| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第18-34页 |
| 1.1 引言 | 第18-31页 |
| 1.1.1 白藜芦醇概述 | 第18-19页 |
| 1.1.2 白藜芦醇的生物活性 | 第19-20页 |
| 1.1.3 白藜芦醇的生物合成 | 第20-26页 |
| 1.1.4 融合基因技术 | 第26-28页 |
| 1.1.5 重组微生物合成白藜芦醇的研究进展 | 第28-31页 |
| 1.2 研究目的和主要内容 | 第31-33页 |
| 1.2.1 关键科学问题与研究目标 | 第31-32页 |
| 1.2.2 主要研究内容 | 第32-33页 |
| 1.3 研究技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 拟南芥 4CL基因的克隆及其原核表达的研究 | 第34-62页 |
| 2.1 试验材料 | 第34-36页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第34页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第34页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第34-35页 |
| 2.1.5 培养基 | 第35页 |
| 2.1.6 相关溶液及缓冲液 | 第35页 |
| 2.1.7 引物 | 第35-36页 |
| 2.2 试验方法 | 第36-49页 |
| 2.2.1 Trizol法提取拟南芥叶片总RNA | 第36-37页 |
| 2.2.2 拟南芥cDNA的合成 | 第37-38页 |
| 2.2.3 拟南芥 4CL基因片段的分离 | 第38-39页 |
| 2.2.4 4CL基因的克隆 | 第39-42页 |
| 2.2.5 测序鉴定及其序列分析 | 第42页 |
| 2.2.6 表达载体pET-30a/4CL的构建及其转化 | 第42-47页 |
| 2.2.7 拟南芥 4CL基因的原核表达 | 第47-49页 |
| 2.3 结果与分析 | 第49-60页 |
| 2.3.1 拟南芥总RNA | 第49-50页 |
| 2.3.2 4CL基因PCR扩增结果 | 第50-51页 |
| 2.3.3 4CL基因序列分析 | 第51-57页 |
| 2.3.4 表达载体pET-30a/4CL的构建及其鉴定 | 第57-59页 |
| 2.3.5 4CL基因的原核表达 | 第59-60页 |
| 2.4 本章小结 | 第60-62页 |
| 第三章 花生RS基因的克隆及其原核表达的研究 | 第62-81页 |
| 3.1 试验材料 | 第62-63页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第62页 |
| 3.1.2 菌株与质粒 | 第62页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第62页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第62页 |
| 3.1.5 培养基 | 第62页 |
| 3.1.6 缓冲液 | 第62页 |
| 3.1.7 引物 | 第62-63页 |
| 3.2 试验方法 | 第63-71页 |
| 3.2.1 花生嫩叶总RNA的提取 | 第63-64页 |
| 3.2.2 花生cDNA的合成 | 第64-65页 |
| 3.2.3 花生RS基因片段的分离 | 第65-66页 |
| 3.2.4 RS基因的克隆 | 第66页 |
| 3.2.5 测序鉴定及其序列分析 | 第66页 |
| 3.2.6 表达载体pET-30a/RS的构建及其转化 | 第66-70页 |
| 3.2.7 花生RS基因的原核表达 | 第70-71页 |
| 3.3 结果与分析 | 第71-79页 |
| 3.3.1 花生总RNA | 第71页 |
| 3.3.2 RS基因PCR扩增结果 | 第71-72页 |
| 3.3.3 RS基因序列分析 | 第72-76页 |
| 3.3.4 表达载体pET-30a/RS的构建及其鉴定 | 第76-78页 |
| 3.3.5 RS基因的原核表达 | 第78-79页 |
| 3.4 本章小结 | 第79-81页 |
| 第四章 4CL::RS融合基因的构建及其原核表达的研究 | 第81-100页 |
| 4.1 试验材料 | 第81-83页 |
| 4.1.1 菌株与质粒 | 第81页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第81页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第81页 |
| 4.1.4 培养基 | 第81-82页 |
| 4.1.5 相关溶液及缓冲液 | 第82页 |
| 4.1.6 引物 | 第82-83页 |
| 4.2 试验方法 | 第83-93页 |
| 4.2.1 柔性linker的设计 | 第83页 |
| 4.2.2 引物设计 | 第83-84页 |
| 4.2.3 4CL::RS融合基因的构建 | 第84-88页 |
| 4.2.4 pET-30a/4CL::RS的构建及其转化 | 第88-89页 |
| 4.2.5 pET-30a/4CL::RS的阳性鉴定 | 第89-91页 |
| 4.2.6 融合基因的诱导表达及其纯化 | 第91-92页 |
| 4.2.7 Western blot分析 | 第92-93页 |
| 4.3 结果与分析 | 第93-98页 |
| 4.3.1 4CL::RS融合基因的克隆 | 第93-94页 |
| 4.3.2 4CL::RS融合基因的序列分析 | 第94-96页 |
| 4.3.3 原核表达载体的鉴定 | 第96-97页 |
| 4.3.4 4CL::RS融合基因的诱导表达 | 第97-98页 |
| 4.3.5 Western blot分析 | 第98页 |
| 4.4 本章总结 | 第98-100页 |
| 第五章 重组菌生物合成白藜芦醇的研究 | 第100-106页 |
| 5.1 试验材料 | 第100页 |
| 5.1.1 菌株与质粒 | 第100页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第100页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第100页 |
| 5.1.4 培养基 | 第100页 |
| 5.2 试验方法 | 第100-103页 |
| 5.2.1 白藜芦醇的液相检测方法 | 第100-101页 |
| 5.2.2 白藜芦醇标准曲线的建立 | 第101页 |
| 5.2.3 重组菌发酵合成白藜芦醇 | 第101-103页 |
| 5.3 结果及分析 | 第103-104页 |
| 5.3.1 高效液相色谱检测与紫外吸收 | 第103-104页 |
| 5.3.2 白藜芦醇的产量及其转化率 | 第104页 |
| 5.4 本章小结 | 第104-106页 |
| 第六章 主要结论 | 第106-108页 |
| 6.1 结论 | 第106-107页 |
| 6.2 展望 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-116页 |
| 附录A | 第116-119页 |
| 附录B | 第119-122页 |
| 附录C | 第122-124页 |
| 在读期间的学术研究 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
