| 摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 英文缩略词 | 第16-17页 |
| 第一部分：MIF在骨肉瘤患者组织和血清中的表达及意义研究 | 第17-29页 |
| (一) 前言 | 第17-18页 |
| (二) 材料与方法 | 第18-22页 |
| 1. 实验仪器、试剂和材料 | 第18-20页 |
| 2. 苏木精和伊红（Haematoxylin and eosin，HE）染色和免疫组织化学（immunohistochemical，IHC）染色 | 第20页 |
| 3. 骨肉瘤及正常癌旁组织样本中蛋白的提取 | 第20-21页 |
| 4. Western Blot | 第21页 |
| 5. ELISA测试OS患者的血清MIF水平 | 第21-22页 |
| 6. 统计学分析 | 第22页 |
| (三) 结果 | 第22-25页 |
| (四) 讨论 | 第25页 |
| (五) 结论 | 第25页 |
| (六) 参考文献 | 第25-29页 |
| 第二部分：MIF通过在骨肉瘤细胞中激活RAS_MAPK通路促进肿瘤生长和肺转移 | 第29-42页 |
| (一) 前言 | 第29页 |
| (二) 实验试剂与方法 | 第29-34页 |
| 1. 实验仪器、试剂和材料 | 第29-30页 |
| 2. MIF刺激骨肉瘤细胞 | 第30-31页 |
| 3. 细胞培养以及RNA的提取 | 第31页 |
| 4. 骨肉瘤细胞中蛋白的提取 | 第31页 |
| 5. Western Blot | 第31-32页 |
| 6. qRT-PCR检测增殖，凋亡和迁移相关基因 | 第32-34页 |
| 7. 统计学分析 | 第34页 |
| (三) 结果 | 第34-39页 |
| (四) 讨论 | 第39页 |
| (五) 结论 | 第39页 |
| (六) 参考文献 | 第39-42页 |
| 第三部分：下调MIF抑制骨肉瘤细胞的增殖和转移能力的研究 | 第42-56页 |
| (一) 前言 | 第42页 |
| (二) 实验试剂与方法 | 第42-50页 |
| 1. 骨肉瘤细胞系、培养及转染所需试剂 | 第42-43页 |
| 2. 稳定抑制MIF表达的OS细胞的建立 | 第43-49页 |
| 3. CCK-8 测定细胞增殖 | 第49页 |
| 4. 流式细胞术测定细胞凋亡 | 第49页 |
| 5. Transwell测定细胞迁移和侵袭 | 第49-50页 |
| 6. 统计学分析 | 第50页 |
| (三) 结果 | 第50-54页 |
| (四) 讨论 | 第54页 |
| (五) 结论 | 第54-55页 |
| (六) 参考文献 | 第55-56页 |
| 第四部分：下调MIF抑制骨肉瘤生长与转移的体内研究 | 第56-72页 |
| (一) 前言 | 第56页 |
| (二) 实验动物与方法 | 第56-58页 |
| 1. 原位移植动物模型的构建所需材料 | 第56-57页 |
| 2. 用于观察骨肉瘤生长的小鼠异种移植模型的建立 | 第57页 |
| 3. 用于监测骨肉瘤的自发性肺转移的原位小鼠模型的建立 | 第57页 |
| 4. 石蜡切片和HE染色 | 第57-58页 |
| 5. 统计学分析 | 第58页 |
| (三) 结果 | 第58-70页 |
| 1. MIF的下调在体内抑制骨肉瘤的生长 | 第58-62页 |
| 2. MIF的下调在体内抑制骨肉瘤的肺转移 | 第62-70页 |
| (四) 讨论 | 第70页 |
| (五) 结论 | 第70页 |
| (六) 参考文献 | 第70-72页 |
| 全文小结 | 第72-79页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 综述1 骨肉瘤的诊断与治疗研究进展 | 第79-93页 |
| 参考文献 | 第89-93页 |
| 综述2 MIF概述以及RAS/MAPK通路研究现状 | 第93-108页 |
| 参考文献 | 第102-108页 |
| 攻读学位期间研究成果 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
