| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 主要英文缩略词索引 | 第19-21页 |
| 第一章 绪论 | 第21-37页 |
| 1.1 APS概述 | 第21-22页 |
| 1.2 APS诊断和血栓形成风险评估 | 第22页 |
| 1.3 β2GPI与抗β2GPI抗体 | 第22-25页 |
| 1.4 TLR4及其介导的信号途径 | 第25-26页 |
| 1.5 TLR4与aPL诱导的细胞激活：体外研究 | 第26-31页 |
| 1.5.1 TLR4与aPL诱导的内皮细胞激活 | 第26-27页 |
| 1.5.2 TLR4与aPL诱导的单核细胞激活 | 第27-31页 |
| 1.5.3 TLR4与aPL诱导的滋养细胞激活 | 第31页 |
| 1.6 TLR4与aPL诱导的血栓和流产：体内研究 | 第31-33页 |
| 1.6.1 TLR4与aPL诱导的血栓 | 第31-33页 |
| 1.6.2 TLR4与aPL诱导的流产 | 第33页 |
| 1.7 TLR4介导的相关信号转导通路的阻断研究与APS治疗 | 第33-34页 |
| 1.8 尚未解决的问题 | 第34-35页 |
| 1.9 结语 | 第35-37页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验方案设计与意义 | 第37-41页 |
| 2.1 研究目的 | 第37页 |
| 2.2 研究方法与技术 | 第37-38页 |
| 2.3 实验方案设计 | 第38-39页 |
| 2.4 研究意义 | 第39-41页 |
| 第三章 β2糖蛋白Ⅰ多肽抗体的制备与鉴定 | 第41-65页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第41-45页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第41-42页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 其它试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.4 主要溶液 | 第43-44页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第44-45页 |
| 3.2 方法 | 第45-54页 |
| 3.2.1 多肽抗原的设计与合成 | 第45页 |
| 3.2.2 动物免疫与抗血清制备 | 第45页 |
| 3.2.3 间接ELISA检测抗血清效价 | 第45-46页 |
| 3.2.4 多肽抗体纯化 | 第46页 |
| 3.2.5 双抗体夹心ELISA检测抗β2GPI多肽的表位特异性 | 第46-47页 |
| 3.2.6 小鼠腹腔巨噬细胞提取与体外培养 | 第47-48页 |
| 3.2.7 Western blot分析p-p38、p-NF-κB p65和TF表达情况 | 第48-50页 |
| 3.2.8 Western blot分析抗β2GPI多肽抗体反应性 | 第50页 |
| 3.2.9 细胞总RNA的提取和逆转录 | 第50-52页 |
| 3.2.10 RT-qPCR分析TF mRNA | 第52-54页 |
| 3.2.11 实验性抗磷脂综合征(experimental antiphospholipid antibody syndrome,EAPS)模型小鼠的建立 | 第54页 |
| 3.2.12 统计学分析 | 第54页 |
| 3.3 结果 | 第54-61页 |
| 3.3.1 β2GPI多肽抗原的设计与合成 | 第54-56页 |
| 3.3.2 间接ELISA检测抗血清效价 | 第56-57页 |
| 3.3.3 β2GPI多肽抗体的纯化与特异性鉴定 | 第57页 |
| 3.3.4 β2GPI多肽抗体的表位特异性分析 | 第57-58页 |
| 3.3.5 抗β2GPI多肽抗体/β2GPI复合物增强小鼠腹腔巨噬细胞p38、NF-κBp65磷酸化 | 第58-59页 |
| 3.3.6 抗p2GPI多肽抗体/β2GPI复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞TF mRNA及蛋白表达 | 第59-60页 |
| 3.3.7 EAPS模型小鼠的建立 | 第60-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-65页 |
| 第四章 TLR4在aPL诱导的EAPS小鼠TF表达和动静脉血栓中的作用 | 第65-87页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第66-67页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第66页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第66-67页 |
| 4.1.3 其它试剂 | 第67页 |
| 4.1.4 主要溶液 | 第67页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第67页 |
| 4.2 方法 | 第67-73页 |
| 4.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞提取与体外培养 | 第67-68页 |
| 4.2.2 Western blot法检测体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞TF蛋白表达 | 第68页 |
| 4.2.3 RT-qPCR检测体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞TF mRNA | 第68页 |
| 4.2.4 EAPS小鼠模型的建立 | 第68-69页 |
| 4.2.5 EAPS小鼠TF活性检测 | 第69页 |
| 4.2.6 免疫荧光检测EAPS小鼠腹腔巨噬细胞TF蛋白表达 | 第69-70页 |
| 4.2.7 石蜡切片制备 | 第70-71页 |
| 4.2.8 HE染色 | 第71页 |
| 4.2.9 免疫组化检测股动脉内皮细胞TF表达 | 第71-72页 |
| 4.2.10 FeC13诱导的血栓模型的建立 | 第72-73页 |
| 4.2.11 CF633荧光染料标记的抗CD41单克隆抗体Fab片段制备 | 第73页 |
| 4.2.12 统计学分析 | 第73页 |
| 4.3 结果 | 第73-84页 |
| 4.3.1 TLR4对anti-β2GPI/β2GPI复合物体外诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达TF的影响 | 第73-75页 |
| 4.3.2 TLR4参与anti-β2GPI和IgG-APS诱导的EAPS小鼠腹腔巨噬细胞TF蛋白表达 | 第75-77页 |
| 4.3.3 TLR4参与anti-β2GPI和IgG-APS诱导的EAPS小鼠股动脉内皮细胞TF蛋白表达 | 第77-78页 |
| 4.3.4 Anti-β2GPI和IgG-APS诱导TF活性在C3H/HeJ小鼠降低 | 第78-79页 |
| 4.3.5 FeCl_3诱导的EAPS小鼠颈动脉血栓模型的建立 | 第79-80页 |
| 4.3.6 TLR4介导anti-β2GPI诱导的动脉血栓形成 | 第80-81页 |
| 4.3.7 FeCl_3诱导的EAPS小鼠股静脉血栓模型的建立 | 第81-83页 |
| 4.3.8 TLR4介导anti-β2GPI诱导的股静脉血栓形成 | 第83-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-87页 |
| 第五章 TLR4在aPL诱导EAPS小鼠表达血栓相关炎症因子和粘附分子中的作用 | 第87-101页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第87-88页 |
| 5.1.1 主要材料 | 第87页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第87-88页 |
| 5.1.3 其它试剂 | 第88页 |
| 5.1.4 主要溶液 | 第88页 |
| 5.1.5 主要仪器 | 第88页 |
| 5.2 方法 | 第88-92页 |
| 5.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞提取与体外培养 | 第88页 |
| 5.2.2 EAPS小鼠模型的建立 | 第88-89页 |
| 5.2.3 Western blot分析 | 第89页 |
| 5.2.4 RT-qPCR分析 | 第89-91页 |
| 5.2.5 细胞免疫荧光染色 | 第91-92页 |
| 5.2.6 统计学分析 | 第92页 |
| 5.3 结果 | 第92-98页 |
| 5.3.1 TLR4对anti-β2GPI/β2GPI复合物体外诱导的小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL1β和IL6的影响 | 第92-94页 |
| 5.3.2 TLR4参与anti-β2GPI和IgG-APS诱导的EAPS小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL1β、IL6蛋白表达 | 第94-96页 |
| 5.3.4 TLR4介导anti-β2GPI和IgG-APS诱导的EAPS小鼠主动脉表达粘附分子 | 第96-98页 |
| 5.4 讨论 | 第98-101页 |
| 第6章 主要结论、学术创新与展望 | 第101-103页 |
| 6.1 主要结论 | 第101页 |
| 6.2 学术创新 | 第101-102页 |
| 6.3 展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第115页 |
| 一、攻读博士学位期间发表的文章 | 第115页 |
| 二、攻读博士学位期间参加的学术会议 | 第115页 |
| 三、攻读博士学位期间参加的课题 | 第115页 |
