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埃博霉素A、B的微生物转化及产物抑瘤效果研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第1章 绪论第12-20页
    1.1 微生物转化简介第12-13页
        1.1.1 微生物转化的概念及意义第12页
        1.1.2 微生物转化的类型第12-13页
    1.2 微生物转化在新型抗生素开发中的应用第13-14页
        1.2.1 减小药物的毒副作用第13-14页
        1.2.2 提高药物的水溶性和生物利用率第14页
        1.2.3 增强抗耐药性第14页
        1.2.4 开发新型药物第14页
    1.3 纤维堆囊菌与埃博霉素第14-18页
        1.3.1 埃博霉素简介第14-15页
        1.3.2 埃博霉素的结构第15-16页
        1.3.3 埃博霉素的作用机理及优点第16-17页
        1.3.4 埃博霉素类似物的研究现状第17-18页
        1.3.5 制约埃博霉素类药物发展的因素第18页
    1.4 本文目的及意义第18页
    1.5 本课题研究内容及实验设计流程图第18-20页
        1.5.1 本文研究内容第18-19页
        1.5.2 实验设计流程图第19-20页
第2章 埃博霉素A、B的制备第20-26页
    2.1 引言第20页
    2.2 实验材料第20-21页
        2.2.1 菌株第20页
        2.2.2 仪器第20-21页
        2.2.3 所用培养基配方第21页
    2.3 试验内容第21-23页
        2.3.1 纤维堆囊菌的活化和扩培第21页
        2.3.2 纤维堆囊菌的浅盘发酵第21-22页
        2.3.3 埃博霉素的解吸附第22页
        2.3.4 埃博霉素标准曲线绘制及样品浓度检测第22-23页
    2.4 结果与讨论第23-24页
        2.4.1 埃博霉素标准曲线的绘制第23页
        2.4.2 埃博霉素的总制备量第23-24页
    2.5 小结第24-26页
第3章 转化菌株的分离,筛选和鉴定第26-38页
    3.1 引言第26-27页
    3.2 试验材料第27-28页
        3.2.1 试剂第27页
        3.2.2 实验仪器第27页
        3.2.3 所用培养基第27-28页
    3.3 试验内容第28-32页
        3.3.1 转化菌株的分离纯化第28页
        3.3.2 乙醇浓度对菌种生长的影响第28-29页
        3.3.3 埃博霉素转化菌种的筛选第29页
        3.3.4 细菌的基因组DNA提取第29-30页
        3.3.5 真菌的基因组DNA提取第30-31页
        3.3.6 DNA片段扩增及测序第31-32页
    3.4 结果与讨论第32-36页
        3.4.1 转化菌株的分离和纯化第32页
        3.4.2 菌株在不同乙醇浓度下的生长曲线第32-33页
        3.4.3 菌种筛选第33-35页
        3.4.4 转化菌的菌种鉴定第35-36页
    3.5 本章小结第36-38页
第4章 转化产物的制备,纯化和结构鉴定第38-50页
    4.1 引言第38页
    4.2 实验材料第38-39页
        4.2.1 仪器第38-39页
        4.2.2 试剂第39页
    4.3 试验内容第39-40页
        4.3.1 转化产物的制备第39页
        4.3.2 转化产物的分离纯化第39-40页
        4.3.3 转化产物的质谱分析第40页
        4.3.4 埃博霉素及其转化产物的核磁共振分析第40页
    4.4 结果与讨论第40-48页
        4.4.1 伯克氏菌对埃博霉素A和埃博霉素B的转化结果及产物纯化第40-42页
        4.4.2 转化产物的质谱分析及结构推测第42-44页
        4.4.3 转化产物的核磁共振图谱分析第44-48页
        4.4.4 两种产物的结构分析及讨论第48页
    4.5 本章小结第48-50页
第5章 转化产物的抑瘤效果分析第50-56页
    5.1 引言第50页
    5.2 试验材料第50-51页
        5.2.1 试验仪器第50-51页
        5.2.2 实验试剂及培养基第51页
        5.2.3 细胞第51页
    5.3 试验内容第51-52页
        5.3.1 Hela细胞的培养第51-52页
        5.3.2 MTT毒测转化产物的抑瘤活性第52页
    5.4 结果与讨论第52-54页
        5.4.1 两种产物与埃博霉素A和B的抑瘤活性对比第52-53页
        5.4.2 两种产物的抑瘤活性分析第53-54页
    5.5 本章小结第54-56页
全文总结与展望第56-58页
参考文献第58-64页
附录第64-72页
    附录A 菌种分离时选取的土样来源及在两种培养基上分离出的菌种数量第64-65页
    附录B 转化菌株的 16s rDNA片段及ITS区DNA片段第65-67页
    附录C 埃博霉素A,B以及两种转化产物的 1H-NMR,13C-NMR谱图第67-72页
致谢第72-74页
在学期间主要研究成果第74页

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