摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 背景及相关研究进展 | 第9-14页 |
第二章 生理状态下NCX1的生物钟调节 | 第14-29页 |
2.1 材料与方法 | 第14-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第14页 |
2.1.2 RNA提取 | 第14页 |
2.1.3 总RNA反转录 | 第14-15页 |
2.1.4 荧光实时定量PCR (RealTime PCR)检测 | 第15-17页 |
2.1.5 MicroRNA-1的检测 | 第17页 |
2.1.6 分离和培养原代新生大鼠心室肌细胞 | 第17-18页 |
2.1.7 从小鼠心室组织中提取总蛋白 | 第18页 |
2.1.8 免疫印迹法(Western blot)检测蛋白的相对表达量 | 第18-19页 |
2.1.9 冰冻切片 | 第19页 |
2.1.10 HE染色 | 第19页 |
2.1.11 RNA干扰 | 第19-20页 |
2.1.12 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第20-21页 |
2.1.13 质粒构建 | 第21页 |
2.1.14 双荧光素酶报告基因检测 | 第21页 |
2.1.15 HL-1细胞的培养 | 第21-22页 |
2.1.16 TAC手术 | 第22页 |
2.2 数据处理与统计 | 第22-23页 |
2.3 实验结果与分析 | 第23-28页 |
2.3.1 心脏内具有生物节律的离子通道筛选 | 第23-24页 |
2.3.2 心脏中外周生物钟的存在 | 第24页 |
2.3.3 NCX1在体内呈现昼夜节律表达 | 第24-25页 |
2.3.4 NCX的节律性变化直接受到生物钟基因BMAL1的调控 | 第25-26页 |
2.3.5 体外细胞水平验证NCX1的节律性表达 | 第26-27页 |
2.3.6 siRNA干扰Bmal1的表达后NCX1的表达也随之下降 | 第27-28页 |
本章小结 | 第28-29页 |
第三章 病理状态下NCX1的生物钟研究 | 第29-36页 |
3.1 材料与方法 | 第29页 |
3.2 数据处理与统计 | 第29页 |
3.3 实验结果与分析 | 第29-35页 |
3.3.1 制备小鼠心衰模型 | 第29页 |
3.3.2 处于肥大期的心脏内Bmal1代偿性的降低了NCX1的表达 | 第29-32页 |
3.3.3 肥大信号对生物钟震荡的影响在体外也存在 | 第32-34页 |
3.3.4 衰竭的心脏失去生物钟节律导致NCX1的表达维持在较高水平 | 第34-35页 |
本章小结 | 第35-36页 |
全文讨论 | 第36-39页 |
文献综述 | 第39-48页 |
参考文献 | 第48-57页 |
附录 | 第57-60页 |
在读期间研究成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |