| 摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-36页 |
| 1 人角膜内皮和人角膜内皮细胞 | 第18-21页 |
| 1.1 人角膜内皮的结构与功能 | 第18-20页 |
| 1.2 人角膜内皮细胞独有的形态特征 | 第20-21页 |
| 2 人角膜内皮细胞的增殖能力及其影响因素 | 第21-31页 |
| 2.1 人角膜内皮细胞的增殖能力 | 第21-24页 |
| 2.1.1 细胞周期 | 第21-23页 |
| 2.1.2 人角膜内皮细胞的增殖特性 | 第23-24页 |
| 2.1.2.1 增殖能力的年龄相关性 | 第23-24页 |
| 2.1.2.2 增殖能力的区域相关性 | 第24页 |
| 2.2 接触抑制对人角膜内皮细胞增殖能力的抑制作用 | 第24-25页 |
| 2.3 TGF-β2对人角膜内皮细胞增殖能力的抑制作用 | 第25-29页 |
| 2.3.1 TGF-β的信号传导通路 | 第26-27页 |
| 2.3.2 TGF-β2对人角膜内皮细胞的影响作用 | 第27-29页 |
| 2.4 生长因子对人角膜内皮细胞增殖能力的影响 | 第29页 |
| 2.5 DNA氧化损伤对人角膜内皮细胞增殖能力的影响 | 第29-31页 |
| 3 刺激人角膜内皮细胞增殖的研究进展 | 第31-33页 |
| 3.1 解除接触抑制对人角膜内皮细胞增殖的激活研究 | 第31页 |
| 3.2 持续的生长因子刺激对人角膜内皮细胞增殖的激活研究 | 第31页 |
| 3.3 解除G1期抑制对人角膜内皮细胞增殖的激活研究 | 第31-32页 |
| 3.4 其他因素对人角膜内皮细胞增殖的激活研究 | 第32-33页 |
| 3.4.1 细胞外基质 | 第32-33页 |
| 3.4.2 ROCK抑制剂 | 第33页 |
| 4 人角膜内皮细胞的光损伤及其抗氧化保护剂 | 第33-35页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 解除细胞接触抑制对人角膜内皮细胞体外增殖能力的影响作用研究 | 第36-67页 |
| 1 实验材料与用品 | 第36-41页 |
| 1.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 1.2 实验仪器 | 第37-38页 |
| 1.3 实验药品及试剂 | 第38-39页 |
| 1.4 几种主要溶液的配方 | 第39-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-46页 |
| 2.1 细胞接触抑制对人角膜内皮细胞增殖的影响作用研究 | 第41-42页 |
| 2.1.1 人角膜内皮细胞的体外培养及其接触抑制模型的建立 | 第41页 |
| 2.1.2 人角膜内皮细胞增殖能力的EdU渗入检测 | 第41-42页 |
| 2.2 EDTA解除接触抑制对HCE细胞的影响作用研究 | 第42-43页 |
| 2.2.1 EDTA处理人角膜内皮细胞形态影响作用的光镜检测 | 第42页 |
| 2.2.2 EDTA处理人角膜内皮细胞增殖能力的EdU渗入检测 | 第42页 |
| 2.2.3 EDTA处理人角膜内皮细胞中骨架蛋白表达的免疫荧光检测 | 第42-43页 |
| 2.3.4 EDTA处理人角膜内皮细胞中功能蛋白表达的免疫荧光检测 | 第43页 |
| 2.3 Y-27632对EDTA处理人角膜内皮细胞的影响作用研究 | 第43-44页 |
| 2.3.1 Y-27632处理人角膜内皮细胞的贴壁能力的光镜检测 | 第43页 |
| 2.3.2 Y-27632处理人角膜内皮细胞的生长曲线测定 | 第43-44页 |
| 2.3.3 Y-27632对EDTA处理人角膜内皮细胞形态影响作用的光镜检测 | 第44页 |
| 2.3.4 Y-27632对EDTA处理人角膜内皮细胞增殖活性影响作用的EdU渗入检测 | 第44页 |
| 2.3.5 Y-27632对EDTA处理人角膜内皮细胞骨架蛋白表达影响作用的免疫荧光检测 | 第44页 |
| 2.3.6 Y-27632对EDTA处理人角膜内皮细胞功能蛋白表达影响作用的免疫荧光检测 | 第44页 |
| 2.4 接触抑制人角膜内皮细胞中ROCK1及CKI的Western blot检测 | 第44-46页 |
| 3 实验结果 | 第46-63页 |
| 3.1 接触抑制对人角膜内皮细胞增殖的影响作用 | 第46-47页 |
| 3.2 EDTA对接触抑制的人角膜内皮细胞的影响作用 | 第47-53页 |
| 3.2.1 EDTA对人角膜内皮细胞形态及生长的影响 | 第47-49页 |
| 3.2.2 EDTA对人角膜内皮细胞骨架的影响 | 第49-51页 |
| 3.2.3 EDTA对人角膜内皮细胞增殖能力的影响 | 第51-53页 |
| 3.3 Y-27632对EDTA处理人角膜内皮细胞的影响作用 | 第53-61页 |
| 3.3.1 Y-27632对人角膜内皮细胞贴壁能力的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.2 Y-27632对人角膜内皮细胞生长曲线的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.3 Y-27632对EDTA处理的人角膜内皮细胞形态的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.4 Y-27632对EDTA处理的人角膜内皮细胞增殖能力的影响 | 第56-58页 |
| 3.3.5 Y-27632对EDTA处理的人角膜内皮细胞骨架的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.6 Y-27632对EDTA处理的人角膜内皮细胞功能蛋白表达的影响 | 第59-61页 |
| 3.4 Y-27632及EDTA对人角膜内皮细胞中ROCK1和CKI表达的影响作用 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 第三章 TGF-B2对人角膜内皮细胞体外增殖能力的影响作用及其分子机理研究 | 第67-81页 |
| 1 实验材料与用品 | 第67-68页 |
| 1.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 1.2 实验仪器 | 第68页 |
| 1.3 实验药品及试剂 | 第68页 |
| 1.4 几种主要溶液的配方 | 第68页 |
| 2 实验方法 | 第68-70页 |
| 2.1 TGF-β2对人角膜内皮细胞增殖的影响作用研究 | 第68-69页 |
| 2.1.1 TGF-β2处理人角膜内皮细胞活力的MTT法检测 | 第68-69页 |
| 2.1.2 TGF-β2处理人角膜内皮细胞增殖能力的EdU渗入检测 | 第69页 |
| 2.2 TGF-β2调控HCE细胞增殖的信号通路研究 | 第69-70页 |
| 2.2.1 TGF-β2抑制剂处理人角膜内皮细胞增殖能力的EdU渗入检测 | 第69页 |
| 2.2.2 TGF-β2抑制剂处理人角膜内皮细胞的Smad信号通路蛋白及CKI表达的Westernblot检测 | 第69-70页 |
| 3 实验结果 | 第70-78页 |
| 3.1 TGF-β2对人角膜内皮细胞增殖活性的影响作用 | 第70-71页 |
| 3.2 Smad信号通路在TGF-β2调控人角膜内细胞增殖中的作用 | 第71-78页 |
| 3.2.1 TGF-β2及其信号通路抑制剂对人角膜内皮细胞增殖能力的影响作用 | 第71-75页 |
| 3.2.2 TGF-β2和SB431542对Smad信号通路蛋白及CKI表达的影响作用 | 第75-78页 |
| 4 讨论 | 第78-80页 |
| 5 结论 | 第80-81页 |
| 第四章 人角膜内皮细胞氧化损伤的保护 | 第81-104页 |
| 1 实验材料与用品 | 第81-83页 |
| 1.1 实验材料 | 第81-82页 |
| 1.2 实验仪器 | 第82页 |
| 1.3 实验药品及试剂 | 第82页 |
| 1.4 几种主要溶液的配方 | 第82-83页 |
| 2 实验方法 | 第83-85页 |
| 2.1 建立人角膜内皮细胞的UVB诱导损伤模型 | 第83页 |
| 2.1.1 人角膜内皮细胞形态及生长状态的光镜检测 | 第83页 |
| 2.1.2 人角膜内皮细胞活力的MTT检测 | 第83页 |
| 2.2 UVB照射诱导人角膜内皮细胞损伤的机理研究 | 第83-84页 |
| 2.2.1 人角膜内皮细胞中ROS水平的DHE染色检测 | 第83-84页 |
| 2.2.2 人角膜内皮细胞中DNA氧化损伤的8-OHdG免疫荧光染色检测 | 第84页 |
| 2.2.3 人角膜内皮细胞中p53、p-p53及p21~(Cipl)表达的Western blot检测 | 第84页 |
| 2.3 抗氧化剂对人角膜内皮细胞氧化损伤的保护作用研究 | 第84-85页 |
| 2.3.1 人角膜内皮细胞活力的MTT检测 | 第84页 |
| 2.3.2 人角膜内皮细胞形态及生长状态的光镜检测 | 第84页 |
| 2.3.3 人角膜内皮细胞中DNA氧化损伤的8-OHdG免疫荧光染色检测 | 第84-85页 |
| 2.3.4 人角膜内皮细胞中ROS水平的DHE染色检测 | 第85页 |
| 2.3.5 人角膜内皮细胞中p53、p-p53及p21~(Cipl)表达的Western blot检测 | 第85页 |
| 3 实验结果 | 第85-100页 |
| 3.1 UVB照射对人角膜内皮细胞的影响作用 | 第85-89页 |
| 3.1.1 UVB照射对人角膜内皮细胞活力的影响作用 | 第85-86页 |
| 3.1.2 UVB照射对人角膜内皮细胞形态及生长的影响 | 第86-87页 |
| 3.1.3 UVB照射人角膜内皮细胞的形态及生长的恢复 | 第87-89页 |
| 3.2 UVB诱导人角膜内皮细胞氧化损伤的分子机理 | 第89-94页 |
| 3.2.1 UVB照射对人角膜内皮细胞中ROS水平的影响作用 | 第89-90页 |
| 3.2.2 UVB照射人角膜内皮细胞在恢复过程中ROS水平的变化 | 第90-91页 |
| 3.2.3 UVB照射人角膜内皮细胞在恢复过程中DNA氧化损伤的变化 | 第91-93页 |
| 3.2.4 UVB照射人角膜内皮细胞中p53、p-p53及p21~(Cipl)表达的影响作用 | 第93-94页 |
| 3.3 抗氧化剂对UVB诱导的人角膜内皮细胞氧化损伤的保护作用 | 第94-100页 |
| 3.3.1 四种抗氧化剂对人角膜内皮细胞活力的影响作用 | 第94-95页 |
| 3.3.2 Asc-2P对UVB照射人角膜内皮细胞形态及生长的影响作用 | 第95-96页 |
| 3.3.3 Asc-2P对UVB照射的人角膜内皮细胞DNA氧化损伤的影响作用 | 第96-97页 |
| 3.3.4 Asc-2P对UVB照射的人角膜内皮细胞中ROS水平的影响作用 | 第97-99页 |
| 3.3.5 Asc-2P对UVB照射的人角膜内皮细胞中p53、p-p53及p21~(Cipl)表达的影响作用 | 第99-100页 |
| 4 讨论 | 第100-102页 |
| 5 结论 | 第102-104页 |
| 全文总结 | 第104-107页 |
| 参考文献 | 第107-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 个人简历 | 第122页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第122页 |
