摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第1章 绪论 | 第12-20页 |
1.1 微生物转化简介 | 第12-13页 |
1.1.1 微生物转化的概念及意义 | 第12页 |
1.1.2 微生物转化的类型 | 第12-13页 |
1.2 微生物转化在新型抗生素开发中的应用 | 第13-14页 |
1.2.1 减小药物的毒副作用 | 第13-14页 |
1.2.2 提高药物的水溶性和生物利用率 | 第14页 |
1.2.3 增强抗耐药性 | 第14页 |
1.2.4 开发新型药物 | 第14页 |
1.3 纤维堆囊菌与埃博霉素 | 第14-18页 |
1.3.1 埃博霉素简介 | 第14-15页 |
1.3.2 埃博霉素的结构 | 第15-16页 |
1.3.3 埃博霉素的作用机理及优点 | 第16-17页 |
1.3.4 埃博霉素类似物的研究现状 | 第17-18页 |
1.3.5 制约埃博霉素类药物发展的因素 | 第18页 |
1.4 本文目的及意义 | 第18页 |
1.5 本课题研究内容及实验设计流程图 | 第18-20页 |
1.5.1 本文研究内容 | 第18-19页 |
1.5.2 实验设计流程图 | 第19-20页 |
第2章 埃博霉素A、B的制备 | 第20-26页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验材料 | 第20-21页 |
2.2.1 菌株 | 第20页 |
2.2.2 仪器 | 第20-21页 |
2.2.3 所用培养基配方 | 第21页 |
2.3 试验内容 | 第21-23页 |
2.3.1 纤维堆囊菌的活化和扩培 | 第21页 |
2.3.2 纤维堆囊菌的浅盘发酵 | 第21-22页 |
2.3.3 埃博霉素的解吸附 | 第22页 |
2.3.4 埃博霉素标准曲线绘制及样品浓度检测 | 第22-23页 |
2.4 结果与讨论 | 第23-24页 |
2.4.1 埃博霉素标准曲线的绘制 | 第23页 |
2.4.2 埃博霉素的总制备量 | 第23-24页 |
2.5 小结 | 第24-26页 |
第3章 转化菌株的分离,筛选和鉴定 | 第26-38页 |
3.1 引言 | 第26-27页 |
3.2 试验材料 | 第27-28页 |
3.2.1 试剂 | 第27页 |
3.2.2 实验仪器 | 第27页 |
3.2.3 所用培养基 | 第27-28页 |
3.3 试验内容 | 第28-32页 |
3.3.1 转化菌株的分离纯化 | 第28页 |
3.3.2 乙醇浓度对菌种生长的影响 | 第28-29页 |
3.3.3 埃博霉素转化菌种的筛选 | 第29页 |
3.3.4 细菌的基因组DNA提取 | 第29-30页 |
3.3.5 真菌的基因组DNA提取 | 第30-31页 |
3.3.6 DNA片段扩增及测序 | 第31-32页 |
3.4 结果与讨论 | 第32-36页 |
3.4.1 转化菌株的分离和纯化 | 第32页 |
3.4.2 菌株在不同乙醇浓度下的生长曲线 | 第32-33页 |
3.4.3 菌种筛选 | 第33-35页 |
3.4.4 转化菌的菌种鉴定 | 第35-36页 |
3.5 本章小结 | 第36-38页 |
第4章 转化产物的制备,纯化和结构鉴定 | 第38-50页 |
4.1 引言 | 第38页 |
4.2 实验材料 | 第38-39页 |
4.2.1 仪器 | 第38-39页 |
4.2.2 试剂 | 第39页 |
4.3 试验内容 | 第39-40页 |
4.3.1 转化产物的制备 | 第39页 |
4.3.2 转化产物的分离纯化 | 第39-40页 |
4.3.3 转化产物的质谱分析 | 第40页 |
4.3.4 埃博霉素及其转化产物的核磁共振分析 | 第40页 |
4.4 结果与讨论 | 第40-48页 |
4.4.1 伯克氏菌对埃博霉素A和埃博霉素B的转化结果及产物纯化 | 第40-42页 |
4.4.2 转化产物的质谱分析及结构推测 | 第42-44页 |
4.4.3 转化产物的核磁共振图谱分析 | 第44-48页 |
4.4.4 两种产物的结构分析及讨论 | 第48页 |
4.5 本章小结 | 第48-50页 |
第5章 转化产物的抑瘤效果分析 | 第50-56页 |
5.1 引言 | 第50页 |
5.2 试验材料 | 第50-51页 |
5.2.1 试验仪器 | 第50-51页 |
5.2.2 实验试剂及培养基 | 第51页 |
5.2.3 细胞 | 第51页 |
5.3 试验内容 | 第51-52页 |
5.3.1 Hela细胞的培养 | 第51-52页 |
5.3.2 MTT毒测转化产物的抑瘤活性 | 第52页 |
5.4 结果与讨论 | 第52-54页 |
5.4.1 两种产物与埃博霉素A和B的抑瘤活性对比 | 第52-53页 |
5.4.2 两种产物的抑瘤活性分析 | 第53-54页 |
5.5 本章小结 | 第54-56页 |
全文总结与展望 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附录 | 第64-72页 |
附录A 菌种分离时选取的土样来源及在两种培养基上分离出的菌种数量 | 第64-65页 |
附录B 转化菌株的 16s rDNA片段及ITS区DNA片段 | 第65-67页 |
附录C 埃博霉素A,B以及两种转化产物的 1H-NMR,13C-NMR谱图 | 第67-72页 |
致谢 | 第72-74页 |
在学期间主要研究成果 | 第74页 |