中文摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
英文缩略词表 | 第11-14页 |
第1章 引言 | 第14-35页 |
第1节 背景知识 | 第14-30页 |
1 肿瘤的基因治疗 | 第14-16页 |
2 肿瘤基因治疗的载体 | 第16-20页 |
3 条件复制性腺病毒 | 第20-26页 |
4 肿瘤特异性启动子 | 第26-30页 |
第2节 论文设计 | 第30-35页 |
1 靶细胞系的选择 | 第30-31页 |
2 论文目的 | 第31-33页 |
3 实验设计 | 第33-35页 |
第2章 材料与方法 | 第35-50页 |
第1节 实验材料 | 第35-39页 |
1 细胞、质粒、病毒和动物 | 第35页 |
2 主要试剂 | 第35-36页 |
3 抗体 | 第36-37页 |
4 主要仪器 | 第37页 |
5 常规试剂 | 第37-39页 |
第2节 实验方法 | 第39-50页 |
1 E1抗体的制备 | 第39页 |
2 实验细胞COX-2的表达水平的检测 | 第39-41页 |
3 重组条件复制性腺病毒的获得 | 第41-46页 |
4 Cox-2启动子在人脑胶质瘤细胞中的特异性启动 | 第46-47页 |
5 在体外Ade-Cox-2-E1对于人脑胶质瘤细胞的特异性杀伤 | 第47-48页 |
6 在体内Ade-Cox-2-E1对于人脑胶质瘤细胞的抑制作用 | 第48-50页 |
第3章 结果与讨论 | 第50-73页 |
第1节 腺病毒载体的选择策略 | 第50-51页 |
第2节 E1A抗体的制备 | 第51-53页 |
1 pRsetB-E1A原核表达质粒的构建 | 第51-52页 |
2 重组E1A蛋白的表达和纯化 | 第52-53页 |
3 多克隆抗体的制备和抗体检测 | 第53页 |
第3节 COX-2在实验细胞中的表达 | 第53-55页 |
1 Cox-2检测方法的选择 | 第53-54页 |
2 流式细胞仪检测 | 第54页 |
3 RT-PCR检测 | 第54-55页 |
第4节 重组条件复制性腺病毒的获得 | 第55-61页 |
1 重组腺病毒质粒的构建 | 第55-58页 |
2 重组腺病毒的包装和扩增 | 第58-59页 |
3 重组腺病毒的纯化 | 第59页 |
4 重组腺病毒的鉴定 | 第59-61页 |
第5节 COX-2启动子在人脑胶质瘤细胞中的特异性启动 | 第61-63页 |
1 荧光素酶报告基因 | 第61页 |
2 Cox-2启动子在实验细胞中的启动活性 | 第61-63页 |
第6节 在体外ADE-COX-2-E1对于人脑胶质瘤细胞的特异性杀伤 | 第63-67页 |
1 Ad-Blank与wAd | 第63页 |
2 Ade-Cox-2-E1感染肿瘤细胞E1A蛋白的特异性表达 | 第63-64页 |
3 Ade-Cox-2-E1对于肿瘤细胞生长的特异性抑制 | 第64-67页 |
第7节 在体内ADE-COX-2-E1对于人脑胶质瘤细胞的抑制作用 | 第67-71页 |
1 采用BalB/C裸鼠作为肿瘤模型 | 第67页 |
2 Ade-Cox-2-E1对于荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制 | 第67-70页 |
3 Ad-Cox-2-E1对于荷瘤裸鼠主要脏器的影响 | 第70-71页 |
第8节 条件复制性腺病毒治疗肿瘤中的问题及展望 | 第71-73页 |
第4章 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |