| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-29页 |
| 第一章 Cre 位点特异性重组酶研究概述 | 第11-23页 |
| ·Cre/loxP 系统的研究概述 | 第11-13页 |
| ·Cre/loxP 位点特异性重组系统的作用方式 | 第13-14页 |
| ·Cre/loxP 位点特异性重组系统的优势 | 第14页 |
| ·Cre/loxP 位点特异性重组系统的作用原理 | 第14-15页 |
| ·Cre 重组酶的结构与功能 | 第15-16页 |
| ·Cre/loxP 位点特异性重组系统在真核生物中的应用 | 第16-21页 |
| ·Cre/loxP 系统在转基因生物的筛选标记基因敲出方面的应用 | 第16-18页 |
| ·Cre/loxP 系统在基因克隆中的应用 | 第18-19页 |
| ·基因功能的鉴定 | 第19-20页 |
| ·基因捕获(Gene trap) | 第20页 |
| ·染色体工程 | 第20-21页 |
| ·Cre/loxP 系统用于转基因生物安全性评价 | 第21-23页 |
| 第二章 蛋白转导技术研究概述 | 第23-29页 |
| ·穿膜太的简介 | 第23-24页 |
| ·穿膜肽的结构 | 第24-25页 |
| ·蛋白转导结构域（PTD）的作用特点 | 第25-26页 |
| ·PTD 的作用机制 | 第26-27页 |
| ·展望 | 第27-29页 |
| 实验部分 | 第29-52页 |
| 第三章 Cre 融合蛋白原核表达载体构建 | 第29-38页 |
| ·材料和方法 | 第29-35页 |
| ·材料与试剂 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·结果 | 第35-37页 |
| ·目的片段 Cre 基因的 PCR 扩增结果 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的构建、转化与鉴定 | 第36页 |
| ·序列测序比对结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第四章 Cre 融合蛋白的诱导表达、纯化及 Western blot 鉴定 | 第38-44页 |
| ·材料和方法 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·蛋白电泳及 Western blot 鉴定 | 第40-41页 |
| ·蛋白电泳及考马斯亮蓝染色 | 第40页 |
| ·Western Blot 鉴定 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-43页 |
| ·蛋白条件优化结果 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及 Western blot 鉴定 | 第42页 |
| ·融合蛋白的纯化结果 | 第42-43页 |
| ·Western blot 鉴定结果 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第五章 Cre 融合蛋白的穿膜活性研究 | 第44-52页 |
| ·材料与方法 | 第44-47页 |
| ·材料与试剂 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·结果 | 第47-50页 |
| ·细胞水平上验证载体 pACMV-stop-EGFP 功能 | 第47-48页 |
| ·检测细胞系 293-C31-L2GFP 功能验证 | 第48-49页 |
| ·蛋白转导结果 | 第49页 |
| ·流式细胞仪检测结果 | 第49-50页 |
| ·HNTC(His-NLS-TAT-Cre) 蛋白的亚细胞定位情况 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 结论与创新点 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 英文缩略词表 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简介 | 第68页 |
