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MAPK途径在OGP诱导骨髓间充质干细胞成骨分化过程中血管再生相关基因表达变化中的作用

提要第3-8页
ABSTRACT第8-13页
引言第16-17页
实验一 大鼠骨髓间充质干细胞的分离和培养第17-21页
    1.材料第17页
    2.实验方法第17页
    3.代以后的细胞备用第17-18页
    4.讨论第18-19页
    参考文献第19-21页
实验二 OGP诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化第21-28页
    1.材料第21页
    2.实验试剂第21页
    3.实验仪器第21-22页
    4.成骨细胞的培养第22页
    5.成骨细胞的形态学观察第22页
    6.成骨细胞的鉴定第22-24页
        6.1 碱性磷酸酶检测第22-23页
        6.2 矿化结节茜素染色观察第23-24页
        6.3 不同浓度OGP对成骨细胞增殖率的MTT检测第24页
    7.统计学方法第24页
    8.结果第24-25页
        8.1 倒置显微镜观察成骨细胞形态第24页
        8.2 成骨细胞鉴定结果第24-25页
        8.3 成骨细胞增殖率的MTT检测结果第25页
    9.讨论第25-27页
    参考文献第27-28页
实验三 胎牛血清对成骨生长肽促进骨髓间充质干细胞增殖分化的影响第28-37页
    1 实验动物和主要试剂第28页
    2 仪器设备第28-29页
    3 方法第29-30页
        3.1 骨髓间充质原代细胞的分离培养和诱导分化第29页
        3.2 MTT噻唑蓝比色法测定不同条件下BMSCs的增殖第29页
        3.3 pNPP法测定细胞内碱性磷酸酶的活性第29-30页
    4.统计学分析第30页
    5.结果第30-33页
        5.1 BMSCs的形态观察第30-31页
        5.2 MTT检测不同FBS浓度对三种OGP浓度促进BMSCs增殖的影响第31-32页
        5.3 细胞内碱性磷酸酶的活性检测结果第32-33页
    6.讨论第33-35页
    参考文献第35-37页
实验四 MAPK途径在OGP诱导骨髓间充质干细胞成骨分化过程中血管再生相关基因表达变化中的作用第37-54页
    1 材料第37-38页
        1.1 动物4周龄SD雄性大鼠,体重 160g左右,购自山东中医药大学实验动物中心第37页
        1.2 主要仪器第37-38页
        1.3 主要试剂DMEM(Invitrogen corporation)第38页
        1.4 分组对照组(OGP诱导)组;OGP+ U0126组第38页
    2 方法第38页
        2.1 原代BMSCs的分离和培养第38页
        2.2 分组第38页
        2.3 BMSCs的成骨分化第38页
    3 RT-PCR检测c-myc、c-jun、atf-2、Angptl4、Fbln5、VEGFA、Cbfa1mRNA的表达第38-41页
    4 Western-blot(蛋白质印迹分析)检测Angptl4、Fbln5、VEGFA的表达第41-42页
    5 统计学处理方法第42页
    6 结果第42-50页
    7 讨论第50-54页
结论第54-55页
参考文献第55-57页
综述第57-66页
    综述一第57-62页
        参考文献第60-62页
    综述二第62-66页
        参考文献第63-66页
主要符号表第66-67页
致谢第67-68页
查新报告第68-76页
发表论文第76-89页
详细摘要第89-94页

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