足 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
综述 同型半胱氨酸、铜与心血管疾病 | 第56-61页 |
参考文献 | 第60-61页 |