摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 绪论 | 第9-22页 |
一、研究的宿主与病原菌简介 | 第9-12页 |
1.1 Caco-2人类肠道上皮细胞 | 第9页 |
1.2 沙门氏菌简介 | 第9-11页 |
1.3 沙门氏菌与相关疾病 | 第11-12页 |
二、肠道上皮细胞铁吸收转运体系研究进展 | 第12-14页 |
2.1 肠上皮细胞铁吸收转运体系的组成 | 第12-13页 |
2.2 肠道在天然免疫中的地位 | 第13页 |
2.3 肠上皮细胞铁吸收转运体系相关基因的表达受铁含量水平的调控 | 第13-14页 |
三、铁在天然免疫和细菌侵染中的重要性 | 第14-22页 |
3.1 天然免疫中铁的作用 | 第14-16页 |
3.2 细菌侵染中铁的重要性 | 第16-17页 |
3.3 病原菌获得铁的方式 | 第17-19页 |
3.3.1 胞外菌 | 第17页 |
3.3.2 胞内菌 | 第17-19页 |
3.3.3 真菌 | 第19页 |
3.4 铁的新陈代谢与铁蛋白的作用 | 第19-22页 |
3.4.1 铁输出蛋白 | 第19-20页 |
3.4.2 铁调素 | 第20页 |
3.4.3 转铁蛋白受体 | 第20页 |
3.4.4 Toll-like receptors | 第20-22页 |
第二章 实验材料和方法 | 第22-35页 |
一、实验仪器、试剂、培养基 | 第22-25页 |
1.1 主要仪器 | 第22页 |
1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
1.3 主要试剂盒 | 第23页 |
1.4 主要培养基及配制方法 | 第23页 |
1.5 常用溶液的配制 | 第23-25页 |
二、实验材料 | 第25页 |
2.1 实验所用到的细胞 | 第25页 |
2.2 实验菌株 | 第25页 |
2.3 实验器具 | 第25页 |
三、实验方法 | 第25-35页 |
3.1 细胞复苏 | 第25页 |
3.2 细胞培养 | 第25-26页 |
3.3 细胞消化 | 第26页 |
3.4 细胞冻存 | 第26页 |
3.5 siRNA沉默 | 第26-28页 |
3.6 细胞稳定转染 | 第28页 |
3.7 MOI的选取方法 | 第28-29页 |
3.8 细菌CFU | 第29页 |
3.9 细菌OD值的测定 | 第29页 |
3.10 细胞以及细菌计数 | 第29-30页 |
3.11 细胞MTT测定 | 第30页 |
3.12 细胞侵染 | 第30-31页 |
3.13 细胞RNA提取 | 第31页 |
3.14 反转录cDNA的合成 | 第31-32页 |
3.15 定量QPCR | 第32-34页 |
3.16 细胞基因组提取 | 第34-35页 |
第三章 实验结果 | 第35-46页 |
一、胞内病原菌沙门氏菌可以激活Caco-2肠上皮细胞铁吸收转运体系 | 第35-37页 |
二、胞外病原菌铜绿假单胞菌不能激活Caco-2肠上皮细胞铁吸收转运体系 | 第37-40页 |
三、siRNA干扰Caco-2肠上皮细胞铁吸收转运体系的相关基因 | 第40-41页 |
四、Ftn、Fpn1限制Caco-2细胞中沙门氏菌的增殖 | 第41-43页 |
五、肠上皮细胞铁吸收转运体系在沙门氏菌侵染Caco-2细胞中发挥重要作用 | 第43-46页 |
第四章 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |