摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 选题的目的、意义 | 第10-11页 |
1.2 人参皂苷的研究进展 | 第11-16页 |
1.2.1 人参皂苷的种类及药理作用 | 第11-12页 |
1.2.2 人参皂苷的生物合成途径 | 第12-14页 |
1.2.3 人参皂苷合成途径中的相关酶基因 | 第14-16页 |
1.3 提高人参皂苷生产的相关研究 | 第16-18页 |
1.4 发根农杆菌介导的遗传转化 | 第18-20页 |
第2章 人参 D12H 基因过量表达载体的构建 | 第20-38页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第20-23页 |
2.2.1 实验仪器 | 第20-21页 |
2.2.2 材料与试剂 | 第21-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-32页 |
2.3.1 人参发根的继代培养 | 第23-24页 |
2.3.2 人参发根的处理及 RNA 提取 | 第24-25页 |
2.3.3 反转录合成人参发根 cDNA | 第25-26页 |
2.3.4 人参发根中 D12H 基因的克隆 | 第26-28页 |
2.3.5 人参过量表达载体 pBI121-D12H 的构建 | 第28-32页 |
2.4 实验结果与分析 | 第32-35页 |
2.4.1 提取人参发根总 RNA | 第32页 |
2.4.2 引物设计 | 第32-33页 |
2.4.3 D12H 基因扩增与纯化 | 第33-34页 |
2.4.4 过量表达载体 pBI121-D12H 鉴定 | 第34-35页 |
2.5 讨论 | 第35-36页 |
2.6 本章小结 | 第36-38页 |
第3章 过量表达工程菌的构建及人参遗传转化 | 第38-52页 |
3.1 引言 | 第38页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第38-40页 |
3.2.1 实验仪器 | 第38-39页 |
3.2.2 材料与试剂 | 第39-40页 |
3.3 实验方法 | 第40-45页 |
3.3.1 菌种的活化 | 第40页 |
3.3.2 工程菌 A4-pBI121-D12H 的构建 | 第40-42页 |
3.3.3 人参的遗传转化 | 第42-43页 |
3.3.4 人参遗传转化的鉴定 | 第43-45页 |
3.4 结果与分析 | 第45-49页 |
3.4.1 过量表达载体工程菌的鉴定 | 第45-46页 |
3.4.2 过量表达人参发根体系的建立 | 第46-47页 |
3.4.3 过量表达人参发根的鉴定 | 第47-49页 |
3.5 讨论 | 第49-50页 |
3.6 本章小结 | 第50-52页 |
第4章 过量表达 D12H 基因对人参皂苷含量的影响 | 第52-62页 |
4.1 引言 | 第52页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第52-53页 |
4.2.1 实验仪器 | 第52-53页 |
4.2.2 材料与试剂 | 第53页 |
4.3 实验方法 | 第53-56页 |
4.3.1 人参发根生长曲线绘制 | 第53-54页 |
4.3.2 人参发根总皂苷含量测定 | 第54-55页 |
4.3.3 人参发根单体皂苷(Rg1,Re,Rb1)含量测定 | 第55-56页 |
4.4 结果与分析 | 第56-61页 |
4.4.1 人参发根生长曲线的绘制 | 第56-57页 |
4.4.2 人参发根总皂苷含量 | 第57-58页 |
4.4.3 过量表达对人参皂苷(Rg1,Re,Rb1)含量的影响 | 第58-61页 |
4.5 讨论 | 第61页 |
4.6 本章小结 | 第61-62页 |
第5章 结论与展望 | 第62-64页 |
5.1 结论 | 第62-63页 |
5.2 展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
致谢 | 第72页 |