提要 | 第3-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
引言 | 第16-17页 |
实验一 大鼠骨髓间充质干细胞的分离和培养 | 第17-21页 |
1.材料 | 第17页 |
2.实验方法 | 第17页 |
3.代以后的细胞备用 | 第17-18页 |
4.讨论 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-21页 |
实验二 OGP诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化 | 第21-28页 |
1.材料 | 第21页 |
2.实验试剂 | 第21页 |
3.实验仪器 | 第21-22页 |
4.成骨细胞的培养 | 第22页 |
5.成骨细胞的形态学观察 | 第22页 |
6.成骨细胞的鉴定 | 第22-24页 |
6.1 碱性磷酸酶检测 | 第22-23页 |
6.2 矿化结节茜素染色观察 | 第23-24页 |
6.3 不同浓度OGP对成骨细胞增殖率的MTT检测 | 第24页 |
7.统计学方法 | 第24页 |
8.结果 | 第24-25页 |
8.1 倒置显微镜观察成骨细胞形态 | 第24页 |
8.2 成骨细胞鉴定结果 | 第24-25页 |
8.3 成骨细胞增殖率的MTT检测结果 | 第25页 |
9.讨论 | 第25-27页 |
参考文献 | 第27-28页 |
实验三 胎牛血清对成骨生长肽促进骨髓间充质干细胞增殖分化的影响 | 第28-37页 |
1 实验动物和主要试剂 | 第28页 |
2 仪器设备 | 第28-29页 |
3 方法 | 第29-30页 |
3.1 骨髓间充质原代细胞的分离培养和诱导分化 | 第29页 |
3.2 MTT噻唑蓝比色法测定不同条件下BMSCs的增殖 | 第29页 |
3.3 pNPP法测定细胞内碱性磷酸酶的活性 | 第29-30页 |
4.统计学分析 | 第30页 |
5.结果 | 第30-33页 |
5.1 BMSCs的形态观察 | 第30-31页 |
5.2 MTT检测不同FBS浓度对三种OGP浓度促进BMSCs增殖的影响 | 第31-32页 |
5.3 细胞内碱性磷酸酶的活性检测结果 | 第32-33页 |
6.讨论 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-37页 |
实验四 MAPK途径在OGP诱导骨髓间充质干细胞成骨分化过程中血管再生相关基因表达变化中的作用 | 第37-54页 |
1 材料 | 第37-38页 |
1.1 动物4周龄SD雄性大鼠,体重 160g左右,购自山东中医药大学实验动物中心 | 第37页 |
1.2 主要仪器 | 第37-38页 |
1.3 主要试剂DMEM(Invitrogen corporation) | 第38页 |
1.4 分组对照组(OGP诱导)组;OGP+ U0126组 | 第38页 |
2 方法 | 第38页 |
2.1 原代BMSCs的分离和培养 | 第38页 |
2.2 分组 | 第38页 |
2.3 BMSCs的成骨分化 | 第38页 |
3 RT-PCR检测c-myc、c-jun、atf-2、Angptl4、Fbln5、VEGFA、Cbfa1mRNA的表达 | 第38-41页 |
4 Western-blot(蛋白质印迹分析)检测Angptl4、Fbln5、VEGFA的表达 | 第41-42页 |
5 统计学处理方法 | 第42页 |
6 结果 | 第42-50页 |
7 讨论 | 第50-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
综述 | 第57-66页 |
综述一 | 第57-62页 |
参考文献 | 第60-62页 |
综述二 | 第62-66页 |
参考文献 | 第63-66页 |
主要符号表 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
查新报告 | 第68-76页 |
发表论文 | 第76-89页 |
详细摘要 | 第89-94页 |